本文選題：雙酚A + 支持細(xì)胞　； 參考：《中華男科學(xué)雜志》2015年02期

【摘要】：目的:觀察不同濃度雙酚A(BPA)對(duì)原代培養(yǎng)大鼠睪丸支持細(xì)胞(SC)糖代謝及乳酸脫氫酶(LDH)表達(dá)的影響,探討B(tài)PA致男性不育的機(jī)制。方法:采用兩步酶消化法分離雄性Wistar大鼠睪丸SC,建立SC原代培養(yǎng)模型,免疫組化鑒定Fas L。傳代后SC隨機(jī)分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組(100 nmol/L、10μmol/L和1 mmol/L BPA)。培養(yǎng)48 h后,CCK-8法測(cè)定細(xì)胞增殖活性,核磁共振波譜法測(cè)定細(xì)胞內(nèi)代謝物濃度,RT-PCR及Western印跡檢測(cè)LDH的表達(dá)。結(jié)果:體外分離培養(yǎng)SC的純度為(96.05±1.28)%(n=10),CCK-8實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:與對(duì)照組相比,暴露于100 nmol/L BPA組[(98±8)%]、10μmol/L BPA組[(96±3)%]和1 mmol/L BPA組[(95±3)%]的細(xì)胞增殖率無(wú)明顯變化(P0.05);核磁共振波譜顯示:與對(duì)照組相比,10μmol/L和1 mmol/L BPA作用下SC內(nèi)葡萄糖及乳酸濃度明顯降低(P0.05);RT-PCR及Western印跡結(jié)果顯示:LDH mRNA的表達(dá)隨BPA濃度升高呈現(xiàn)降低趨勢(shì)(100 nmol/L、10μmol/L及1 mmol/L組P均0.05),而LDH蛋白的表達(dá)只在1 mmol/L組明顯降低(P0.05)。結(jié)論:較高濃度BPA降低LDH,影響SC糖代謝過(guò)程。推測(cè)BPA通過(guò)影響SC糖代謝,減少向生殖細(xì)胞乳酸的供給,影響精子發(fā)生過(guò)程。
[Abstract]:Aim: to investigate the effects of different concentrations of bisphenol A (BPA) on glucose metabolism and lactate dehydrogenase (LDH) expression in primary cultured rat testicular Sertoli cells (Sertoli cells) and to explore the mechanism of male infertility induced by BPA. Methods: two step enzyme digestion method was used to isolate male Wistar rat testicular SCS. The primary culture model of SC was established, and Fas L was identified by immunohistochemistry. After passage, SC were randomly divided into two groups: control group and experimental group (10 渭 mol/L and 1 mmol/L BPA). After 48 h culture, the cell proliferation activity was determined by CCK-8 method, the intracellular metabolite concentration was detected by nuclear magnetic resonance spectroscopy (NMR), and the expression of LDH was detected by Western blotting and RT-PCR. Results: the purity of SC isolated and cultured in vitro was 96.05 鹵1.28%. The proliferation rate of cells exposed to 10 渭 mol/L BPA group [98 鹵8 渭%] 10 渭 mol/L BPA group and 1 mmol/L BPA group [95 鹵3 渭%] had no significant change (P 0.05). Nuclear magnetic resonance spectroscopy showed that the concentration of glucose and lactic acid in SC decreased significantly under 10 渭 mol/L and 1 mmol/L BPA compared with the control group. The results showed that the expression of LDH mRNA decreased with the increase of BPA concentration (P < 0.05) in 10 渭 mol/L and 1 mmol/L groups, while the expression of LDH protein in 1 mmol/L group decreased significantly (P 0.05). Conclusion: high concentration of BPA can decrease the level of BPA and affect the process of SC glycometabolism. It is speculated that BPA affects spermatogenesis by affecting the glucose metabolism of SC and reducing the supply of lactic acid to germ cells.
【作者單位】： 青島大學(xué)附屬醫(yī)院泌尿外科;濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科;青島大學(xué)附屬醫(yī)院眼科;青島大學(xué)附屬醫(yī)院低溫醫(yī)學(xué)科;
【基金】：山東省人口和計(jì)劃生育委員會(huì)科學(xué)技術(shù)研究項(xiàng)目(201303)~~
【分類號(hào)】：R114

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本文編號(hào)：1865539