本文關(guān)鍵詞： 乙烯利 小鼠 生殖毒性 細(xì)胞周期 胸腺 脾臟 淋巴細(xì)胞亞群　出處：《濟(jì)南大學(xué)》2014年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：乙烯利（ethephon）（40%的水劑也叫一試靈）是一種植物生長調(diào)節(jié)劑型農(nóng)藥，主要作用是促進(jìn)果實(shí)的成熟；在某些果品的保存和遠(yuǎn)距離運(yùn)輸?shù)确矫姘l(fā)揮著巨大的作用。目前很多瓜果蔬菜等農(nóng)產(chǎn)品在上市前大多使用乙烯利作為催熟劑。近年來，很多不法商販和果農(nóng)為了獲取更大的經(jīng)濟(jì)利益，過量使用和濫用乙烯利的現(xiàn)象越來越嚴(yán)重。乙烯利的超量濫施濫用造成果蔬中乙烯利殘留嚴(yán)重超標(biāo)，乙烯利殘留在水果并進(jìn)入人體，會對健康產(chǎn)生一定的影響。乙烯利毒性研究報(bào)道較少，有個別文獻(xiàn)報(bào)道乙烯利能引起小鼠的生殖毒性并能產(chǎn)生一定的免疫毒性作用，本實(shí)驗(yàn)深入系統(tǒng)地探討了乙烯利對昆明種雄性小鼠的生殖功能和免疫功能的毒性作用。 【研究目的】 探討乙烯利對雄性小鼠生殖系統(tǒng)的影響和對免疫系統(tǒng)的毒性作用，為今后深入、系統(tǒng)地探討乙烯利的毒性作用及其毒性作用機(jī)制等研究提供線索。 【研究方法】 1、雄性小鼠隨機(jī)分為4組，每組20只，實(shí)驗(yàn)設(shè)四個劑量組，分別設(shè)低劑量染毒組(85mg/kg，1"32LD50)、中劑量染毒組(170mg/kg，1"16LD50)和高劑量染毒組(340mg/kg，1"8LD50)，另設(shè)陰性對照組（生理鹽水），經(jīng)口灌胃染毒，連續(xù)染毒14天，1次/天，隨時觀察雄性小鼠的生長情況。從首次給藥第15天起以1:1與雌性小鼠合籠。從合籠的第2天起，每天早晨8點(diǎn)左右觀察并記錄雌性小鼠陰栓出現(xiàn)情況，以此作為雄性小鼠性欲功能的指標(biāo)。于合籠后第21天以頸椎脫臼處死雌性小鼠，剖腹檢查，計(jì)算受孕率和生育仔鼠數(shù)。于首次給藥后第28天采用頸椎脫臼法處死雄性小鼠，摘取睪丸、附睪及精囊腺，肉眼觀察并稱重。 觀察乙烯利對雄性小鼠精子質(zhì)量的影響及睪丸組織的病理學(xué)改變，用流式細(xì)胞技術(shù)（FCM）對每組10只雄性小鼠的睪丸生精細(xì)胞的細(xì)胞周期進(jìn)行測定，并選用原位末端轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記法（TUNEL）進(jìn)行雄性小鼠的睪丸生精細(xì)胞凋亡情況的分析。 2、將健康成年SPF級雄性昆明種小鼠隨機(jī)分為4組，每組10只，實(shí)驗(yàn)組設(shè)低劑量染毒組(85mg/kg)、中劑量染毒組(170mg/kg)和高劑量染毒組(340mg/kg)，染毒劑量相當(dāng)于乙烯利的1"32LD50、1"16LD50、1"8LD50；另設(shè)陰性對照組（生理鹽水）。選用經(jīng)口灌胃方法進(jìn)行染毒，染毒容量為20ml/kg，分別給予雄性小鼠不同劑量的乙烯利溶液，每天1次，連續(xù)染毒14天。于首次給藥后第28天，采用摘眼球取血法采血2ml，頸椎脫臼法處死小鼠，迅速摘取脾臟和胸腺，肉眼觀察并稱重。檢測并觀察分析小鼠外周血的血液學(xué)各項(xiàng)指標(biāo)和淋巴細(xì)胞細(xì)胞周期的變化情況。選用流式細(xì)胞技術(shù)（FCM）對每組6只雄性小鼠脾細(xì)胞和胸腺細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞周期的檢測，并觀察對脾臟淋巴細(xì)胞CD3+、CD4+、CD8+及胸腺淋巴細(xì)胞CD4+、CD8+比例的影響。 【研究結(jié)果】 1、乙烯利對雌雄小鼠生殖系統(tǒng)的影響 與陰性對照組相比較，中、高劑量染毒組雄性小鼠體重明顯減輕(P0.05)，高劑量染毒組雌性小鼠受孕率、雄性小鼠精囊腺重量和精子計(jì)數(shù)明顯減少(P0.05)；各劑量染毒組雄性小鼠精子活動率均低于陰性對照組(P0.05)；各劑量染毒組雄性小鼠精子畸形率均高于陰性對照組(P0.05)；中、高劑量染毒組雄性小鼠睪丸組織病理學(xué)檢查可見明顯異常。與陰性對照組相比，中、高劑量染毒組雄性小鼠的單倍體細(xì)胞細(xì)胞比例明顯減少，中、高劑量染毒組雄性小鼠的二倍體細(xì)胞和四倍體細(xì)胞的細(xì)胞比例明顯升高，其差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；中、高劑量染毒組雄性小鼠1C:4C和1C:2C呈下降趨勢，與陰性對照組比較其差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）；各劑量染毒組雄性小鼠睪丸組織生精細(xì)胞的細(xì)胞凋亡率均升高（P0.05）。 