本文關(guān)鍵詞：食品中金黃色葡萄球菌PCR-ELISA檢測技術(shù)建立

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【摘要】：針對食品中金黃色葡萄球菌檢測,選取金黃色葡萄球菌耐熱核酸酶nuc基因作為靶標(biāo),利用地高辛標(biāo)記引物擴(kuò)增的PCR產(chǎn)物與生物素標(biāo)記的探針雜交,然后與ELISA平板上的鏈霉素雜交,通過抗地高辛抗體顯色建立PCR-ELISA檢測技術(shù)。應(yīng)用該方法檢測人工污染牛奶中金黃色葡萄球菌,同時(shí)將大腸埃希氏菌、沙門氏菌、志賀氏菌、單增李斯特菌等常見食源性致病菌作為陰性對照。結(jié)果顯示,金黃色葡萄球菌的純培養(yǎng)物以及人工污染金黃色葡萄球菌牛奶,金黃色葡萄球菌為陽性,其他對照菌為陰性,兩者PCR-ELISA檢測敏感性均為10~1CFU/m L,比普通PCR檢測的敏感性(10~3CFU/m L)高100倍。因此,該研究建立的PCR-ELISA方法具有良好的特異性與敏感性,能夠特異、敏感、準(zhǔn)確地檢測牛奶中的金黃色葡萄球菌,為食品中金黃色葡萄菌的快速鑒定、風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估與有效監(jiān)測提供重要技術(shù)手段。
【作者單位】： 鄭州輕工業(yè)學(xué)院食品與生物工程學(xué)院;河南省食品安全國際聯(lián)合實(shí)驗(yàn)室;食品生產(chǎn)與安全河南省協(xié)同創(chuàng)新中心;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(31201901) 教育部留學(xué)回國人員科研啟動(dòng)基金(第46批,教外司留[2013]693號(hào)) 河南省高校青年骨干教師資助計(jì)劃項(xiàng)目(教高[2015]1032號(hào)) 河南省教育廳科學(xué)技術(shù)重點(diǎn)研究項(xiàng)目(14A180025) 鄭州市科技攻關(guān)項(xiàng)目(20130857) 鄭州輕工業(yè)學(xué)院博士基金項(xiàng)目(2011BSJJ033) 鄭州輕工業(yè)學(xué)院青年骨干教師資助計(jì)劃項(xiàng)目(2013QNGG02) 鄭州輕工業(yè)學(xué)院研究生創(chuàng)新基金項(xiàng)目(2014031) 食品生產(chǎn)與安全河南省協(xié)同創(chuàng)新中心研究生創(chuàng)新基金項(xiàng)目(FCICY201614)
【分類號(hào)】：R155.5
【正文快照】： 金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,以下簡稱金葡菌)是一種人畜共患食源性致病菌,可引起肺 炎、偽膜性腸炎與膿毒血癥等化膿性疾病以及細(xì)菌性食物中毒。據(jù)美國疾病預(yù)防控制中心報(bào)告,在美國,金黃色葡萄球菌僅次于大腸桿菌占整個(gè)細(xì)菌性食物中毒的33%,在加拿大占45%,一些歐

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本文編號(hào)：1263409