【摘要】：質(zhì)譜技術(shù)因其具有高靈敏度、高準確性、快速、易于自動化等特點，已逐漸成為生命科學(xué)研究領(lǐng)域中不可或缺的分析手段。在傳統(tǒng)的質(zhì)譜分析中，生物樣品通常需要經(jīng)過分離、萃取等較復(fù)雜的預(yù)處理過程，耗時費力，而且很可能會損失樣品中的一些有用信息。近年來，出現(xiàn)了多種新型的常壓質(zhì)譜技術(shù)，使得生物樣品可以在只需極少甚至不需要預(yù)處理的條件下直接在常壓環(huán)境中完成離子化并被引入質(zhì)譜儀分析。這些新型的質(zhì)譜技術(shù)推動了生命分析領(lǐng)域的迅速發(fā)展。本論文介紹了幾種新型常壓質(zhì)譜技術(shù)在血清、痰液及生物組織分析中的應(yīng)用，主要內(nèi)容包括： 1.無需樣品預(yù)處理，采用自制的納升級微量取樣器，利用DAPCI-MS技術(shù)對微量血清和痰液進行直接分析，并結(jié)合多元統(tǒng)計主成分分析法（PCA）進行數(shù)據(jù)處理。結(jié)果表明，DAPCI能檢測出微量血清和痰液中豐富的樣品信息，證明了耦合微量取樣器的DAPCI-MS技術(shù)，是一種微創(chuàng)、簡易、靈敏的的技術(shù)手段，適用于珍稀樣品的分析。 2.無需復(fù)雜樣品預(yù)處理，利用ND-EESI-MS技術(shù)，對非小細胞肺癌（NSCLC）患者和非肺癌志愿者的痰液樣品進行直接分析，并結(jié)合PCA進行數(shù)據(jù)處理。結(jié)果表明，ND-EESI-MS技術(shù)能耐受粘稠基質(zhì)的影響，有效地解吸并檢測痰液樣品中的小分子化合物，且利用PCA能有效區(qū)分NSCLC組和對照組，說明該方法結(jié)合PCA，有助于快速、無創(chuàng)地診斷NSCLC。 3.無需樣品預(yù)處理，利用Tip-Spray-MS技術(shù)，對生物組織進行直接分析，并結(jié)合PCA進行數(shù)據(jù)處理。結(jié)果表明，Tip-Spray-MS技術(shù)具有快速、靈敏、高通量、需樣量少等特點，可作為臨床活組織檢測的輔助分析手段，，且利用PCA能有效區(qū)分肺癌組與對照組，為肺癌的早期診斷提供了新的技術(shù)思路。 4.開發(fā)了內(nèi)部電噴霧萃取電離質(zhì)譜（Internal EESI-MS）技術(shù)，探索了InternalEESI的機理，并利用該技術(shù)對生物組織進行了直接分析。結(jié)果表明，萃取解吸附作用在Internal EESI過程中起重要作用，且該方法用于生物組織分析，具有較高的靈敏度，能萃取出樣品內(nèi)部大量的物質(zhì)。而選擇不同極性的ESI溶劑，可以獲取樣品中不同的物質(zhì)信號，從而能更全面的獲取樣品內(nèi)部信息，可為臨床組織活檢提供更多的生物組織中的化學(xué)信息。
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圖片說明： 圖 1.1 DAPCI 的示意圖a 無氣液輔助的 DAPCI；b 有氣液輔助的 DAPCIFig 1.1 Schematic illustration of the DAPCI sourcea) Schematic illustration of DAPCI without any gas or liquild; (b) Schematic illustration of DAPCIwith gas and liquild auxiliaryDAPCI 具有以下特點：（1）能產(chǎn)生高密度的初級試劑離子，因此具有比 DESI離子源更高的靈敏度，對弱極性和非極性物質(zhì)都有較高的靈敏度。（2）兩種工作模的靈活應(yīng)用，可以對粉末、固體、液體等多種形態(tài)物質(zhì)進行快速檢測。（3）可以在任何有毒化學(xué)試劑的條件下工作，對樣品無污染，有利于對珍惜樣品進行無損分析。4）由于輔助氣體和液體都可以根據(jù)實際樣品的不同物化性質(zhì)進行相應(yīng)的調(diào)整，可更好的提高離子化效率。（5）可以方便的與各種常見的質(zhì)譜儀聯(lián)用，且已經(jīng)研制出自動化的 DAPCI 離子源，方便進行更精確的三維調(diào)節(jié)，提高了該技術(shù)的靈敏度和確性。因此，該方法具有靈敏度較高、選擇性好、適用范圍寬、易于小型化等特點，用于藥品、食品、生物樣品等實際樣品的非破壞、無污染檢測。.2.2 DAPCI-MS 在生物樣品中的應(yīng)用
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圖片說明： 有靈敏度高、解吸能力強等特點，在生物樣品分析APCI 能將大分子帶上更多電荷，縮小蛋白檢測范儀器檢測超高分子量大分子。電離質(zhì)譜技術(shù)及其在生物樣品分析中的應(yīng)結(jié)構(gòu)及原理離（EESI）技術(shù)最早是為了實時在線的連續(xù)監(jiān)測液技術(shù)。常規(guī)的 EESI 源主要由電噴霧通道和樣品引于產(chǎn)生初級帶電試劑（甲醇或水）液滴，與樣品敞的三維空間內(nèi)進行發(fā)生碰撞，進行在線的液液萃物被萃取電離，在 N2的吹掃、干燥及較高溫度的劑過程，使得被分析物由凝聚相進入氣相，形成待操作相對靈活，在實驗中可根據(jù)樣品的形態(tài)和待調(diào)整，以達到最好的檢測效果�？烧{(diào)節(jié)的儀器條樣口的角度（α），距離（a），電噴霧通道與樣品通化氣流速、試劑和樣品流速、電離電壓等。
【學(xué)位授予單位】：東華理工大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R115;O657.63

【參考文獻】

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1 胡斌;韓京;楊水平;李建強;陳煥文;;表面解吸常壓化學(xué)電離質(zhì)譜法快速檢測生物樣品中痕量蛋白質(zhì)[A];第十屆中國化學(xué)會分析化學(xué)年會暨第十屆全國原子光譜學(xué)術(shù)會議論文摘要集[C];2009年

本文編號：2514103