本文關(guān)鍵詞：基于功能化金納米探針檢測(cè)透明質(zhì)酸酶和金黃色葡萄球菌

  更多相關(guān)文章： 金納米粒子 表面共振能量轉(zhuǎn)移 透明質(zhì)酸酶 細(xì)菌 核酸適配體 金納米簇 抗生素 雙識(shí)別

【摘要】：納米材料獨(dú)特的物理性能和優(yōu)異的光、電、磁以及機(jī)械性能,使其在生物醫(yī)藥等領(lǐng)域具有十分廣泛的應(yīng)用。其中,金納米粒子因能顯著地猝滅其周?chē)鸁晒饣鶊F(tuán)的熒光信號(hào),被廣泛地運(yùn)用于構(gòu)建表面能量轉(zhuǎn)移(NSET)探針以檢測(cè)各類(lèi)物質(zhì)如生物活性物質(zhì)、環(huán)境污染物、疾病標(biāo)志物等。同時(shí),金納米簇因具有較高的熒光量子產(chǎn)量,被廣泛地運(yùn)用于熒光標(biāo)記以檢測(cè)各類(lèi)物質(zhì)。本文基于金納米材料的熒光性質(zhì),結(jié)合NSET分析技術(shù)和雙位點(diǎn)分子識(shí)別模式分別構(gòu)建了檢測(cè)疾病標(biāo)志物和病原微生物的新方法：(1)一步合成透明質(zhì)酸功能化的熒光金納米NSET探針用于腫瘤患者尿液中透明質(zhì)酸酶(HAase)快速靈敏檢測(cè)。在本工作中,以異硫氰酸熒光素標(biāo)記的透明質(zhì)酸(FITC-HA)同時(shí)作為還原劑和穩(wěn)定劑直接還原氯金酸,在溫和的環(huán)境下快速一步合成粒徑均一、穩(wěn)定性好、且功能化的FITC-HA-AuNPs探針,并用此探針基于HAase對(duì)HA的專(zhuān)一性水解作用,特異性地檢測(cè)疾病標(biāo)志物HAase。與現(xiàn)有檢測(cè)HAase的方法相比,本工作簡(jiǎn)化了檢測(cè)探針制備的步驟、縮短了檢測(cè)時(shí)間(僅需3 h)、提高了靈敏度和準(zhǔn)確度(LOD:0.63 U mL-1, Recovery:92.77-106.90%)、且可以直接用于實(shí)際樣本中(膀胱癌病人尿液)HAase的檢測(cè),具有良好的準(zhǔn)確度(RSD4.85%)。本研究工作將有望為膀胱癌等與HAase相關(guān)的疾病臨床診斷提供新的一個(gè)靈敏、快速、準(zhǔn)確的檢測(cè)技術(shù)。(2)基于核酸適配體-磁珠與抗生素-金納米簇雙識(shí)別作用特異靈敏檢測(cè)金黃色葡萄球菌(SA)。致病菌引起的感染性疾病、食品污染等給社會(huì)帶來(lái)很大危害,其中SA是最常見(jiàn)的致病菌之一。本工作構(gòu)建了一種基于核酸適配體-磁珠(Aptamer-magnetic beads)與抗生素-金納米簇(AuNCs@Van)雙識(shí)別作用特異靈敏檢測(cè)SA的新方法。選用Aptamer-magnetic beads分離并富集混合細(xì)菌中的SA,再利用一步合成的AuNCs@Van定量檢測(cè)SA,檢測(cè)限為幾十個(gè)細(xì)菌,并初步探索了該方法對(duì)牛奶中SA的檢測(cè)。相比于已有的SA檢測(cè)工作,本工作具有以下特點(diǎn)：雙識(shí)別分子核酸適配體與抗生素的特異性、價(jià)廉易得,且捕獲探針可重復(fù)利用；檢測(cè)探針AuNCs@Van制備條件溫和、且制備過(guò)程簡(jiǎn)單、快速。本研究工作有望對(duì)由SA引起的食品污染提供可能的新技術(shù)。
【關(guān)鍵詞】：金納米粒子 表面共振能量轉(zhuǎn)移 透明質(zhì)酸酶 細(xì)菌 核酸適配體 金納米簇 抗生素 雙識(shí)別
【學(xué)位授予單位】：西南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：TB383.1;R914.5
【目錄】：

