腦膠質(zhì)瘤是常見(jiàn)的原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤,發(fā)病率高、致死率高。手術(shù)、放療和化學(xué)療法等對(duì)于腦膠質(zhì)瘤患者的存活率方面并未取得重大改善,針對(duì)惡性腦膠質(zhì)瘤需要開(kāi)發(fā)新的治療方法。近年來(lái),基因組編輯通過(guò)編輯DNA序列或調(diào)節(jié)基因表達(dá),為腫瘤治療提供了新的解決方案。CRISPR(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats)是迄今為止最簡(jiǎn)單精確的基因組編輯機(jī)制之一。簇狀規(guī)則的短回文重復(fù)序列CRISPR/Cas9可以從基因組中徹底刪除一個(gè)基因,從而達(dá)到治療疾病的效果。Cas9/sg RNA核糖核蛋白(Cas9-RNP)由Cas9蛋白和向?qū)NA(sg RNA)結(jié)合構(gòu)成,Cas9-RNP復(fù)合物體內(nèi)穩(wěn)定性差、難以穿過(guò)血腦屏障(BBB)、不具有腫瘤靶向性等先天缺陷,制約其有效地應(yīng)用于惡性腦膠質(zhì)瘤的治療。開(kāi)發(fā)及設(shè)計(jì)Cas9-RNP腦靶向遞送體系,安全、有效地遞送到病灶并應(yīng)用于體內(nèi)治療,對(duì)治療惡性腦膠質(zhì)瘤、改善病患預(yù)后生存具有指導(dǎo)意義。本論文中,我們合成一種Angiopep-2多肽修飾的含有胍基和氟基團(tuán)的高分子聚合物,其能夠通過(guò)胍基與Cas9-R...

【文章頁(yè)數(shù)】：78 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1-1CRISPR/Cas9介導(dǎo)的基因組編輯機(jī)制示意圖[31]

1.緒論3圖1-1CRISPR/Cas9介導(dǎo)的基因組編輯機(jī)制示意圖[31]1.3CRISPR/Cas9系統(tǒng)的特征1.3.1基于質(zhì)粒的CRISPR/Cas9以質(zhì)粒的形式作為基因編輯的材料，主要來(lái)自由張鋒組報(bào)道的二合一質(zhì)粒（pX330）[26]。該質(zhì)粒具有兩個(gè)表達(dá)區(qū)域：使用U6啟動(dòng)子....

圖1-2pX330的結(jié)構(gòu)和功能[26]

腦靶向Cas9-RNP納米藥物的制備及腦膠質(zhì)瘤治療4圖1-2pX330的結(jié)構(gòu)和功能[26]1.3.2基于RNA的CRISPR/Cas9CRISPR/Cas9mRNA是一種具有單鏈結(jié)構(gòu)的線(xiàn)性RNA，不含polyA尾巴的長(zhǎng)度約為4,300nt。分子量約為1.38×103kDa。它包含....

圖1-3有機(jī)高分子用于pCas9遞送，體內(nèi)抑制腫瘤生長(zhǎng)的示意圖[70]

腦靶向Cas9-RNP納米藥物的制備及腦膠質(zhì)瘤治療61.4.2有機(jī)高分子遞送載體有機(jī)高分子作為載體，在CRISPR/Cas9基因編輯遞送方面，已經(jīng)有大量工作進(jìn)行報(bào)道[65-68]。用于遞送的常見(jiàn)載體有聚乙烯亞胺（PEI）、聚丙烯酰胺（PAM）、聚（L-賴(lài)氨酸）（PLL）等。使用P....

圖1-4Lipofectamine用于Cas-RNP的遞送，利用Lipofectamine2000或RNAiMAX用于超負(fù)電荷的Cas9-GFP或Cas-RNP遞送[73]

1.緒論7有文獻(xiàn)報(bào)道，利用脂質(zhì)體納米粒子可將CRISPR/Cas9遞送至慢性髓樣白血病細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、B細(xì)胞和巨噬細(xì)胞中，以進(jìn)行體內(nèi)基因編輯[72]。近年來(lái)，已經(jīng)有多種脂質(zhì)體納米粒子作為載體用于CRISPR/Cas9遞送。目前，已研發(fā)出具有商業(yè)化的陽(yáng)離子脂質(zhì)體Lipofecta....

本文編號(hào)：3947082