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L-阿拉伯糖對骨骼肌胰島素PI3K通路的影響

發(fā)布時間:2019-03-27 21:01
【摘要】:L-阿拉伯糖是一種五碳醛糖,研究表明,它具有降血糖、血脂、血壓,減少內臟器官脂肪積累、減緩體重增長等多種生物活性,被廣泛應用于食品、醫(yī)學、化工等多種領域。本文以糖尿病大鼠為實驗模型,通過對實驗大鼠狀態(tài)和股四頭肌組織病理切片的觀察、相關生理生化指標及分子水平基因表達量的測定,研究了L-阿拉伯糖對糖尿病大鼠骨骼肌胰島素PI3K通路的影響以及其可能的影響機理。首先,利用飼喂高糖高脂飼料結合尾靜脈注射小劑量(30mg/(kg·bw))鏈脲佐菌素(STZ)的方法建立2型糖尿病模型,并以不同劑量(87.5mg/(kg·bw)、175mg/(kg·bw)、 525mg/(kg·bw))對糖尿病大鼠灌胃L-阿拉伯糖,對L-阿拉伯糖的降糖作用進行研究。結果顯示,L-阿拉伯糖中劑量組(175mg/(kg·bw))和高劑量組(525mg/(kg·bw))可顯著降低糖尿病大鼠的血糖值,提高糖尿病大鼠的糖耐量;L-阿拉伯糖對照組和中劑量組(175mg/(kg·bw))可分別顯著降低正常和糖尿病大鼠糖化血清蛋白的含量;L-阿拉伯糖各劑量組可顯著降低糖尿病大鼠血清中胰島素的水平,改善胰島素抵抗,且各組之間呈現(xiàn)一定的量效關系;L-阿拉伯糖中劑量組(175mg/(kg·bw))和高劑量組(525mg/(kg·bw))可顯著降低糖尿病大鼠血清中C肽的水平,提高胰島素的生物效應。其次,通過對實驗大鼠股四頭肌冷凍切片的制備、骨骼肌中的總超氧化物歧化酶(T-SOD)活力和丙二醛(MDA)含量及胰島素PI3K通路信號轉導相關蛋白水平的測定,對L-阿拉伯糖改善糖尿病大鼠骨骼肌的作用進行研究。結果顯示,L-阿拉伯糖可明顯提高股四頭肌中氧化型肌纖維的比例,從而提高骨骼肌對葡萄糖的攝取和利用;結合對實驗大鼠血清、骨骼肌中T-SOD活力和MDA含量的測定可知,在本實驗的劑量范圍內,L-阿拉伯糖對糖尿病的氧化應激無顯著性影響;L-阿拉伯糖各劑量組可提高蛋白激酶B(PKB)和葡萄糖轉運蛋白4(GLUT4)的水平且各組之間具有一定的量效關系,但只有高劑量組(525mg/(kg·bw))有顯著性差異。最后,通過對實驗大鼠骨骼肌中磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(PKB,也稱Akt)、葡萄糖轉運蛋白4(GLUT4) mRNA的熒光實時定量PCR實驗,對可能的相關機理進行探究。結果顯示,與模型對照組比較,L-阿拉伯糖高劑量組(525mg/(kg·bw))能顯著提高糖尿病大鼠骨骼肌中胰島素PI3K通路主要信號轉導蛋白基因mRNA的表達量,增強胰島素PI3K通路的信號傳遞,進而提高骨骼肌對胰島素的敏感性。
[Abstract]:L-arabinose (L-arabinose) is a kind of five-carbon aldehydes. It has been widely used in many fields such as food, medicine, chemical industry and so on because it has many biological activities, such as lowering blood sugar, blood lipid, blood pressure, reducing accumulation of fat in internal organs, slowing down weight gain and so on. In this paper, diabetic rats were used as experimental model. By observing the state and pathological sections of quadriceps femoris muscle, the relative physiological and biochemical indexes and the expression of genes at molecular level were determined. The effects of L-arabinose on insulin PI3K pathway in skeletal muscle of diabetic rats and its possible mechanism were studied. 30mg/ (kg 路bw) streptozotocin (STZ) was used to establish the model of type 2 diabetes mellitus. Different doses (87.5mg/ (kg 路bw),) were used to establish the model of type 2 diabetes mellitus (T2DM) by feeding high glucose and high fat diet combined with low dose (kg 路bw),). 175mg/ (kg 路bw), 525mg/ (kg 路bw) was used to study the hypoglycemic effect of L-arabinose (L-arabinose) on diabetic rats. The results showed that L-arabinose medium dose group (175mg/ (kg 路bw) and high dose group (525mg/) (kg 路bw) could significantly reduce the blood glucose value of diabetic rats and increase the glucose tolerance of diabetic rats; The content of glycosylated serum protein in normal and diabetic rats was significantly decreased by 175mg/ (kg 路bw) in L-arabinose control group and middle dose group (L-arabinose). Each dose of L-arabinose could significantly reduce the level of insulin in the serum of diabetic rats and improve the insulin resistance, and there was a dose-effect relationship among the groups. L-arabinose medium dose group (175mg/ (kg 路bw) and high dose group (525mg/) (kg 路bw) could significantly reduce the level of serum C-peptide and increase the biological effect of insulin in diabetic rats. Secondly, through the preparation of frozen sections of quadriceps femoris muscle, the activity of total superoxide dismutase (T-SOD) and the content of malondialdehyde (MDA) in skeletal muscle and the level of signal transduction related protein of insulin PI3K pathway in skeletal muscle were measured. The effect of L-arabinose on improving skeletal muscle of diabetic rats was studied. The results showed that L-arabinose could significantly increase the proportion of oxidized muscle fibers in quadriceps femoris and thus increase the uptake and utilization of glucose in skeletal muscles. Combined with the determination of T-SOD activity and MDA content in serum and skeletal muscle of experimental rats, it was found that there was no significant effect of L-arabinose on oxidative stress of diabetes mellitus in the dose range of this experiment. The levels of protein kinase B (PKB) and glucose transporter protein 4 (GLUT4) were increased in each dose group of L-arabinose, and there was a dose-effect relationship among the groups, but only the high dose group (525mg/ (kg 路bw) had significant difference. Finally, the mechanism of phosphatidylinositol-3-kinase (PI3K), protein kinase B (PKB, also known as Akt), glucose transporter 4 (GLUT4) mRNA, was studied by real-time fluorescence quantitative PCR. The results showed that compared with the model control group, 525mg/ (kg 路bw) could significantly increase the expression of the main signal transduction protein gene mRNA of insulin PI3K pathway in skeletal muscle of diabetic rats. Enhance the signal transduction of insulin PI3K pathway, and then improve the sensitivity of skeletal muscle to insulin.
【學位授予單位】:天津科技大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2013
【分類號】:R151

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本文編號:2448558

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