發(fā)布時(shí)間：2023-11-05 09:08

　　蛋白降解靶向嵌合體(Proteolytic targeting chimera,PROTAC)是一種新興誘導(dǎo)蛋白降解技術(shù),已在抗腫瘤藥物研究領(lǐng)域中得到廣泛應(yīng)用。越來越多用來靶向降解致病蛋白的PROTAC分子被研究設(shè)計(jì)出來,因其具有高選擇性、低毒性等優(yōu)點(diǎn),被當(dāng)作潛在的抗腫瘤藥物用以治療相關(guān)疾病。前列腺癌在去勢治療后,使得部分癌細(xì)胞獲得依賴低濃度雄激素生長和抵抗凋亡的能力,最終往往會發(fā)展成為去勢抵抗性前列腺癌(castration-resistant prostate cancer,CRPC)。在轉(zhuǎn)化過程中多種分子機(jī)制導(dǎo)致雄激素受體(androgen receptor,AR)信號通路的再激活,促進(jìn)了CRPC進(jìn)展。臨床上廣泛使用小分子抑制劑藥物治療CRPC,但隨著AR自身變異等原因,致使AR信號通路再激活呈現(xiàn)多樣化,癌細(xì)胞對藥物逐漸產(chǎn)生耐藥性。PROTAC技術(shù)運(yùn)用到前列腺癌治療可以直接降解AR蛋白,而不是抑制AR蛋白,為解決耐藥性和脫靶毒性等問題提供了新的策略。由此,本文設(shè)計(jì)并合成了用以誘導(dǎo)降解AR蛋白的PROTAC雙功能分子,并對其生物活性進(jìn)行了考察。本文將可以與CRBN系統(tǒng)E3泛素連接酶...

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 前列腺癌
    1.2 前列腺癌的治療方法
        1.2.1 外科手術(shù)
        1.2.2 放射治療
        1.2.3 冷凍治療
        1.2.4 內(nèi)分泌治療
        1.2.5 化學(xué)藥物治療
        1.2.6 免疫治療
    1.3 雄激素受體(AR)與去勢抵抗性前列腺癌(CRPC)
        1.3.1 AR的結(jié)構(gòu)與功能
        1.3.2 AR的變異與CRPC的形成
    1.4 蛋白降解靶向嵌合體(PROTAC)技術(shù)概述
        1.4.1 泛素-蛋白酶體系統(tǒng)
        1.4.2 PROTAC技術(shù)基本介紹
        1.4.3 以AR為靶蛋白的PROTAC研究
    1.5 課題立題依據(jù)與意義
    1.6 課題主要研究內(nèi)容
第二章 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.3 細(xì)胞株及其培養(yǎng)基配制
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 化學(xué)設(shè)計(jì)
        2.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.3 CCK-8法檢測細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)
        2.2.4 蛋白免疫印跡法檢測目標(biāo)蛋白含量
        2.2.5 蛋白酶體抑制劑競爭實(shí)驗(yàn)
        2.2.6 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)
        2.2.7 細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)
        2.2.8 細(xì)胞凋亡相關(guān)染色實(shí)驗(yàn)
第三章 結(jié)果與討論
    3.1 化學(xué)合成
        3.1.1 化學(xué)合成路線
        3.1.2 化學(xué)合成結(jié)果與表征
    3.2 PAP508能有效抑制LNCaP細(xì)胞與VCaP細(xì)胞的增殖
    3.3 PAP508對AR蛋白具有顯著降解效果
    3.4 PAP508誘導(dǎo)的蛋白降解依賴于蛋白酶體
    3.5 PAP508對腫瘤細(xì)胞遷移與侵襲影響
        3.5.1 PAP508有效抑制LNCaP細(xì)胞的遷移
        3.5.2 PAP508有效抑制LNCaP細(xì)胞與VCaP細(xì)胞的侵襲
    3.6 PAP508對細(xì)胞凋亡的影響
        3.6.1 PAP508誘導(dǎo)LNCaP細(xì)胞發(fā)生凋亡
        3.6.2 PAP508對相關(guān)凋亡蛋白影響
主要結(jié)論與展望
    主要結(jié)論
    展望
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄1:產(chǎn)物質(zhì)譜核磁圖
附錄2:作者在攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文



本文編號：3860732