【摘要】：目的:通過建立二甲肼(DMH)誘導(dǎo)的結(jié)直腸癌大鼠模型,研究不同濃度的肌醇六磷酸(Inositol hexaphosphate,IP6)對結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展及其轉(zhuǎn)移的抑制作用。探討IP6對結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移過程中的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)以及基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)的作用機(jī)制。方法:將60只雄性Wistar大鼠按體重隨機(jī)分為五組,每組12只,分別為:對照組(CG)、模型組(DG)、IP6低劑量組(LG)、IP6中劑量組(MG)、IP6高劑量組(HG)。每日以0.25g/kg、0.5g/kg、1.0 g/kg不同劑量的植酸鈉對IP6低、中、高劑量組大鼠進(jìn)行灌胃,對照組和模型組以同體積的生理鹽水灌胃。喂養(yǎng)一個月后,模型組及IP6低、中、高劑量組大鼠,每周一次頸背部皮下注射30mg/kg DMH,對照組注射生理鹽水,一共注射18周。后繼續(xù)喂養(yǎng)16周直到實(shí)驗(yàn)結(jié)束。HE染色方法觀察組織病理學(xué)形態(tài)。實(shí)時定量PCR方法檢測E-鈣黏蛋白(E-cadherin)、轉(zhuǎn)化生長因子β(TGF-β)、血管生成因子(VEGF)、基質(zhì)金屬蛋白酶及其抑制因子(MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2)m RNA的表達(dá)。Western-blot方法檢測E-cadherin、TGF-β、VEGF、MMP-9的蛋白水平表達(dá)。結(jié)果:對照組、模型組及IP6低、中、高劑量組腫瘤發(fā)生率為:0%、100%、100%、88.9%、66.7%,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率為:0%、62.5%、40%、25%、16.67%。共發(fā)現(xiàn)肝轉(zhuǎn)移3例:模型組2例,IP6低劑量1例;隨IP6劑量的增高E-cadherinm RNA與蛋白的表達(dá)量升高,與其他組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);隨IP6劑量的增高TGF-β、VEGF m RNA表達(dá)下降(P0.05),與模型組相比,IP6低中高各組TGF-β表達(dá)下降(P0.05),中高劑量組VEGF表達(dá)降低(P0.05),TGF-β、VEGF蛋白結(jié)果與m RNA結(jié)果相似,IP6低中高各組VEGF的表達(dá)量與模型組相比下降均有差異(P0.05);隨IP6劑量的增高M(jìn)MP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的m RNA表達(dá)下降(P0.05),與模型組相比,IP6低中高各組TIMP-1表達(dá)下降(P0.05),IP6中高劑量組MMP-2、MMP-9與TIMP-2表達(dá)相繼下降(P0.05);MMP-9蛋白結(jié)果與mRNA結(jié)果相似,IP6低中高各組MMP-9的表達(dá)量與模型組相比下降均有差異(P0.05)。結(jié)論:IP6對DMH誘導(dǎo)的結(jié)直腸癌發(fā)生有抑制作用,能夠顯著減少淋巴結(jié)及遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移。IP6可能通過調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化作用,增加腫瘤細(xì)胞與細(xì)胞間的粘附作用,減少基質(zhì)金屬蛋白酶對細(xì)胞外基質(zhì)的降解,以及抑制血管淋巴管的生成從而達(dá)到抑制轉(zhuǎn)移的目的。
[Abstract]:Aim: to study the inhibitory effect of different concentrations of inositol hexaphosphate (Inositol hexaphosphate,IP6) on the development and metastasis of colorectal cancer by establishing a rat model of colorectal cancer induced by dimethylhydrazine (DMH). To investigate the mechanism of IP6 on epithelial mesenchymal transformation (EMT) and matrix metalloproteinase (MMP) (MMPs) in colorectal cancer metastasis. Methods: 60 male Wistar rats were randomly divided into five groups (12 rats in each group) according to body weight: control group (CG), model group (DG), IP6 low dose group (LG), IP6 medium dose group (LG), IP6 high dose group (MG), IP6 high dose group (HG). Different doses of sodium phytate (0.25 g / kg, 0.5 g / kg, 1.0 g/kg / d) were given to rats with low, middle and high dose of IP6. The rats in control group and model group were given the same volume of saline. One month after feeding, the rats in the model group and the low, middle and high dose groups of IP6 were injected with normal saline once a week by subcutaneous injection of 30mg/kg DMH, into the neck and back of the control group for a total of 18 weeks. The rats were fed for 16 weeks until the end of the experiment. The histopathological morphology was observed by HE staining. Detection of E-cadherin (E-cadherin), transforming growth factor 尾 (TGF- 尾), angiogenic factor (VEGF), and its inhibitor of matrix metalloproteinases (MMP-2,MMP-9,TIMP-1,) by real-time quantitative PCR Western-blot method was used to detect the expression of E-cadherin, TGF-尾 and VEGF,MMP-9. The expression of TIMP-2) m RNA was detected by Western-blot. Results: the incidence of tumor in control group, model group and IP6 group was 0%, 100%, 100%, 88.9%, 66.7%, and the lymph node metastasis rate was 0%, 62.5%, 40%, 25%, 16.67%, respectively. Liver metastasis was found in 3 cases: model group (2 cases) and low dose of IP6 (1 case), the expression of E-cadherinm RNA and protein increased with the increase of the dose of IP6, the difference was statistically significant compared with other groups (P0.05). The expression of TGF- 尾, VEGF m RNA decreased with the increase of the dose of IP6 (P0.05). Compared with the model group, the expression of TGF- 尾 in the low, middle and high IP6 groups decreased (P0.05), the expression of VEGF in the middle and high dose groups decreased (P0.05), and the expression of TGF- 尾 decreased. The results of VEGF protein were similar to those of m-RNA. The expression of VEGF in low, middle and high IP6 groups was significantly lower than that in model group (P0.05). The m RNA expression of MMP-2,MMP-9,TIMP-1,TIMP-2 decreased with the increase of the dose of IP6 (P0.05). Compared with the model group, the expression of TIMP-1 in the low, middle and high IP6 groups decreased (P0.05). MMP-2, in the middle and high dose groups of IP6 was decreased (P0.05). The expression of MMP-9 and TIMP-2 decreased successively (P0.05). The results of MMP-9 protein were similar to those of mRNA. The expression of MMP-9 in low, middle and high IP6 groups was significantly lower than that in model group (P0.05). Conclusion: IP6 can inhibit the development of colorectal cancer induced by DMH and significantly reduce lymph node metastasis and distal metastasis. IP6 may increase the adhesion between tumor cells and tumor cells by regulating the epithelial interstitial transformation of tumor cells. The purpose of inhibiting metastasis was to reduce the degradation of extracellular matrix by matrix metalloproteinases (MMP) and to inhibit the formation of vascular lymphatic vessels.
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R151