• 摘要6-8
• ABSTRACT8-10
• 縮寫(xiě)符號(hào)對(duì)照表10-11
• 第一章 緒論11-27
• 1.1 引言11-12
• 1.2 金納米材料概述12-14
• 1.2.1 金納米材料的性質(zhì)12
• 1.2.2 金納米材料的制備12-14
• 1.3 金納米材料的應(yīng)用14-21
• 1.3.1 在環(huán)境污染監(jiān)測(cè)中的應(yīng)用14-16
• 1.3.2 在疾病標(biāo)志物檢測(cè)中的應(yīng)用16-18
• 1.3.3 在食品安全監(jiān)控中的應(yīng)用18-21
• 1.4 論文的出發(fā)點(diǎn)及主要內(nèi)容21-22
• 參考文獻(xiàn)22-27
• 第二章 透明質(zhì)酸功能化的熒光金納米NSET探針用于腫瘤患者尿液中HAase快速靈敏檢測(cè)27-43
• 2.1 引言27-28
• 2.2 實(shí)驗(yàn)部分28-30
• 2.2.1 儀器與試劑28-29
• 2.2.2 FITC-HA-AuNPs納米材料的合成29
• 2.2.3 FITC-HA-AuNPs納米探針?lè)�(wěn)定性實(shí)驗(yàn)29
• 2.2.4 基于FITC-HA-AuNPs納米探針檢測(cè)HAase29-30
• 2.2.5 基于FITC-HA-AuNPs納米探針檢測(cè)人尿液中HAase30
• 2.3 結(jié)果與討論30-38
• 2.3.1 FITC-HA-AuNPs納米探針制備條件優(yōu)化30-31
• 2.3.2 FITC-HA-AuNPs納米探針的表征31-33
• 2.3.3 FITC-HA-AuNPs納米探針檢測(cè)HAase33-36
• 2.3.4 FITC-HA-AuNPs納米探針選擇性考察36-37
• 2.3.5 基于FITC-HA-AuNPs納米探針檢測(cè)人尿液中HAase含量37-38
• 2.4 結(jié)論38-39
• 參考文獻(xiàn)39-43
• 第三章 基于核酸適配體-磁珠與抗生素-金納米簇雙識(shí)別作用特異靈敏檢測(cè)金黃色葡萄球菌43-61
• 3.1 引言43-45
• 3.2 實(shí)驗(yàn)部分45-47
• 3.2.1 儀器與試劑45
• 3.2.2 AuNCs@Van熒光金納米簇制備方法45
• 3.2.3 AuNCs@Van熒光金納米簇穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)45-46
• 3.2.4 Aptamer-magnetic beads制備46
• 3.2.5 AuNCs@Van熒光金納米簇定量檢測(cè)SA46
• 3.2.6 基于Aptamer-magnetic beads與AuNCs@Van雙識(shí)別特異靈敏檢測(cè)SA46
• 3.2.7 方法選擇性驗(yàn)證46
• 3.2.8 混合細(xì)菌中SA檢測(cè)限考察46-47
• 3.2.9 牛奶樣品中SA檢測(cè)47
• 3.3 結(jié)果與討論47-54
• 3.3.1 AuNCs@Van熒光金納米簇制備條件優(yōu)化47
• 3.3.2 AuNCs@Van熒光金納米簇的表征47-49
• 3.3.3 AuNCs@Van熒光金納米簇穩(wěn)定性考察49-50
• 3.3.4 AuNCs@Van熒光金納米簇定量檢測(cè)SA50-51
• 3.3.5 基于Aptamer-magnetic beads和AuNCs@Van雙識(shí)別作用分離并檢測(cè)SA51-54
• 3.3.6 牛奶樣品中SA檢測(cè)54
• 3.4 結(jié)論54-56
• 參考文獻(xiàn)56-61
• 致謝61-63
• 攻讀碩士學(xué)位期間研究成果63

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 馮異;趙軍武;齊曉霞;高芬;;納米材料及其應(yīng)用研究進(jìn)展[J];工具技術(shù);2006年10期

2 吳維明,蔡強(qiáng),陳裕泉;納米金在生物檢測(cè)中的應(yīng)用[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).生物醫(yī)學(xué)工程分冊(cè);2003年05期

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本文編號(hào)：552476