本文關(guān)鍵詞：成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子21在大腸桿菌細(xì)胞周質(zhì)中的表達(dá)，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子21(FGF21)是近期發(fā)現(xiàn)的糖脂代謝調(diào)節(jié)因子,其安全、有效和不依賴胰島素調(diào)節(jié)血糖的特點(diǎn),使其有望成為治療糖尿病的新型藥物。為研究人FGF21(h-FGF21)在大腸桿菌細(xì)胞周質(zhì)表達(dá),本實(shí)驗(yàn)在pET27b載體PelB(pectate lyase B)信號(hào)肽下游連入h-FGF21基因,成功構(gòu)建了pET27bPelB-h-FGF21重組質(zhì)粒,并發(fā)現(xiàn)pET27bPelB-h-FGF21轉(zhuǎn)化E.coliBL21(含DE3)經(jīng)誘導(dǎo)后能夠在細(xì)胞周質(zhì)成功地表達(dá)h-FGF21,表明PelB信號(hào)肽在h-FGF21細(xì)胞周質(zhì)表達(dá)中起到了關(guān)鍵作用。經(jīng)周質(zhì)蛋白提取和兩步離子交換層析,利用灰度分析軟件分析得到了純度大于95%的h-FGF21蛋白,SDS-PAGE與Western blotting結(jié)果證明了目的蛋白大小約20 k Da;經(jīng)HepG2細(xì)胞的葡萄糖吸收實(shí)驗(yàn)以及在II型糖尿病db/db小鼠上的短期和長(zhǎng)期血糖變化實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,細(xì)胞周質(zhì)表達(dá)的h-FGF21(ph-FGF21)與胞內(nèi)表達(dá)的FGF21(ih-FGF21)的生物學(xué)活性在統(tǒng)計(jì)學(xué)上無顯著差異。
【作者單位】： 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;河南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子- 信號(hào)肽 周質(zhì)空間表達(dá) 糖尿病
【基金】：黑龍江省應(yīng)用技術(shù)研究與開發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目資助(GC13C104)
【分類號(hào)】：R96
【正文快照】： 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子21(FGF21)是FGF家族中FGF19亞家族成員之一,主要表達(dá)在肝臟中,其主要作用靶器官有肝臟、脂肪和胰腺等[1],FGF21可以不依賴于胰島素信號(hào)通路安全有效調(diào)節(jié)血糖[2],不會(huì)產(chǎn)生低血糖、水腫和過敏等不良反應(yīng)[3]。除此之外,大量動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明,FGF21可以有效改善胰島

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本文編號(hào)：445022