【摘要】：采用實時熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)分析不同劑量酪蛋白糖巨肽(casein glycomacropeptide,CGMP)對小鼠腸道雙歧桿菌增殖水平的影響,揭示乳源CGMP是否有增殖腸道關(guān)鍵益生菌的功能。選用50只健康BALB/c小鼠,隨機分為對照組,安慰組(灌胃生理鹽水0.2 m L),乳源CGMP低、中、高劑量組(灌胃等體積不同質(zhì)量濃度的乳源CGMP),灌胃周期為2周。于灌胃后第0、3、5、7、9、11、15天及停止灌胃后1周(第21天)采集的小鼠新鮮糞便,并進(jìn)行糞便菌體基因組DNA抽提。依據(jù)雙歧桿菌的16S rRNA基因序列設(shè)計5對種屬特異性引物,以兩歧雙歧桿菌(Bifidobacterium bifidum)CICC6071的基因組DNA作為標(biāo)準(zhǔn)品,進(jìn)行梯度稀釋制作標(biāo)準(zhǔn)曲線;分析樣品PCR擴增產(chǎn)物的熔解曲線,評價反應(yīng)的特異性。結(jié)果表明:Real-time PCR可準(zhǔn)確定量小鼠腸道內(nèi)雙歧桿菌數(shù)量;且灌胃中劑量乳源CGMP可以促進(jìn)小鼠腸道內(nèi)雙歧桿菌的增殖,在灌胃第11天時小鼠腸道內(nèi)雙歧桿菌數(shù)量達(dá)到最高值,即乳源CGMP對小鼠腸道雙歧桿菌的增殖作用存在劑量選擇性。
[Abstract]:Real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction (real-time polymerase chain reaction,real-time PCR) was used to analyze the effects of different doses of casein glycosaminopeptide (casein glycomacropeptide,CGMP) on the proliferation of bifidobacterium in mice. To reveal whether milk source CGMP has the function of proliferating key probiotics in intestinal tract. Fifty healthy BALB/c mice were randomly divided into two groups: the placebo group (0.2 m L), by gastric administration of normal saline) had low milk-source CGMP, and the high dose group (intragastric instillation of milk source CGMP), of equal volume and different concentration) had a period of 2 weeks. Fresh feces were collected from mice on the 15th day after oral administration and 1 week (21 days) after gastric administration, and genomic DNA was extracted from the feces. According to the 16s rRNA gene sequence of Bifidobacterium, 5 pairs of species-specific primers were designed. The genomic DNA of Bifidobacterium bifidobacterium (Bifidobacterium bifidum) CICC6071 was used as standard material, and the standard curve was made by gradient dilution. The melting curve of PCR amplification products was analyzed and the specificity of the reaction was evaluated. The results showed that Real-time PCR could accurately quantify the number of bifidobacterium in the intestinal tract of mice. The medium dose CGMP could promote the proliferation of bifidobacterium in the intestinal tract of mice, and the number of bifidobacterium in the intestine of mice reached the highest value on the 11th day of gastric administration, that is, the dose selective effect of milk source CGMP on the proliferation of bifidobacterium in the intestinal tract of mice.
【作者單位】： 天津市食品生物技術(shù)重點實驗室天津商業(yè)大學(xué)生物技術(shù)與食品科學(xué)學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金面上項目(31071522)
【分類號】：R151

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 張力文;王宗潤;吳秀麗;房明麗;張云峰;;實時熒光定量PCR法檢測人糞便中雙歧桿菌方法的建立及評價[J];吉林大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2014年03期

2 姜艷;婁俊麗;劉華;李琪;劉梅;黃永坤;;過敏性紫癜伴幽門螺桿菌感染患兒腸道菌群變化的研究[J];臨床兒科雜志;2009年10期

3 曹晉宜;陳慶森;梁晨曦;閻亞麗;;酪蛋白糖巨肽(CGMP)對小鼠盲腸中微生物區(qū)系的影響[J];食品科學(xué);2008年10期

4 李俊潔;陳慶森;;雙歧桿菌調(diào)理和改善腸道相關(guān)疾病作用的研究進(jìn)展[J];食品科學(xué);2011年23期

5 任效東;陳慶森;李俊潔;周麗麗;閻亞麗;;酪蛋白糖巨肽和乳鐵蛋白灌胃對小鼠腸道微生物定殖抗力的影響[J];食品科學(xué);2013年09期

6 李楠;劉慧敏;田茜;毛學(xué)英;;酪蛋白糖巨肽酶解產(chǎn)物對雙歧桿菌的促生長效果[J];食品科技;2013年09期

7 陳慶森;王金鳳;閻亞麗;龐廣昌;;酪蛋白糖巨肽對二甲肼干預(yù)的大鼠細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)變化的研究[J];食品科學(xué);2014年13期

8 趙潔;馬晨;席曉敏;張和平;;實時熒光定量PCR技術(shù)在腸道微生物領(lǐng)域中的研究進(jìn)展[J];生物技術(shù)通報;2014年12期

9 陳津津;蔡威;;應(yīng)用real-time PCR測定幼兔腸道內(nèi)雙歧桿菌和乳桿菌的變化[J];世界華人消化雜志;2007年31期

10 張小賢;錢香;樓正青;陳瑩瑩;沈岳良;;16SrRNA實時熒光定量PCR檢測腸道菌群的研究[J];中國高等醫(yī)學(xué)教育;2010年06期

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 葉萍;賀銳;;不同月齡輪狀病毒性腹瀉患兒腸道菌群變化的研究[J];國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志;2014年01期

2 張力文;王宗潤;吳秀麗;房明麗;張云峰;;實時熒光定量PCR法檢測人糞便中雙歧桿菌方法的建立及評價[J];吉林大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2014年03期

3 賀銳;張，

本文編號：2362621