【摘要】：目的探討乙醇對胎鼠神經(jīng)干細(xì)胞凋亡的影響。方法將妊娠14 d胎鼠腦新皮質(zhì)來源的神經(jīng)干細(xì)胞暴露于終濃度分別為0(對照)、25、50、100 mmol/L的乙醇培養(yǎng)基溶液3 d。采用Annexin V/PI法檢測細(xì)胞早期和晚期凋亡情況,采用JC-1探針法檢測線粒體膜電位的改變,并檢測凋亡相關(guān)基因Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA和蛋白的表達(dá)。結(jié)果與對照組比較,50、100 mmol/L乙醇染毒組神經(jīng)干細(xì)胞的早期凋亡細(xì)胞率明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);而各濃度乙醇染毒組神經(jīng)干細(xì)胞的晚期凋亡率無明顯改變。且隨著乙醇染毒濃度的升高,神經(jīng)干細(xì)胞的早期凋亡細(xì)胞率呈上升趨勢。僅100 mmol/L乙醇染毒組神經(jīng)干細(xì)胞線粒體膜電位低于對照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。與對照組比較,各濃度乙醇染毒組神經(jīng)干細(xì)胞Bax mRNA的表達(dá)水平均上升,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);而Bcl-2和Caspase-3 mRNA的表達(dá)水平均無明顯改變。且隨著乙醇染毒濃度的升高,Bax mRNA表達(dá)量呈上升趨勢。與對照組比較,50、100 mmol/L乙醇染毒組神經(jīng)干細(xì)胞Bax蛋白的表達(dá)水平均升高,而Bcl-2/Bax蛋白的比值均降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);各濃度乙醇染毒組神經(jīng)干細(xì)胞Bcl-2、Caspase-3蛋白的表達(dá)水平均無明顯改變。結(jié)論乙醇可引起神經(jīng)干細(xì)胞早期凋亡,其機(jī)制可能與線粒體損傷和Bax表達(dá)上調(diào)有關(guān)。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of ethanol on apoptosis of neural stem cells in fetal rats. Methods the neural stem cells derived from the neocortex of the fetal brain on the 14th day of gestation were exposed to ethanol medium with final concentration of 0 (control) and 250 mmol/L for 3 days. The changes of mitochondrial membrane potential and the expression of apoptosis-related gene Bcl-2,Bax,Caspase-3 mRNA and protein were detected by Annexin V/PI assay and JC-1 probe method. Results compared with the control group, the early apoptotic rate of neural stem cells in the 50100 mmol/L ethanol group was significantly higher than that in the control group (P0.05), but the late apoptotic rate of the neural stem cells in different concentration ethanol groups had no significant change. With the increase of ethanol concentration, the early apoptotic cell rate of neural stem cells increased. The mitochondrial membrane potential of neural stem cells in the 100 mmol/L ethanol group was significantly lower than that in the control group (P0.05). Compared with the control group, the Bax mRNA expression level of neural stem cells increased in all concentration ethanol groups, the difference was statistically significant (P0.05), while the expression level of Bcl-2 and Caspase-3 mRNA did not change significantly. The expression of, Bax mRNA increased with the increase of ethanol concentration. Compared with the control group, the expression of Bax protein in neural stem cells was increased and the ratio of Bcl-2/Bax protein was decreased in 50100 mmol/L ethanol group. The difference was statistically significant (P0.05); the expression level of Bcl-2,Caspase-3 protein of neural stem cells in all concentration ethanol groups were not significantly changed. Conclusion ethanol can induce early apoptosis of neural stem cells, which may be related to mitochondrial damage and up-regulation of Bax expression.
【作者單位】： 復(fù)旦大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院環(huán)境衛(wèi)生學(xué)教研室公共衛(wèi)生安全教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室健康風(fēng)險預(yù)警治理協(xié)同創(chuàng)新中心;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(30800893) 高等學(xué)校博士學(xué)科點(diǎn)基金(200802461122)
【分類號】：R114

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本文編號：2289487