背景:蛋白水解靶向嵌合體(Proteolysis Targeting Chimera,PROTAC),利用雙功能嵌合體分子同時(shí)結(jié)合靶蛋白和E3連接酶,使靶蛋白被泛素化標(biāo)記,從而進(jìn)入蛋白酶體途徑被降解。PROTAC嵌合體分子由三部分組成:結(jié)合靶蛋白的配體、結(jié)合E3泛素連接酶的配體、以及兩者之間的連接鏈(linker)。本文分別以CDK4/6和EGFR為靶點(diǎn)合成了一系列化合物,希望從中篩選出能有效降解靶蛋白的PROTAC嵌合體分子,為腫瘤靶向治療提供候選化合物。方法:以乳腺癌靶向治療藥物CDK4/6高選擇性抑制劑Palbociclib為彈頭的PROTAC嵌合體分子ZM7、ZM8、ZM9分別以梯度稀釋濃度處理乳腺癌細(xì)胞或急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞72h,CCK8試劑檢測(cè)細(xì)胞活率;以Western Blot法檢測(cè)不同給藥時(shí)間和濃度條件下ZM7、ZM8、ZM9對(duì)靶蛋白CDK4和CDK6的降解作用以及CDK4/6所在信號(hào)通路中cyclin D、Rb、phospho-Rb蛋白的表達(dá)情況。以已上市藥物EGFR酪氨酸激酶抑制劑(TKI)Gefitinib為彈頭的PROTAC嵌合體分子ZM3、ZM4、ZM5、...

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1PROTAC嵌合體分子對(duì)乳腺癌細(xì)胞株的增殖抑制作用

PROTAC嵌合體分子ZM7、ZM8、ZM9分別以0.25、0.74、2.22、6.67、20μmol/L處理細(xì)胞72h，CCK8檢測(cè)PROTAC嵌合體分子對(duì)這些細(xì)胞活率的影響，并計(jì)算其IC50值（表3）。結(jié)果表明，除了SK-BR-3細(xì)胞，Palboci....

圖2PROTAC嵌合體分子不同給藥濃度對(duì)CDK4和CDK6蛋白的降解作用

1.4PROTAC嵌合體分子對(duì)乳腺癌細(xì)胞中CDK4/6蛋白的降解作用1.4.1PROTAC嵌合體分子不同給藥濃度對(duì)乳腺癌細(xì)胞中CDK4/6蛋白的降解作用Palbociclib是CDK4/6高選擇性抑制劑，在臨床上主要是用于ER陽性、HER2陰性的轉(zhuǎn)移性乳腺癌....

圖3PROTAC嵌合體分子不同給藥時(shí)間對(duì)CDK4和CDK6蛋白的降解作用1.5構(gòu)效關(guān)系分析

圖3PROTAC嵌合體分子不同給藥時(shí)間對(duì)CDK4和CDK6蛋白的降解作用1.5構(gòu)效關(guān)系分析這一系列的PROTAC嵌合體分子以乳腺癌靶向治療藥物CDK4/6高選擇性抑制劑Palbociclib為彈頭，以來那度胺為E3連接酶配體，以不同數(shù)量單元的linker....

圖4PROTAC嵌合體分子對(duì)HAL-01細(xì)胞的增殖抑制作用

4PROTAC嵌合體分子對(duì)HAL-01細(xì)胞的增殖抑制作嵌合體分子對(duì)HAL-01細(xì)胞中CDK4/6蛋白的降C嵌合體分子不同給藥濃度對(duì)HAL-01細(xì)胞中Cot結(jié)果表明，從量效關(guān)系來看，PROTAC嵌合體分子分4h后，ZM8、ZM9對(duì)CDK4有降解作....

本文編號(hào)：3898964