本文關(guān)鍵詞：星狀病毒核酸檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研制　出處：《食品科學(xué)》2016年06期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：目的:研制用于食品中星狀病毒核酸檢測(cè)的c RNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。方法:利用基因克隆體外轉(zhuǎn)錄方法制備星狀病毒c RNA純品,初步定量后稀釋至適宜濃度進(jìn)行分裝,其中一部分分裝樣品添加RNAsafe處理,剩余部分不做處理,制備2種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)樣品。采用實(shí)時(shí)熒光定量實(shí)時(shí)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(real-time-polymerase chain reaction,RTPCR)方法檢驗(yàn)2種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)樣品均勻性和穩(wěn)定性。樣品中RNA濃度(拷貝/μL)通過(guò)熒光定量RT-PCR和數(shù)字PCR聯(lián)合定值獲得,并進(jìn)行不確定度分析。結(jié)果:均勻性結(jié)果顯示2種樣品組間精密度與組內(nèi)精密度差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。穩(wěn)定性檢驗(yàn)表明20~25℃10 d、4℃14 d、-20℃3個(gè)月及-80℃和液氮6個(gè)月2種樣品c RNA含量無(wú)顯著變化。RNAsafe(-)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)定值為:(1.652±0.143)×108拷貝/μL(-80℃)和(1.652±0.135)×10~8拷貝/μL(液氮)。結(jié)論:RNAsafe(-)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)樣品可作為用于星狀病毒核酸檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。
【作者單位】： 北京出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心;遼寧出入境檢驗(yàn)檢疫局;
【基金】：國(guó)家質(zhì)檢總局科技計(jì)劃項(xiàng)目(2014IK109) 國(guó)家重大科學(xué)研究計(jì)劃項(xiàng)目(2011CD932800) 質(zhì)檢公益性行業(yè)科研專項(xiàng)(201410059;201410080)
【分類號(hào)】：R155.5
【正文快照】： 引文格式:徐蕾蕊,魏海燕,林長(zhǎng)軍,等.星狀病毒核酸檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研制[J].食品科學(xué),2016,37(6):172-177.DOI:10.7506/spkx1002-6630-201606031.http://www.spkx.net.cnXU Leirui,WEI Haiyan,LIN Changjun,et al.Development of the astrovirus reference material used in nucl

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本文編號(hào)：1312925