應(yīng)用改良慶大霉素保護(hù)試驗檢測腸炎沙門氏菌侵襲力表型
發(fā)布時間:2024-11-03 01:03
腸炎血清型沙門氏菌(Salmonella enterica serovar Enteritidis,SE)是引起腸炎和全身感染重要的沙門氏菌血清型之一,了解沙門氏菌侵襲力表型對闡明其感染致病機(jī)制至關(guān)重要。傳統(tǒng)慶大霉素保護(hù)試驗(GPA)存在通量低、重復(fù)性差等缺點。文中利用96孔細(xì)胞培養(yǎng)和多孔道移液的高通量優(yōu)勢,結(jié)合菌落分區(qū)微量滴板計數(shù)法改良了傳統(tǒng)GPA試驗方案。應(yīng)用改良的GPA方法檢測了16株SE菌株對非吞噬細(xì)胞(HT-29)的入侵表型和43株SE菌株對吞噬細(xì)胞(RAW264.7)的胞內(nèi)復(fù)制表型。通過比較分析SE強(qiáng)、弱菌株JL228和LN248對吞噬細(xì)胞(RAW264.7)的侵襲力表型發(fā)現(xiàn),改良的GPA得出的數(shù)據(jù)組內(nèi)和組間變異系數(shù)低、數(shù)據(jù)重復(fù)性強(qiáng),胞內(nèi)復(fù)制表型也與顯微觀察結(jié)果相符。通過實踐應(yīng)用發(fā)現(xiàn),改良的GPA方法具有通量高、重復(fù)性強(qiáng)、結(jié)果可靠兼具省時、省力等優(yōu)點,可作為沙門氏菌菌株侵襲力表型檢測的更新方案,為進(jìn)一步闡明其致病機(jī)制提供了更科學(xué)有效的方法。
【文章頁數(shù)】:8 頁
【部分圖文】:
本文編號:4010436
【文章頁數(shù)】:8 頁
【部分圖文】:
沙門氏菌的巨噬細(xì)胞侵襲力決定其全身性感染的能力。應(yīng)用傳統(tǒng)和改良的GPA分別檢測了小鼠高致病性SE菌株JL228和低致病性菌株LN248的巨噬細(xì)胞侵襲能力。結(jié)果發(fā)現(xiàn),兩種方法得出類似結(jié)果,在“結(jié)合”表型檢測中,LN248菌落數(shù)顯著高于JL228(P<0.001),而在“入侵”和“....
圖1傳統(tǒng)與改良GAP方法檢測JL228與LN248感染RAW264.7細(xì)胞侵襲表型2.2巨噬細(xì)胞內(nèi)復(fù)制表型驗證
應(yīng)用改良GPA試驗方案檢測了43株SE分離菌株對RAW264.7細(xì)胞的入侵和胞內(nèi)復(fù)制表型,此外,對16株SE分離株的上皮細(xì)胞HT-29入侵表型進(jìn)行了檢測。在實踐操作方面,改良的檢測方法在單塊96孔細(xì)胞培養(yǎng)板上最多可同時檢測32株菌株的體外侵襲表型,是傳統(tǒng)方法(24孔板)的4倍,....
圖3JL228與LN248感染RAW264.7細(xì)胞復(fù)制表型的GPA滴板結(jié)果與共聚焦顯微觀察3討論
本文編號:4010436
本文鏈接:http://sikaile.net/yixuelunwen/yiyaoxuelunwen/4010436.html
最近更新
教材專著