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 陸漢明,邵正才;青年人結(jié)直腸癌83例臨床分析[J];中國胃腸外科雜志;2000年04期

2 王漢濤 ,Kraemer M.;隨訪危險因素分析:復(fù)發(fā)和非復(fù)發(fā)結(jié)直腸癌的比較[J];中國實(shí)用外科雜志;2001年12期

3 蘇森;患結(jié)直腸癌婦女后代癌癥的危險性增加[J];中國腫瘤;2001年06期

4 汪一虹;在確定的法國人群中年齡<45歲結(jié)直腸癌病人與≥45歲結(jié)直腸癌病人的比較[J];國外醫(yī)學(xué)(消化系疾病分冊);2002年01期

5 李會晨;結(jié)直腸癌解剖位置的連續(xù)性右向遷移[J];國外醫(yī)學(xué).外科學(xué)分冊;2003年03期

6 李志霞;結(jié)直腸癌復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移的綜合治療[J];中華胃腸外科雜志;2003年06期

7 何建苗,蒲永東,曹志宇,劉衛(wèi)平;老年人結(jié)直腸癌186例的外科治療[J];中華胃腸外科雜志;2003年05期

8 保紅平,方登華,高瑞崗,李奎,張雪松,劉天錫;青年人結(jié)直腸癌臨床病理分析[J];中國普外基礎(chǔ)與臨床雜志;2004年01期

9 章江;;監(jiān)測結(jié)直腸癌非常必要[J];國外醫(yī)學(xué)情報;2004年04期

10 郜文秀,楊艷芳,梁小波,李耀平,李佩珍;細(xì)胞粘附分子變異體在結(jié)直腸癌中的表達(dá)及預(yù)后[J];中國公共衛(wèi)生;2005年07期

相關(guān)會議論文 前10條

1 鄭樹;;結(jié)直腸癌預(yù)后與轉(zhuǎn)移相關(guān)因素分析[A];2005年浙江省腫瘤學(xué)術(shù)會議全國大腸癌轉(zhuǎn)移與復(fù)發(fā)的診治研討會學(xué)術(shù)論文集[C];2005年

2 鄒一峰;吳小劍;蘭平;;結(jié)直腸癌免疫治療新進(jìn)展[A];第十一次全國中西醫(yī)結(jié)合大腸肛門病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2006年

3 郁寶銘;;結(jié)直腸癌治療的進(jìn)展及其新理念[A];2006年浙江省肛腸外科學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2006年

4 王錫山;;結(jié)直腸癌治療的困惑之我見[A];第九屆全國腫瘤轉(zhuǎn)移學(xué)術(shù)大會暨2011年黑龍江省醫(yī)學(xué)會腫瘤學(xué)年會報告集[C];2011年

5 秦建平;;未病思想中的結(jié)直腸癌預(yù)防[A];貴州省中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會肛腸學(xué)會第五屆學(xué)術(shù)交流會暨新技術(shù)新進(jìn)展學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2012年

6 高文慶;陳會林;童蕾;陸松春;;老年梗阻性結(jié)直腸癌診療體會(附42例報告)[A];首屆“之江中醫(yī)藥論壇”暨浙江省中醫(yī)藥學(xué)會2011年學(xué)術(shù)年會論文集[C];2011年

