本文關鍵詞：星狀病毒核酸檢測標準物質(zhì)的研制　出處：《食品科學》2016年06期 　論文類型：期刊論文

  更多相關文章： 星狀病毒 核酸 定量實時聚合酶鏈式反應 數(shù)字聚合酶鏈式反應 標準物質(zhì)

【摘要】：目的:研制用于食品中星狀病毒核酸檢測的c RNA標準物質(zhì)。方法:利用基因克隆體外轉(zhuǎn)錄方法制備星狀病毒c RNA純品,初步定量后稀釋至適宜濃度進行分裝,其中一部分分裝樣品添加RNAsafe處理,剩余部分不做處理,制備2種標準物質(zhì)樣品。采用實時熒光定量實時聚合酶鏈式反應(real-time-polymerase chain reaction,RTPCR)方法檢驗2種標準物質(zhì)樣品均勻性和穩(wěn)定性。樣品中RNA濃度(拷貝/μL)通過熒光定量RT-PCR和數(shù)字PCR聯(lián)合定值獲得,并進行不確定度分析。結果:均勻性結果顯示2種樣品組間精密度與組內(nèi)精密度差異均無統(tǒng)計學意義(P0.05)。穩(wěn)定性檢驗表明20~25℃10 d、4℃14 d、-20℃3個月及-80℃和液氮6個月2種樣品c RNA含量無顯著變化。RNAsafe(-)標準物質(zhì)定值為:(1.652±0.143)×108拷貝/μL(-80℃)和(1.652±0.135)×10~8拷貝/μL(液氮)。結論:RNAsafe(-)標準物質(zhì)樣品可作為用于星狀病毒核酸檢測的標準物質(zhì)。
【作者單位】： 北京出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術中心;遼寧出入境檢驗檢疫局;
【基金】：國家質(zhì)檢總局科技計劃項目(2014IK109) 國家重大科學研究計劃項目(2011CD932800) 質(zhì)檢公益性行業(yè)科研專項(201410059;201410080)
【分類號】：R155.5
【正文快照】： 引文格式:徐蕾蕊,魏海燕,林長軍,等.星狀病毒核酸檢測標準物質(zhì)的研制[J].食品科學,2016,37(6):172-177.DOI:10.7506/spkx1002-6630-201606031.http://www.spkx.net.cnXU Leirui,WEI Haiyan,LIN Changjun,et al.Development of the astrovirus reference material used in nucl

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本文編號：1312925