丙烯酰胺神經(jīng)毒性早期效應(yīng)生物標(biāo)志物的初步研究
本文選題:丙烯酰胺 切入點:生物標(biāo)志物 出處:《山東大學(xué)》2012年碩士論文
【摘要】:丙烯酰胺(acrylamide, ACR)是一種重要的化工原料,主要用來制造有“百業(yè)助劑”之稱的聚丙烯酰胺(PAM)。PAM的需求量仍在逐年加大以致供不應(yīng)求。這就決定了市場對合成PAM的原料——ACR的巨大需求。但是ACR是國際上確認的一種神經(jīng)毒物。其產(chǎn)品主要是其水溶液,空氣濃度大大降低,使人們忽略了它的皮膚吸收性,導(dǎo)致其神經(jīng)毒性危害更具有隱蔽性。同時由于ACR中毒是法定職業(yè)病,無職業(yè)接觸生物限值,近幾十年,不斷有ACR中毒的臨床病例被報道。在此基礎(chǔ)上,本室研究發(fā)現(xiàn)ACR染毒大鼠血清中NSE含量、calpain活性和氧化抗氧化水平均出現(xiàn)明顯改變,因此為尋找合適的早期效應(yīng)生物標(biāo)志物,對ACR職業(yè)暴露人群血清NSE、calpain、GSH、GSH-Px、SOD、MDA等指標(biāo)進行測定,以期能夠在ACR作業(yè)工人中毒前發(fā)出預(yù)警,避免對工人健康造成不必要的傷害。 目的 一、探討ACR暴露對血清NSE、calpain、氧化抗氧化水平的影響。 二、尋找特異靈敏的ACR神經(jīng)毒性早期生物效應(yīng)標(biāo)志物。 三、優(yōu)化氣相色譜法測定ACR濃度的色譜條件、對硅膠采樣管個體空氣采樣和皮膚采樣進行方法學(xué)驗證。 方法 一、優(yōu)化色譜條件,并對優(yōu)化后的色譜條件及采樣工具進行方法學(xué)驗證。 二、問卷調(diào)查:對研究對象進行問卷調(diào)查。將研究對象中ACR作業(yè)工人和后勤管理人員分為ACR暴露組和對照組。 三、現(xiàn)場樣品采集與檢測: 1使用硅膠采樣管進行個體空氣采樣;使用擦拭法進行皮膚采樣;使用真空采血管進行血樣采集。 2使用氣相色譜法檢測空氣中ACR濃度和皮膚污染量;使用電化學(xué)發(fā)光法測定血清中NSE含量;使用熒光法測定calpain活性;使用生化試劑盒測定血清GSH-Px和SOD活性的活性及GSH和MDA的含量。 四、統(tǒng)計分析使用PASW Statistics18.0軟件進行統(tǒng)計分析。針對ACR暴露對研究對象血清指標(biāo)變化的影響進行單因素方差分析;將ACR外暴露量與暴露組血清各指標(biāo)分別做相關(guān)分析;將不同ACR職業(yè)相關(guān)因素、個人基本情況對暴露組血清各指標(biāo)變化的影響做單因素方差分析;對暴露組血清各指標(biāo)變化進行多因素線性回歸分析。 結(jié)果 一、氣相色譜法色譜條件優(yōu)化及方法學(xué)驗證:汽化室240℃、柱溫220℃、檢測器250℃、分流比1:20、柱流量3.0ml/min、進樣量2.0μ1。 方法學(xué)驗證:線性范圍為0-2.0μg/ml,檢出限為1.4×10-5μg/ml,保留時間1.633min;加標(biāo)回收率、精密度、棉球平均洗脫率、硅膠采樣管的解吸效率以及平均采樣效率均符合國標(biāo)要求。 二、ACR暴露對研究對象血清NSE含量、calpain活性及氧化抗氧化變化的影響暴露組中NSE含量、GSH-Px活性、SOD活性、MDA含量均高于對照組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);暴露組中calpain活性、GSH含量均低于對照組,前者差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),后者差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 三、暴露組血清NSE含量、calpain活性變化影響因素 1.ACR外暴露劑量與NSE含量、calpain活性相關(guān)性:空氣ACR濃度與NSE含量成正相關(guān)(r=0.635,P0.05);與calpain活性成負相關(guān)(r=-0.214,P0.05);皮膚ACR污染量與NSE含量成正相關(guān)(r=0.669,P0.05);與calpain成負相關(guān)(r=-0.231,P0.05)。 