7 王啟遠(yuǎn);周長江;高云飛;徐巖;李坤;;血管內(nèi)皮生長因子與結(jié)直腸癌[A];《中華急診醫(yī)學(xué)雜志》第八屆組稿會暨急診醫(yī)學(xué)首屆青年論壇論文匯編[C];2009年

8 巴一;;結(jié)直腸癌靶向治療進(jìn)展[A];第三屆中國腫瘤內(nèi)科大會教育集暨論文集[C];2009年

9 何超;朱洪波;;結(jié)直腸癌的生物治療[A];2009年浙江省腫瘤外科學(xué)術(shù)年會暨腫瘤外科規(guī)范化診治學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2009年

10 萬德森;;進(jìn)一步提高結(jié)直腸癌療效的思考[A];2009年浙江省腫瘤學(xué)術(shù)年會暨腫瘤診治新進(jìn)展學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2009年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 中華醫(yī)學(xué)會腫瘤學(xué)分會主任委員 顧晉;分期不精確 致結(jié)直腸癌過度治療[N];健康報;2012年

2 本報記者 賈巖;跨線治療成結(jié)直腸癌最后防線[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報;2012年

3 本報記者 賈巖;跨線治療構(gòu)筑結(jié)直腸癌最后防線[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報;2012年

4 本報記者 林琳;結(jié)直腸癌：可以治愈的癌癥[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報;2013年

5 記者 張妍　通訊員 熊靜帆 朱品磊;深圳結(jié)直腸癌發(fā)病高于全國[N];深圳商報;2013年

6 本報記者 孫剛;預(yù)防結(jié)直腸癌：請管住嘴[N];解放日報;2013年

7 上海市中醫(yī)醫(yī)院腫瘤科 侯鳳剛 副主任醫(yī)師;中醫(yī)藥在結(jié)直腸癌治療中的作用和特色[N];上海中醫(yī)藥報;2014年

8 李華虹 孫瑜淼 記者 李麗云 實(shí)習(xí)生 陰浩;專家呼吁：結(jié)直腸癌應(yīng)多學(xué)科規(guī)范化診療[N];科技日報;2014年

9 ;降低結(jié)直腸癌復(fù)發(fā)有新療法[N];人民日報;2003年

10 韓自力;新化療方案可高效治療結(jié)直腸癌[N];健康報;2007年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 王曉燕;腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞誘導(dǎo)結(jié)直腸癌EMT的作用機(jī)制[D];南方醫(yī)科大學(xué);2014年

2 陳濤;MicroRNA-31/FIH-1調(diào)控關(guān)系在結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展中的作用及其機(jī)制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

3 任翡;MYBL2基因在結(jié)直腸癌的表達(dá)及機(jī)制的初步探討[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

4 吳朋;結(jié)直腸癌中microRNA-615基因甲基化及其生物學(xué)特性探究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

5 李澤武;MicroRNA-203靶向ZNF217基因調(diào)控結(jié)直腸癌生物學(xué)行為的研究[D];山東大學(xué);2015年

6 徐興遠(yuǎn);低分子肝素對結(jié)直腸癌患者預(yù)后的影響及相關(guān)機(jī)制的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

7 梁洪亮;miR-454在結(jié)直腸癌中的功能及其作用機(jī)制[D];山東大學(xué);2015年

8 金鵬;MMR蛋白在雌激素致結(jié)腸癌細(xì)胞凋亡中的作用及SEPT9檢測結(jié)直腸癌的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

9 珠珠;云南省Lynch綜合征候選基因標(biāo)志物研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2014年

10 周智航;SEMA3F通過下調(diào)ASCL2-CXCR4軸而抑制結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 劉暢;肌醇六磷酸對結(jié)直腸癌大鼠腫瘤轉(zhuǎn)移過程中EMT和MMPs的影響[D];青島大學(xué);2017年

2 顏斐斐;術(shù)后結(jié)直腸癌患者癌因性疲乏與影響因素的研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2009年

3 李斌;結(jié)直腸癌患者就診延遲分析[D];中南大學(xué);2009年

4 葉建杰;慈溪市結(jié)直腸癌危險因素病例對照研究[D];浙江大學(xué);2008年

5 趙波;結(jié)直腸癌危險因素及臨床流行病學(xué)特征的調(diào)查與分析[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2013年

6 宋艷敏;PAQR3基因甲基化水平與結(jié)直腸癌關(guān)系的研究[D];河北大學(xué);2015年

7 黎江;Oct4B1在結(jié)直腸癌干細(xì)胞中的表達(dá)及其與Twist的相關(guān)性研究[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2015年

8 楊文婷;PD-L1、SIRT1在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)及意義[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

9 羅佳;二代測序分析散發(fā)性結(jié)直腸癌和息肉的基因突變[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

10 崔慧鵬;精氨酸琥珀酸合成酶（ASS1）高表達(dá)與結(jié)直腸癌惡性進(jìn)展的相關(guān)性研究[D];中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2015年

，

本文編號：2446264