西蘭花多肽組分分離及對過氧化氫所致血管內(nèi)皮細胞損傷的保護作用研究
發(fā)布時間:2018-05-05 18:24
本文選題:西蘭花多肽 + 細胞凋亡。 參考:《中國藥學雜志》2017年16期
【摘要】:目的探索西蘭花多肽組分對過氧化氫(H_2O_2)所致血管內(nèi)皮細胞損傷的保護作用及其機制。方法采用醇沉,Sephadex G-25凝膠過濾層析獲得分離西蘭花多肽組分。體外培養(yǎng)人靜脈血管內(nèi)皮細胞EVC-304,經(jīng)不同濃度西蘭花多肽組分Ⅱ(1、2、4、8μg·mL~(-1))處理細胞24 h后,加入100μmol·L~(-1) H_2O_2再進行培養(yǎng)12 h。四甲基偶氮唑藍(MTT)法檢測細胞存活率,細胞分析儀檢測EVC-304細胞凋亡和線粒體膜電位的變化,試劑盒法檢測超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,Western blot法檢測細胞內(nèi)激活型Caspase-3、細胞色素C(Cyto C)、Bax和Bcl-2蛋白表達變化。結(jié)果 Sephadex G-25凝膠過濾層析共獲得4個洗脫峰,選擇西蘭花多肽組分Ⅱ用于后續(xù)實驗。實驗結(jié)果表明,同正常組相比,H_2O_2損傷組細胞存活率顯著降低(P0.01),細胞凋亡率顯著升高(P0.01),線粒體膜電位去極化細胞比例升高(P0.01),MDA含量增加,SOD活性減少,激活型Caspase-3、細胞質(zhì)中Cyto C表達水平,Bax/Bcl-2比值升高(P0.01)。與H2O2損傷組相比,2、4、8μg·mL~(-1)西蘭花多肽組分Ⅱ處理組細胞存活率明顯升高(P0.01),凋亡細胞率明顯下降(P0.01),線粒體膜電位去極化細胞比例下降(P0.01),MDA含量下降,SOD活性升高,細胞內(nèi)激活型Caspase-3,Cyto C表達,Bax/Bcl-2比值下降(P0.01)。結(jié)論西蘭花多肽組分Ⅱ?qū)_2O_2所致血管內(nèi)皮細胞凋亡具有保護作用,其機制可能與保護血管內(nèi)皮細胞受損線粒體功能相關(guān)。
[Abstract]:Objective to investigate the protective effect of broccoli polypeptide on vascular endothelial cell injury induced by H _ 2O _ 2 H _ 2O _ 2 (H _ 2O _ 2) and its mechanism. Methods the polypeptides of broccoli were separated by ethanol precipitation Sephadex G-25 gel filtration chromatography. Human vein endothelial cells (EVC-304) were cultured in vitro. The cells were treated with different concentrations of Broccoli polypeptide (鈪,
本文編號:1848801
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