目的:(1)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎是一種常見的自身免疫性疾病。致殘率高且預(yù)后差,對病人的身體造成很大影響,因此早期的診斷極為重要。近年來,抗環(huán)狀瓜氨酸肽抗體被公認(rèn)為診斷類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎新的血清指標(biāo)物,目前臨床上對這一指標(biāo)物的檢測采用化學(xué)發(fā)光法,此法受儀器干擾較大且檢測耗時(shí)長,更重要的是檢測試劑主要依賴進(jìn)口,使患者和社會(huì)醫(yī)療成本增高,因此擁有我國自主研發(fā)的試劑具有很重要的意義。膠乳增強(qiáng)免疫比濁法具有靈敏度高、特異性高、線性范圍寬,且能在普通生化分析儀上檢測等優(yōu)點(diǎn),本課題根據(jù)膠乳增強(qiáng)免疫比濁法的原理,制備抗環(huán)瓜氨酸肽抗體免疫診斷試劑。(2)載脂蛋白E是血脂的檢測指標(biāo)物之一,想要獲取純的載脂蛋白E,必須有純合子的供血者,而且無法得到結(jié)構(gòu)和功能研究所需的人類非自然存在的突變體,所以重組載脂蛋白E非常必要,目前市場上已有的試劑所用載脂蛋白E抗原標(biāo)準(zhǔn)品主要依賴進(jìn)口,獲取難度大,本課題通過大腸桿菌發(fā)酵進(jìn)行載脂蛋白E的表達(dá),使用鎳離子親和層析法進(jìn)行純化,得到較純的載脂蛋白E,并將其作為載脂蛋白E檢測試劑的標(biāo)準(zhǔn)品。方法:(1)乳液聚合法制備羧化聚苯乙烯微球作為載體,偶聯(lián)環(huán)狀瓜氨酸肽(cyclic citrulli...

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.2是PS羧基微球與BSA-CCP整體偶聯(lián)的原理圖

津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文一、羧基PS微球與瓜氨酸環(huán)肽偶聯(lián)方法的研究先加標(biāo)本和R1，37oC下溫育5分鐘，讀取吸光度A1，加R2后，在37oC反應(yīng)5分鐘，讀取吸光度A2，在600nm下連續(xù)測試5min，并記錄5min內(nèi)吸光度變化，計(jì)算差值△A=A....

圖1.3是PS羧基微球與BSA及CCP層層偶聯(lián)的原理圖

取固化量為5%154.6nmPS微球100μL三份，羧基活化方法同上（1.1.3），入做好的偶聯(lián)物BSA-CCP過量，分別加0.01%、0.05%和0.1%Tween20，室反應(yīng)3h，然后離心三次，測定偶聯(lián)前后粒徑的變化判斷是否偶聯(lián)成功，用pH.4Tr....

圖1.5BSA巰基化程度與Traut's用量的關(guān)系(*p<0.1)

圖1.5BSA巰基化程度與Traut's用量的關(guān)系(*p<0.1).2Linker與CCP的偶聯(lián)通過脫鹽柱計(jì)算產(chǎn)率CCP的分子量為2341Da，而Linker與CCP偶聯(lián)后分子量＞2341Da袋已經(jīng)透析除去了Linker，如圖1.6所示，第一....

圖1.7SDS-PAGE凝膠電泳圖

17圖1.7SDS-PAGE凝膠電泳圖的Tween20對整體偶聯(lián)法制PS-CCP的影響.05%和0.1%三種濃度Tween20進(jìn)行偶聯(lián)實(shí)驗(yàn)表1.7所示，不加Tween20和加有0.01%的20濃度太低不足以起到靜電屏蔽作用，而通過其偶聯(lián)前后粒徑變化....

本文編號：3973799