目的:丙戊酸（Valproic acid,VPA）為一線廣譜抗癲癇藥物（AED）,可單獨(dú)使用或聯(lián)合其他AEDs治療各種類型的癲癇。近年來(lái)因其抑制組蛋白去乙�；福℉DACs）活性而成為腫瘤治療的輔助藥物。鑒于VPA臨床應(yīng)用的廣泛性,其嚴(yán)重不良反應(yīng)肝毒性引起了臨床醫(yī)生的普遍關(guān)注。目前普遍認(rèn)為VPA及其活性代謝產(chǎn)物通過(guò)抑制線粒體β氧化功能酶、消耗肉堿和輔酶A、引起氧化應(yīng)激反應(yīng)和高氨血癥等途徑導(dǎo)致肝臟毒性,然而VPA肝毒性機(jī)制仍然存在爭(zhēng)議。代謝組學(xué)致力于研究生物體對(duì)藥物干預(yù)、疾病、環(huán)境以及遺傳修飾等因素影響的最終應(yīng)答,為藥物性肝損傷機(jī)制的探究以及生物標(biāo)志物的篩選提供了新思路。本課題擬利用非靶向代謝組學(xué)技術(shù)檢測(cè)VPA致肝功能異常癲癇患兒血清中代謝圖譜的變化,篩選差異性代謝物,探尋差異性代謝通路,并在動(dòng)物和細(xì)胞中進(jìn)行相關(guān)機(jī)制研究。研究方法:1、VPA致肝功能異常癲癇患兒血清樣本的收集:收集于中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院就診的癲癇兒童（年齡≤16周歲）血清樣本及病歷信息,并根據(jù)肝功能指標(biāo)將患兒分為肝功能正常（NLF）組和肝功能異常（ABLF）組;2、VPA致肝功能異常癲癇患兒血清中差異性代謝物和代謝通路...

【文章頁(yè)數(shù)】：92 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖1.1不同模式下代表性總離子流色譜圖

本研究采用HPLC-QTOF/MS技術(shù)平臺(tái)對(duì)23例癲癇患兒血清樣品在不同模式下進(jìn)行代謝組學(xué)分析,圖1.1是選取代表性樣本的總離子流色譜(TIC)圖。為了保證數(shù)據(jù)采集的穩(wěn)定性與可靠性,在血清樣本前處理后得到的所有樣品中取出等體積少部分樣品制備質(zhì)控樣品。在實(shí)際檢測(cè)過(guò)程中,每4個(gè)檢測(cè)樣....

圖1.2基于高分辨MS/MS代謝組學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)VPA致肝功能異常癲癇患兒血清中代謝組學(xué)數(shù)據(jù)進(jìn)行PCA-DA分析

為了保證數(shù)據(jù)采集的穩(wěn)定性與可靠性,在血清樣本前處理后得到的所有樣品中取出等體積少部分樣品制備質(zhì)控樣品。在實(shí)際檢測(cè)過(guò)程中,每4個(gè)檢測(cè)樣品中穿插1個(gè)質(zhì)控樣品。在TIC圖的前中后分別選取3個(gè)離子進(jìn)行提取,分析質(zhì)控樣品中這3個(gè)離子的保留時(shí)間和峰面積變異。通過(guò)主成分判別(PCA-DA)分析....

圖1.3基于XCMS軟件對(duì)VPA致肝功能異常癲癇患兒血清代謝組學(xué)數(shù)據(jù)進(jìn)行PCA分析

在基于高分辨MS/MS代謝組學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)的數(shù)據(jù)分析中,PCA-DA模型(圖1.2)顯示,在不同的色譜系統(tǒng)和離子化模式下,ABLF和NLF兩組患兒血清樣品均明顯區(qū)分。通過(guò)單變量和多元變量統(tǒng)計(jì)分析,最終得到25種差異性代謝物,包括氨基酸、糖類、膽汁酸和脂肪酸等,其相應(yīng)P值、變化倍數(shù)和VI....

圖1.4 VPA致肝功能異常癲癇患兒血清中差異性代謝通路

為了進(jìn)一步探索VPA致肝功能異常代謝模式的改變,本研究分別對(duì)基于高分辨MS/MS代謝組學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)分析得到的25種差異性代謝物和基于XCMS數(shù)據(jù)庫(kù)分析得到的差異性代謝物進(jìn)行代謝通路富集與分析,兩種方法相互驗(yàn)證、相互補(bǔ)充。其中,基于XCMS軟件分析所得到的差異性代謝通路如圖1.4。結(jié)合....

本文編號(hào)：4028147