基于衍生化—微順序注射光纖傳感異丙酚分析
本文關(guān)鍵詞:基于衍生化—微順序注射光纖傳感異丙酚分析,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:建立異丙酚衍生化方法提高紫外或熒光檢測(cè)靈敏度,應(yīng)用于血漿中異丙酚分析時(shí)避免血漿中內(nèi)源性物質(zhì)的干擾。與微順序注射-閥上實(shí)驗(yàn)室(μSI-LOV)、光纖傳感技術(shù)相結(jié)合快速依次進(jìn)行異丙酚的衍生化與檢測(cè),實(shí)現(xiàn)異丙酚快速、自動(dòng)化、一體化分析。方法:1.異丙酚的衍生化及分析:研究異丙酚與4-磺酸基氯化重氮苯偶合衍生化,反應(yīng)生成偶合產(chǎn)物用紫外可見分光光度法檢測(cè),通過(guò)單因素變量法對(duì)反應(yīng)條件進(jìn)行考察;研究丹磺酰氯(DNC-Cl)對(duì)異丙酚的熒光衍生化,反應(yīng)后產(chǎn)物用熒光分光光度法測(cè)定,通過(guò)單因素變量法考察衍生化條件。建立基于重氮偶合衍生化-紫外可見分光光度法分析血漿中異丙酚并應(yīng)用于異丙酚模擬生物樣品分析。2.基于重氮偶合衍生-微順序注射光纖傳感異丙酚分析:將重氮偶合衍生化與μSI-LOV光纖傳感相結(jié)合,在μSI-LOV系統(tǒng)中完成衍生化反應(yīng),產(chǎn)物通過(guò)光纖傳感檢測(cè),用單因素變量法優(yōu)化相關(guān)實(shí)驗(yàn)條件;建立重氮偶合衍生化結(jié)合μSI-LOV光纖傳感分析血漿中異丙酚并應(yīng)用于異丙酚模擬生物樣品分析以及活體大鼠血漿中異丙酚分析。結(jié)果:1.異丙酚衍生化及分析:異丙酚重氮偶合衍生化后生成橙紅色偶合產(chǎn)物,最大吸收波長(zhǎng)(λmax)在483nm處,反應(yīng)條件確定為:用0.06mol/L鹽酸溶解對(duì)氨基苯磺酸并與亞硝酸鈉反應(yīng)5min生成濃度為5.780×10-4mol/L4-磺酸基氯化重氮苯再與異丙酚混合,加入濃度為0.7mol/L的氫氧化鈉溶液,常溫反應(yīng)10min為最佳。偶合產(chǎn)物在20min內(nèi)穩(wěn)定;DNS-Cl對(duì)異丙酚熒光衍生化后產(chǎn)物激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)(λex、λem)分別位于345、500nm,衍生化條件確定為:乙腈作為DNS-Cl、異丙酚的溶劑,DNS-Cl與異丙酚摩爾比為8:1,加入0.1mol/mL氫氧化鈉溶液,溫度為60℃避光反應(yīng)5min,產(chǎn)物需萃取,以環(huán)己烷為萃取溶劑萃取1min結(jié)果最佳,產(chǎn)物在10min內(nèi)基本保持穩(wěn)定;重氮偶合衍生化-紫外可見分光光度法分析血漿中異丙酚濃度范圍在6~21μg/mL呈良好線性關(guān)系(r=0.9960),在高、中、低3個(gè)水平濃度平均方法回收率在102.9%~104.5%之間,精密度(RSD)4.1%~5.5%,方法重復(fù)性符合要求,并考察異丙酚前處理后在4小時(shí)內(nèi)保持穩(wěn)定。2.重氮偶合衍生結(jié)合μSI-LOV光纖傳感分析異丙酚最優(yōu)條件為:以50μL/s的流速順序吸入50μL約1.156×10-3mol/L4-磺酸基氯化重氮苯溶液,50μL異丙酚溶液,40μL0.2mol/LNaOH溶液到儲(chǔ)液管中無(wú)需停流,再反向以15μL/s流速打入流通池檢測(cè);重氮偶合衍生化結(jié)合μSI-LOV光纖傳感分析血漿中異丙酚濃度范圍在3~18μg/mL呈良好線性關(guān)系(r=0.9990),高、中、低3個(gè)濃度的平均方法回收率在89.8%~99.6%之間,精密度4.3%~5.4%,方法重復(fù)性符合要求,并考察異丙酚前處理后在4小時(shí)內(nèi)保持穩(wěn)定;該法可測(cè)得給藥后10min內(nèi)活體大鼠血漿中異丙酚含量,通過(guò)方法學(xué)驗(yàn)證測(cè)定血漿中異丙酚濃度范圍在3~24μg/mL呈良好線性關(guān)系(r=0.9960),高、中、低3個(gè)濃度的平均方法回收率在92.7%~105.5%之間,精密度(RSD)5.3%~7.5%。結(jié)論:1.異丙酚重氮偶合衍生化后吸收波長(zhǎng)紅移、吸光度值增加,反應(yīng)條件容易控制,反應(yīng)速度快;DNS-Cl對(duì)異丙酚衍生化后λex、λem紅移,熒光強(qiáng)度低,沒(méi)用于血漿中異丙酚分析,提供考察結(jié)果為后續(xù)研究提供參考;重氮偶合衍生-紫外可見分光光度法可用于分析血漿中異丙酚,避免血中內(nèi)源性物質(zhì)干擾,方法簡(jiǎn)便、快捷。2.異丙酚重氮偶合衍生化結(jié)合μSI-LOV光纖傳感,衍生化速率得到進(jìn)一步改善,實(shí)現(xiàn)異丙酚分析過(guò)程的自動(dòng)化、一體化?捎糜谘獫{中異丙酚分析,該方法比重氮偶合衍生化結(jié)合紫外-可見分光光度法更快、更靈敏。該法用于測(cè)定活體大鼠血漿中異丙酚,靈敏度欠佳,方法還需進(jìn)一步改善以分析更低濃度異丙酚。
【關(guān)鍵詞】:異丙酚 熒光衍生 重氮偶合衍生 微順序注射-閥上實(shí)驗(yàn)室 光纖傳感
【學(xué)位授予單位】:新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R927
【目錄】:
- 摘要8-10
- ABSTRACT10-13
- 前言13-15
- 研究?jī)?nèi)容15-51
- 1. 異丙酚衍生化及分析15-33
- 1.1 異丙酚重氮偶合衍生化15-21
- 1.2 丹磺酰氯對(duì)異丙酚熒光衍生化21-28
- 1.3 重氮偶合衍生-紫外可見分光光度法分析血漿中異丙酚28-33
- 2. 基于重氮偶合衍生-微順序注射光纖傳感異丙酚分析33-51
- 2.1 建立異丙酚重氮偶合衍生-微順序注射光纖傳感分析方法33-41
- 2.2 重氮偶合衍生-微順序注射光纖傳感分析血漿中異丙酚41-45
- 2.3 重氮偶合衍生-微順序注射光纖傳感分析活體大鼠血漿中異丙酚45-51
- 小結(jié)51-53
- 致謝53-54
- 參考文獻(xiàn)54-60
- 綜述60-71
- 參考文獻(xiàn)65-71
- 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文71-72
- 導(dǎo)師評(píng)閱表72
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,本文編號(hào):468961
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