發(fā)布時間：2018-05-13 19:15

  本文選題：多環(huán)芳烴 + 宮內(nèi)暴露��； 參考：《中國疾病預(yù)防控制中心》2014年博士論文

【摘要】：目的： 研究北方某市母嬰多環(huán)芳烴(PAHs)負荷水平及其影響因素以及宮內(nèi)多環(huán)芳烴暴露與臍帶血生成BPDE-DNA加合物關(guān)系的研究；探討宮內(nèi)暴露PAHs對胎兒基因組甲基化的影響；研究宮內(nèi)PAHs暴露水平對胎兒特異基因甲基化的影響；了解宮內(nèi)暴露對基因甲基化與生成DNA加合物的關(guān)系。 方法： 1.應(yīng)用現(xiàn)場流行病學的調(diào)查方法,對所選擇的待產(chǎn)孕婦先進行流行病學調(diào)查,并采集孕婦的外周靜脈血和新生兒臍帶血： 2.用高效液相色譜-熒光色譜法測定孕婦靜脈血和臍帶血血清AnT、FluA、Pyr、 BaA、BbF、BkF、BaP、DBahA和BghiP共9種PAHs的濃度； 3.采用毛細管電泳-激光誘導(dǎo)熒光檢測部分臍血中的BPDE-DNA加合物的濃度； 4.利用LC-MS/MS建立的全基因組甲基化水平分析方法測定相應(yīng)的臍帶血DNA基因組甲基化水平,利用單因素及多元回歸的統(tǒng)計方法分析評價宮內(nèi)暴露對胎兒全基因組甲基化水平的影響； 5.用焦磷酸測序法測定P53、P16特定基因位點甲基化,先后用單因素分析和多元逐步回歸的方法分析影響基因甲基化的主要因素； 6.分別用單因素及多元逐步回歸模型分析BPDE-DNA加合物與基因組甲基化水平及特異基因P16、P53位點甲基化的關(guān)系。 結(jié)果： 1.母、臍血清中Pyr的檢出率在9種多環(huán)芳烴中是最高,其檢出率分別是98.9%和95.2%。其余幾種PAHs的檢出率也多在60%以上,其中BaP的血清負荷水平在母、臍中分別為47.3%和49.7%,檢出濃度中位數(shù)分別為0.035(P25：0.020,P75:0.072) ng/ml和0.035(P25:0.020,P75:0.095ng/ml)平均濃度分別約為(0.053±0.044) ng/ml和(0.062±0.053) ng/ml.經(jīng)秩和配對檢驗,顯示臍帶血中AnT、Pyr、BaA、BkF、BaP和BghiP的含量均高于相應(yīng)母血,差異有統(tǒng)計學意義。 2.家庭住宅距離交通主干道比較近的孕婦血清BaP含量比較高(P0.05)。 3.胎兒臍帶血中的BPDE-DNA加合物的檢出率是86.1%,但臍帶血中的BPDE-DNA加合物與孕婦、臍帶血血清BaP水平無明顯相關(guān)。 4.單因素分析結(jié)果顯示,不同PAHs的種類及不同負荷水平對基因組甲基化的影響各不相同。對于血清BaP和BaA來說,隨著血清負荷水平增加,結(jié)果表明相應(yīng)的全基因組甲基化水平受到了影響,呈現(xiàn)減低趨勢。對于血清BkF和血清FluA,結(jié)果顯示其負荷水平與相應(yīng)的全基因組甲基化呈正相關(guān)。另外其他三種PAHs沒有發(fā)現(xiàn)其負荷水平對甲基化有明顯的影響。在排除了其他干擾后的多元回歸分析表明,血清BaP和血清BkF仍然能進入回歸模型,說明PAHs暴露是基因組甲基化水平發(fā)生改變的主要影響因素。 5.單因素分析,發(fā)現(xiàn)新生兒的性別和母親孕期服用葉酸可能會對兩種基因的甲基化水平有影響。經(jīng)對臍帶血清AnT、FluA、Pyr、BaA、BbF、BkF、BaP、DBahA和BghiP對基因甲基化水平影響的單因素分析,發(fā)現(xiàn)血清BaP水平可能影響P53和P16基因的甲基化水平,負荷組顯示的甲基化水平比低負荷組要低,差別有統(tǒng)計學意義。血清BbF和BkF的水平則正好相反,結(jié)果顯示有增加基因甲基化水平的可能。而血清BghiP、BaA、FluA則在不同的基因、相同基因的不同位點都影響不同。通過多元回歸模型的分析,在排除了其他干擾因素后,仍有不同種類的PAHs進入模型。說明PAHs的暴露是影響P53和P16基因甲基化水平改變的主要影響因素。 6.經(jīng)單因素分析可知,BPDE-DNA加合物與基因組甲基化及P53、P16的位點甲基化水平均有關(guān)系。多元逐步回歸分析結(jié)果顯示,基因組甲基化水平與可檢測到的BPDE-DNA加合物呈正相關(guān),而P16的位點基因甲基化水平與BPDE-DNA加合物水平呈負相關(guān)關(guān)系。 7.結(jié)果顯示,PAHs暴露后,DNA甲基化水平比BPDE-DNA加合物更容易檢測的到。 結(jié)論： 1.本研究中的孕期婦女體內(nèi)有一定的PAHs負荷水平,家庭離交通主干道的距離是體內(nèi)PAHs負荷水平的主要影響因素。室外空氣污染可能在PAHs的暴露中起主要作用。 2.母嬰體內(nèi)PAHs負荷存在著相關(guān)性,血清BaP可以作為評價PAHs暴露水平的代表物質(zhì)。 3.證實了PAHs的跨胎盤暴露已造成發(fā)育中的胎兒DNA的早期損傷。 4.宮內(nèi)PAHs的暴露影響了胎兒基因組甲基化狀態(tài)的改變,不同PAHs對胎兒基因組甲基化狀態(tài)的影響方式不同。 5.環(huán)境低水平的的宮內(nèi)多環(huán)芳烴暴露也會對影響到胎兒P53、P16抑癌基因的甲基化。這種改變有可能會促進基因的其他損傷行為發(fā)生而增加胎兒出生以后的患病風險。 6.基因組甲基化與特異位點的甲基化水平均與可檢測到的加合物有關(guān)。DNA的甲基化與BPDE-DNA加合物的形成之間存在相互促進或抑制作用的可能。
[Abstract]:Objective:
To study the relationship between maternal and infant polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) load levels and the relationship between intrauterine polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) exposure and umbilical cord blood BPDE-DNA adducts, the influence of intrauterine exposure to PAHs on fetal genome methylation, and the influence of intrauterine PAHs exposure on fetal specific gene methylation; and understanding of intrauterine intrauterine methylation The relationship between gene methylation and DNA adducts was revealed.
Method錛，

本文編號：1884451