聚卟啉鐵整體柱的制備及其色譜性能研究
本文關(guān)鍵詞:聚卟啉鐵整體柱的制備及其色譜性能研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:作為細(xì)胞中的活性大分子,蛋白質(zhì)是與疾病相關(guān)的主要分子,蛋白表達(dá)水平的改變與疾病直接相關(guān)。因此研究如何對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行分離、鑒定,是一項(xiàng)具有重要意義的工作。整體柱具有制備方法簡(jiǎn)單、通透性好等特點(diǎn),已被較廣泛的用作高效液相色譜固定相,用于蛋白質(zhì)的分離、分析中。本文通過(guò)兩種聚合方式制備了兩種聚卟啉鐵整體柱,并分別以其為固定相,通過(guò)高效液相色譜法對(duì)幾種標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)和幾種實(shí)際生物樣品進(jìn)行了成功分離。首先,本文通過(guò)原位自由基聚合方式,以卟啉鐵(Hemin)、甲基丙烯酸縮水甘油酯(GMA)作為二元單體,乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)作為交聯(lián)劑,1,4-丁二醇、丙醇、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)為致孔劑,偶氮二異丁腈(AIBN)為引發(fā)劑,制備得到聚(Hemin-co-GMA-co-EDMA)整體柱。通過(guò)掃描電鏡、紅外光譜法、氮吸附-脫附法和壓汞法等方法對(duì)得到的整體柱進(jìn)行了表征。將該整體柱用作高效液相色譜的固定相,在8分鐘內(nèi)對(duì)三種標(biāo)準(zhǔn)蛋白進(jìn)行了成功分離;此外,還分離了雞卵清以及細(xì)胞色素C的酶解液,結(jié)果表明卟啉鐵的加入增強(qiáng)了該整體柱對(duì)蛋白質(zhì)的選擇性,對(duì)實(shí)際蛋白質(zhì)樣品具有一定的分離能力。其次,為了改善整體柱孔結(jié)構(gòu)的均勻性并提升其對(duì)蛋白質(zhì)的選擇性,采用活性-可控的原子轉(zhuǎn)移自由基聚合法(atom transfer radical polymerization,ATRP)制備了聚(Hemin-co-GMA-co-EDMA)整體柱。利用該整體柱對(duì)幾種標(biāo)準(zhǔn)蛋白進(jìn)行了成功分離。此外,還分別對(duì)人血漿及蝸牛酶進(jìn)行了分離。結(jié)果表明:與原位聚合得到的整體柱相比,通過(guò)ATRP方法制備得到的聚(Hemin-co-GMA-co-EDMA)整體柱具有均勻的孔結(jié)構(gòu)和更好的蛋白選擇性。
【關(guān)鍵詞】:卟啉鐵 高效液相 整體柱 蛋白質(zhì) 原子轉(zhuǎn)移自由基聚合
【學(xué)位授予單位】:河北大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類(lèi)號(hào)】:R943
【目錄】:
- 摘要5-6
- Abstract6-9
- 第1章 緒論9-13
- 1.1 蛋白質(zhì)的分離、鑒定方法9-10
- 1.1.1 雙向電泳(2-DE)-質(zhì)譜技術(shù)9
- 1.1.2 毛細(xì)管電泳-質(zhì)譜技術(shù)9
- 1.1.3 多維液相色譜-質(zhì)譜技術(shù)9-10
- 1.2 聚合物整體柱10-12
- 1.2.1 聚合物整體柱的制備10-11
- 1.2.2 聚合物整體柱在蛋白質(zhì)分離中的應(yīng)用11
- 1.2.3 卟啉11-12
- 1.3 聚合物整體柱在蛋白分離中的問(wèn)題及展望12-13
- 第2章 原位自由基聚合法制備聚(Hemin-co-GMA-co-EDMA)整體柱13-23
- 2.1 引言13
- 2.2 實(shí)驗(yàn)部分13-15
- 2.2.1 試劑與儀器13
- 2.2.2 整體柱的制備13-15
- 2.3 結(jié)果與討論15-23
- 2.3.1 聚(Hemin-co-GMA-co-EDMA)整體柱的制備條件優(yōu)化15
- 2.3.2 整體柱的內(nèi)部結(jié)構(gòu)特征15-16
- 2.3.3 聚(Hemin-co-GMA-co-EDMA)整體柱的紅外光譜特征16-17
- 2.3.4 聚(Hemin-co-GMA-co-EDMA)整體柱的機(jī)械穩(wěn)定性17-18
- 2.3.5 聚(Hemin-co-GMA-co-EDMA)整體柱的熱穩(wěn)定性及孔尺寸分布18-19
- 2.3.6 聚(Hemin-co-GMA-co-EDMA)整體柱的色譜表征19-23
- 第3章 聚(Hemin-co-GMA-EDMA)整體柱的ATRP法制備及其對(duì)蛋白質(zhì)的分離23-33
- 3.1 引言23
- 3.2 實(shí)驗(yàn)部分23-25
- 3.2.1 試劑與儀器23-24
- 3.2.2 整體柱的制備24-25
- 3.3 結(jié)果與討論25-33
- 3.3.1 聚(Hemin-co-GMA-co-EDMA)整體柱制備條件的優(yōu)化25
- 3.3.2 整體柱的內(nèi)部結(jié)構(gòu)表征25-26
- 3.3.3 聚(Hemin-co-GMA-co-EDMA)整體柱的紅外光譜特征26-27
- 3.3.4 聚(Hemin-co-GMA-co-EDMA)整體柱的機(jī)械穩(wěn)定性27-28
- 3.3.5 聚(Hemin-co-GMA-co-EDMA)整體柱的熱穩(wěn)定性及孔尺寸分布28-29
- 3.3.6 聚(Hemin-co-GMA-co-EDMA)整體柱的色譜性能考察29-33
- 結(jié)論33-34
- 參考文獻(xiàn)34-38
- 致謝38-39
- 攻讀學(xué)位期間取得的科研成果39
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本文編號(hào):460460
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