目的:丙戊酸（Valproic acid,VPA）為一線廣譜抗癲癇藥物（AED）,可單獨使用或聯(lián)合其他AEDs治療各種類型的癲癇。近年來因其抑制組蛋白去乙�；福℉DACs）活性而成為腫瘤治療的輔助藥物。鑒于VPA臨床應用的廣泛性,其嚴重不良反應肝毒性引起了臨床醫(yī)生的普遍關(guān)注。目前普遍認為VPA及其活性代謝產(chǎn)物通過抑制線粒體β氧化功能酶、消耗肉堿和輔酶A、引起氧化應激反應和高氨血癥等途徑導致肝臟毒性,然而VPA肝毒性機制仍然存在爭議。代謝組學致力于研究生物體對藥物干預、疾病、環(huán)境以及遺傳修飾等因素影響的最終應答,為藥物性肝損傷機制的探究以及生物標志物的篩選提供了新思路。本課題擬利用非靶向代謝組學技術(shù)檢測VPA致肝功能異常癲癇患兒血清中代謝圖譜的變化,篩選差異性代謝物,探尋差異性代謝通路,并在動物和細胞中進行相關(guān)機制研究。研究方法:1、VPA致肝功能異常癲癇患兒血清樣本的收集:收集于中國醫(yī)科大學附屬盛京醫(yī)院就診的癲癇兒童（年齡≤16周歲）血清樣本及病歷信息,并根據(jù)肝功能指標將患兒分為肝功能正常（NLF）組和肝功能異常（ABLF）組;2、VPA致肝功能異常癲癇患兒血清中差異性代謝物和代謝通路...

【文章頁數(shù)】：92 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖1.1不同模式下代表性總離子流色譜圖

本研究采用HPLC-QTOF/MS技術(shù)平臺對23例癲癇患兒血清樣品在不同模式下進行代謝組學分析,圖1.1是選取代表性樣本的總離子流色譜(TIC)圖。為了保證數(shù)據(jù)采集的穩(wěn)定性與可靠性,在血清樣本前處理后得到的所有樣品中取出等體積少部分樣品制備質(zhì)控樣品。在實際檢測過程中,每4個檢測樣....

圖1.2基于高分辨MS/MS代謝組學數(shù)據(jù)庫對VPA致肝功能異常癲癇患兒血清中代謝組學數(shù)據(jù)進行PCA-DA分析

為了保證數(shù)據(jù)采集的穩(wěn)定性與可靠性,在血清樣本前處理后得到的所有樣品中取出等體積少部分樣品制備質(zhì)控樣品。在實際檢測過程中,每4個檢測樣品中穿插1個質(zhì)控樣品。在TIC圖的前中后分別選取3個離子進行提取,分析質(zhì)控樣品中這3個離子的保留時間和峰面積變異。通過主成分判別(PCA-DA)分析....

圖1.3基于XCMS軟件對VPA致肝功能異常癲癇患兒血清代謝組學數(shù)據(jù)進行PCA分析

在基于高分辨MS/MS代謝組學數(shù)據(jù)庫的數(shù)據(jù)分析中,PCA-DA模型(圖1.2)顯示,在不同的色譜系統(tǒng)和離子化模式下,ABLF和NLF兩組患兒血清樣品均明顯區(qū)分。通過單變量和多元變量統(tǒng)計分析,最終得到25種差異性代謝物,包括氨基酸、糖類、膽汁酸和脂肪酸等,其相應P值、變化倍數(shù)和VI....

圖1.4 VPA致肝功能異常癲癇患兒血清中差異性代謝通路

為了進一步探索VPA致肝功能異常代謝模式的改變,本研究分別對基于高分辨MS/MS代謝組學數(shù)據(jù)庫分析得到的25種差異性代謝物和基于XCMS數(shù)據(jù)庫分析得到的差異性代謝物進行代謝通路富集與分析,兩種方法相互驗證、相互補充。其中,基于XCMS軟件分析所得到的差異性代謝通路如圖1.4。結(jié)合....

本文編號：4028147