2.不同ACR職業(yè)相關(guān)因素對NSE含量、calpain活性變化的影響:NSE含量變化分別受到了空氣ACR濃度、皮膚ACR污染量、工作時是否戴手套的影響(P0.05); calpain活性變化分別受到了空氣ACR濃度、皮膚ACR污染量、接毒年限的影響(P0.05)。 3.個人基本情況對NSE含量、calpain活性變化的影響:calpain活性變化分別受年齡、教育程度影響(P0.05)。 4.多因素對NSE含量、calpain活性變化影響: (1)NSE:皮膚ACR污染量,空氣個體ACR含量、性別、吸煙、是否戴手套、是否戴口罩、對血清中NSE含量變化有顯著影響,其中皮膚污染量對NSE含量變化影響相對較大(標(biāo)準(zhǔn)回歸系數(shù)最大)。 (2) calpain:年齡、皮膚ACR污染量、性別、抽煙對血清中calpain活性變化有顯著影響,其中年齡分組對calpain活性變化影響相對較大。 四、暴露組血清氧化抗氧化變化及影響因素 1.ACR外暴露劑量與氧化抗氧化相關(guān)性:空氣ACR濃度與GSH-Px活性、MDA含量成正相關(guān)(P0.05),相關(guān)系數(shù)分別為0.199,0.271;皮膚ACR污染量與MDA含量成正相關(guān)(P0.05),相關(guān)系數(shù)為0.329。 2.不同ACR職業(yè)相關(guān)因素對氧化抗氧化變化影響:GSH-Px活性變化分別受空氣ACR濃度、工作時是否戴手套的影響(P0.05);GSH含量變化受空氣ACR濃度影響(P0.05);SOD活性受接毒年限影響(P0.05);MDA含量的變化分別受空氣ACR濃度、皮膚ACR污染量、工作時是否戴手套影響(P0.05)。 3.個人基本情況對氧化抗氧化變化的影響:GSH-Px活性變化分別受年齡、是否吃油炸食品、是否飲用綠茶影響(P0.05);GSH含量變化受性別影響(P0.05);SOD活性變化分別受年齡、教育程度影響(P0.05)。 4.多因素對氧化抗氧化變化的影響: (1) GSH-Px:工作時是否戴手套和食用油炸食品對GSH-Px活性變化有顯著影響,其中工作時是否戴手套對GSH-Px活性變化影響相對較大。 (2)GSH:僅有空氣ACR濃度對血清中GSH含量有顯著影響。 (3)SOD:僅有年齡分組對血清中SOD活性變化有顯著影響。 (4)MDA:皮膚污染量、工作中是否戴手套、是否戴口罩對血清中MDA含量變化有顯著影響,其中皮膚污染量對血清中MDA含量變化影響相對較大。 結(jié)論 一、ACR暴露引起了血清NSE、MDA含量及GSH-Px活性升高。 二、ACR職業(yè)暴露人群血清中NSE含量、MDA含量變化是由ACR通過皮膚吸收引起的,所以在職業(yè)暴露人群日常工作中需要注意做好皮膚ACR污染的防護。 三、可以考慮以血清NSE為中心,血清GSH-Px活性和MDA含量為輔助,建立初步的ACR效應(yīng)生物標(biāo)志群,以期為職業(yè)暴露人群的ACR神經(jīng)毒作用提出早期預(yù)警。 四、本研究優(yōu)化了毛細管柱測定作業(yè)場所大量ACR空氣樣品的色譜條件,該法具有測定快速,準(zhǔn)確,檢測限低等特點,不僅適合ACR日常監(jiān)測的要求,更適合大批量現(xiàn)場樣本的分析測定的需要。探索了ACR個體采樣空氣收集器應(yīng)用,能更加準(zhǔn)確的反應(yīng)職業(yè)暴露工人的現(xiàn)場接觸劑量。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】:山東大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2012
【分類號】:R114
【參考文獻】
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