抗生素的濫用導(dǎo)致的耐藥菌出現(xiàn)并以驚人的速度增長已經(jīng)成為威脅人類健康的嚴(yán)重公共衛(wèi)生問題。抗菌肽作為先天性免疫系統(tǒng)的重要組成部分,其非特異性的膜破壞作用能夠有效對抗包括多藥耐藥菌在內(nèi)的多種病原菌引起的感染,并且不容易誘導(dǎo)細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性,是一種具有極大發(fā)展?jié)摿Φ男滦涂咕鷦�。Anoplin（GLLKRIKTLL-NH₂）是從黃蜂毒液中分離得到的兩親性?-螺旋抗菌肽,具有廣譜抗菌活性和極低的溶血活性,但是它的酶解穩(wěn)定性差,抗菌作用強度不夠理想。本研究為了改善Anoplin的局限性,首先采用N-甲基化氨基酸對Anoplin中敏感酶切位點的氨基酸（Leu,Ile,Lys和Arg）進行替換,設(shè)計合成了14條含N-甲基化氨基酸替換的Anoplin類似物。酶解穩(wěn)定性研究結(jié)果顯示,N-甲基化氨基酸替換后類似物的穩(wěn)定性得到顯著改善,其中,與母肽Anoplin相比,類似物M4.7抵抗胰蛋白酶和糜蛋白酶降解的能力提高了10～6和10～5倍,類似物M5.7耐受胰蛋白酶和糜蛋白酶降解的能力也分別提高了10～6和10～4倍,同時,類似物M3.6對這兩種蛋白酶的穩(wěn)定性均提高了10～5倍。但是,抗菌活性...

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【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
第一章 綜述
    1.1 引言
    1.2 抗菌肽簡介
        1.2.1 抗菌肽的來源多樣性
        1.2.2 抗菌肽的生物活性多樣性
        1.2.3 抗菌肽的結(jié)構(gòu)多樣性
        1.2.4 抗菌肽的結(jié)構(gòu)特點
        1.2.5 抗菌肽的作用機制研究
        1.2.6 抗菌肽的發(fā)展與應(yīng)用
    1.3 抗菌肽修飾改造策略研究
        1.3.1 提高抗菌肽抗菌活性的修飾策略
        1.3.2 提高抗菌肽穩(wěn)定性的修飾策略
        1.3.3 降低抗菌肽毒性的修飾策略
    1.4 天然抗菌肽Anoplin的研究背景
第二章 實驗部分
    2.1 設(shè)計思路
    2.2 實驗材料和儀器
        2.2.1 實驗試劑
        2.2.2 實驗儀器
        2.2.3 實驗菌株
    2.3 實驗方法
        2.3.1 溶劑預(yù)處理
        2.3.2 Anoplin及其類似物的多肽固相合成
        2.3.3 最低抑菌濃度
        2.3.4 二級結(jié)構(gòu)研究
        2.3.5 酶解穩(wěn)定性試驗
        2.3.6 RP-HPLC降解率-時間分析
        2.3.7 溶血活性試驗
        2.3.8 細(xì)胞毒性試驗
        2.3.9 不同培養(yǎng)條件下抗菌活性的測定
        2.3.10 聯(lián)合用藥
        2.3.11 抗生物膜試驗
        2.3.12 殺菌動力學(xué)試驗
        2.3.13 作用機制研究
        2.3.14 誘導(dǎo)耐藥試驗
        2.3.15 統(tǒng)計學(xué)分析
第三章 實驗結(jié)果
    3.1 N-甲基化氨基酸替換對天然抗菌肽Anoplin抗菌活性、穩(wěn)定性和二級結(jié)構(gòu)的影響
        3.1.1 Anoplin及其N-甲基化氨基酸替換類似物的多肽固相合成
        3.1.2 最低抑菌濃度
        3.1.3 酶解穩(wěn)定性
        3.1.4 二級結(jié)構(gòu)研究
    3.2 含N-甲基化氨基酸及N端脂肪酸修飾的新型Anoplin類似物的設(shè)計、合成及活性研究
        3.2.1 含N-甲基化氨基酸及N端脂肪酸修飾的新型Anoplin類似物的多肽固相合成
        3.2.2 最低抑菌濃度
        3.2.3 不同培養(yǎng)條件下的抗菌活性
        3.2.4 二級結(jié)構(gòu)研究
        3.2.5 溶血活性
        3.2.6 酶解穩(wěn)定性
        3.2.7 RP-HPLC降解率-時間分析
        3.2.8 細(xì)胞毒性
        3.2.9 聯(lián)合用藥
        3.2.10 抗生物膜活性
        3.2.11 殺菌動力學(xué)
        3.2.12 作用機制研究
        3.2.13 誘導(dǎo)耐藥
第四章 討論與總結(jié)
    4.1 N-甲基化氨基酸替換對天然抗菌肽Anoplin抗菌活性、穩(wěn)定性和二級結(jié)構(gòu)的影響
    4.2 含N-甲基化氨基酸及N端脂肪酸修飾的新型Anoplin類似物的設(shè)計、合成及活性研究
研究工作小結(jié)
參考文獻
縮略詞中英文對照表
在學(xué)期間的研究成果
致謝
附錄



本文編號：4036652