2、乙烯利對雄性小鼠外周血常規(guī)及淋巴細(xì)胞細(xì)胞周期的影響 各劑量染毒組雄性小鼠外周血的紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（RBC）、白細(xì)胞計(jì)數(shù)（WBC）、淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)（LYM）、血小板計(jì)數(shù)（PLT）和血紅蛋白（HGB）、嗜中性粒細(xì)胞（NEU）含量及淋巴細(xì)胞百分比（LYM％）以及淋巴細(xì)胞G0/G1期、S期、G2/M期細(xì)胞所占比例與陰性對照組相比，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 3、乙烯利對雄性小鼠脾臟和胸腺細(xì)胞周期及淋巴細(xì)胞亞群的影響 本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)與陰性對照組比較，中、高劑量染毒組雄性小鼠脾臟G2/M期細(xì)胞數(shù)所占比例升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）；各劑量染毒組雄性小鼠脾臟S期和G0/G1期細(xì)胞數(shù)所占比例均無顯著改變。 與陰性對照組相比，高劑量染毒組雄性小鼠脾臟淋巴細(xì)胞CD3+比例明顯升高（P0.05）；各劑量染毒組雄性小鼠胸腺淋巴細(xì)胞CD8+比例明顯升高（P0.05），CD4+/CD8+比值下降（P0.05）；中、高劑量染毒組雄性小鼠胸腺淋巴細(xì)胞CD4+比例升高（P0.05）。 【研究結(jié)論】 1、乙烯利對雄性小鼠產(chǎn)生了一定的生殖毒作用，能使雄性生育力下降，睪丸組織的生精細(xì)胞凋亡率升高。 2、乙烯利能引起雄性小鼠生精細(xì)胞比例的變化，1C:4C和1C:2C的相對下降，，阻滯小鼠生精細(xì)胞的細(xì)胞周期進(jìn)程。 3、本研究尚未發(fā)現(xiàn)乙烯利能引起雄性小鼠外周血血液學(xué)各指標(biāo)及外周血淋巴細(xì)胞細(xì)胞周期分布的改變。 4、乙烯利通過G2/M期阻滯抑制了雄性小鼠脾細(xì)胞和胸腺細(xì)胞的細(xì)胞增殖。乙烯利使雄性小鼠脾臟和胸腺淋巴細(xì)胞中的CD3+、CD4+和CD8+比例相對增加，這提示乙烯利對雄性小鼠脾臟和胸腺淋巴細(xì)胞亞型比例有一定的影響。
[Abstract]:ethephon ( 40 % water agent is also called a test ) is a kind of plant growth regulating dosage form pesticide . The main function is to promote the maturity of fruit . In recent years , many kinds of agricultural products such as fruits and vegetables have been used as the ripening agent . In recent years , many illegal traders and farmers have been used as the ripening agent . In recent years , many illegal traders and farmers have had a certain effect on health . The study of ethrel toxicity has been reported relatively few , and some literature reports that ethephon can cause reproductive toxicity of mice and can produce certain immune toxic effects . This experiment deeply studied the toxic effects of ethephon on the reproductive function and immune function of Kunming male mice . Purpose of research To investigate the effects of ethephon on the reproductive system of male mice and the toxic effects on the immune system , and provide clues for the future in - depth and systematic study on the toxicity and toxic mechanism of ethephon . Methodology of research

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本文編號：1541858