SMUG1(Single-strand-selective monofunctional uracil DNA glycosylase 1)是單鏈選擇性單功能尿嘧啶DNA糖基化酶1,能夠引發(fā)堿基切除修復(Base Excision Repair,BER)途徑,切除摻入到DNA中的尿嘧啶、5-羥甲基尿嘧啶(5-hydroxymethyluracil,5-hmU)和5-氟尿嘧啶(5-fluoropyrimidines,5-FU)。5-FU是一種抗代謝藥物,被廣泛使用于腫瘤的化學治療。在第一部分的實驗研究中,我們首先利用免疫熒光染色法檢測了SMUG1在卵母細胞和早期胚胎中的定位。接著通過SMUG1-Morpholino特異性地敲低了SMUG1,并探討了其在卵母細胞成熟和早期胚胎發(fā)育過程中所起的作用。最后檢測了SMUG1對合子DNA去甲基化進程的影響。結果表明,SMUG1在卵母細胞和早期胚胎的各階段均有表達,且主要定位在細胞核中。SMUG1的敲低不會對卵母細胞的成熟進程產(chǎn)生影響,但會顯著抑制早期胚胎的發(fā)育。此外,在1-細胞胚胎中敲低SMUG1不會影響DNA去甲基化進程。在第二部分的實驗研究中,...

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【學位級別】：碩士

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圖1.1SMUG1的結構示意圖

3圖1.1SMUG1的結構示意圖[8]G1的二級結構圖像，彩虹顏色從藍色到紅色表示從N端到C端。圖（B）螺旋，綠色表示β折疊，黃色表示卷曲。（C）一對立體的SMUG1，顯示）顯示了分子表面的縫隙和凹陷嘧啶結合處。Figure1.1SMUG1Struc....

圖1.2卵母細胞向胚胎轉化過程中的DNA甲基化動態(tài)[12]

受精不久后，父本基因組迅速發(fā)生去甲基化，在原核晚期，雄原核中5-hmC遠高于5-mC（如圖1.2）[14,15]。圖1.2卵母細胞向胚胎轉化過程中的DNA甲基化動態(tài)[12]父本和母本的基因組在受精后經(jīng)歷了復雜的、不同的DNA去甲基化進程。在合子S期前，TET酶會介導去除雄原核....

圖1.3DNA去甲基化途徑[24]

圖1.3DNA去甲基化途徑[24]5-mC去甲基化背后最合理的機制涉及到TET蛋白，其參與了5-mC到5-hmC的氧化；后者進一步成為5-fC和5-caC。然后，激活DNA糖基化酶TDG的堿基切除修復途徑以修復上述堿基修飾（5-fCC）并用胞嘧啶取代....

圖1.4DNA去甲基化過程中RNA和蛋白質(zhì)表達熱圖

圖1.4DNA去甲基化過程中RNA和蛋白質(zhì)表達熱圖[25]小鼠早期胚胎從合子到囊胚的發(fā)育過程中，SMUG1的RNA和蛋白質(zhì)均表現(xiàn)出了逐漸下降的趨勢。Figure1.4RNAandproteinexpressionprofilesrepresentedasheat....

本文編號：3920286