發(fā)布時間：2018-05-09 09:45

  本文選題：雙酚A + 支持細胞��； 參考：《中華男科學雜志》2015年02期

【摘要】：目的:觀察不同濃度雙酚A(BPA)對原代培養(yǎng)大鼠睪丸支持細胞(SC)糖代謝及乳酸脫氫酶(LDH)表達的影響,探討B(tài)PA致男性不育的機制。方法:采用兩步酶消化法分離雄性Wistar大鼠睪丸SC,建立SC原代培養(yǎng)模型,免疫組化鑒定Fas L。傳代后SC隨機分為對照組和實驗組(100 nmol/L、10μmol/L和1 mmol/L BPA)。培養(yǎng)48 h后,CCK-8法測定細胞增殖活性,核磁共振波譜法測定細胞內代謝物濃度,RT-PCR及Western印跡檢測LDH的表達。結果:體外分離培養(yǎng)SC的純度為(96.05±1.28)%(n=10),CCK-8實驗結果顯示:與對照組相比,暴露于100 nmol/L BPA組[(98±8)%]、10μmol/L BPA組[(96±3)%]和1 mmol/L BPA組[(95±3)%]的細胞增殖率無明顯變化(P0.05);核磁共振波譜顯示:與對照組相比,10μmol/L和1 mmol/L BPA作用下SC內葡萄糖及乳酸濃度明顯降低(P0.05);RT-PCR及Western印跡結果顯示:LDH mRNA的表達隨BPA濃度升高呈現(xiàn)降低趨勢(100 nmol/L、10μmol/L及1 mmol/L組P均0.05),而LDH蛋白的表達只在1 mmol/L組明顯降低(P0.05)。結論:較高濃度BPA降低LDH,影響SC糖代謝過程。推測BPA通過影響SC糖代謝,減少向生殖細胞乳酸的供給,影響精子發(fā)生過程。
[Abstract]:Aim: to investigate the effects of different concentrations of bisphenol A (BPA) on glucose metabolism and lactate dehydrogenase (LDH) expression in primary cultured rat testicular Sertoli cells (Sertoli cells) and to explore the mechanism of male infertility induced by BPA. Methods: two step enzyme digestion method was used to isolate male Wistar rat testicular SCS. The primary culture model of SC was established, and Fas L was identified by immunohistochemistry. After passage, SC were randomly divided into two groups: control group and experimental group (10 渭 mol/L and 1 mmol/L BPA). After 48 h culture, the cell proliferation activity was determined by CCK-8 method, the intracellular metabolite concentration was detected by nuclear magnetic resonance spectroscopy (NMR), and the expression of LDH was detected by Western blotting and RT-PCR. Results: the purity of SC isolated and cultured in vitro was 96.05 鹵1.28%. The proliferation rate of cells exposed to 10 渭 mol/L BPA group [98 鹵8 渭%] 10 渭 mol/L BPA group and 1 mmol/L BPA group [95 鹵3 渭%] had no significant change (P 0.05). Nuclear magnetic resonance spectroscopy showed that the concentration of glucose and lactic acid in SC decreased significantly under 10 渭 mol/L and 1 mmol/L BPA compared with the control group. The results showed that the expression of LDH mRNA decreased with the increase of BPA concentration (P < 0.05) in 10 渭 mol/L and 1 mmol/L groups, while the expression of LDH protein in 1 mmol/L group decreased significantly (P 0.05). Conclusion: high concentration of BPA can decrease the level of BPA and affect the process of SC glycometabolism. It is speculated that BPA affects spermatogenesis by affecting the glucose metabolism of SC and reducing the supply of lactic acid to germ cells.
【作者單位】： 青島大學附屬醫(yī)院泌尿外科;濟寧醫(yī)學院附屬醫(yī)院重癥醫(yī)學科;青島大學附屬醫(yī)院眼科;青島大學附屬醫(yī)院低溫醫(yī)學科;
【基金】：山東省人口和計劃生育委員會科學技術研究項目(201303)~~
【分類號】：R114

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