目的本研究旨在探討右美托咪定通過miR-142-3p作用于晝夜節(jié)律基因(ARNTL)調(diào)節(jié)神經(jīng)元增殖及凋亡的影響。方法將一半大鼠海馬元代神經(jīng)元細(xì)胞分為對照組(未進(jìn)行任何處理)和實驗組(50μmol·L^-1右美托咪定),對照組予以等體積的培養(yǎng)基液。其次,再將另一半細(xì)胞大鼠海馬元代神經(jīng)元細(xì)胞分為空白組(未進(jìn)行任何處理)、過表達(dá)組(轉(zhuǎn)染miR-142-3p模擬物)、抑制表達(dá)組(轉(zhuǎn)染miR-142-3p抑制劑;通過實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)和蛋白質(zhì)印記法檢測miR-142-3p及ARNTL表達(dá);通過四甲基偶氮唑鹽微量酶反應(yīng)比色法(MTT)檢測細(xì)胞增殖;通過流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡。通過雙熒光素酶報告基因?qū)嶒烌炞CARNTL與miR-142-3p的靶向關(guān)系。結(jié)果給藥48 h后,實驗組和對照組的海馬神經(jīng)元細(xì)胞增殖率分別為(1.65±0.08)%和(1.03±0.06)%;細(xì)胞凋亡率分別為(3.94±0.15)%和(9.65±0.13)%;miR-142-3p相對表達(dá)量分別為1.66±0.14和1.05±0.12;ARNTL基因相對表達(dá)量分別為0.85±0.06和0.96±0.19,差...

【文章頁數(shù)】：4 頁

【文章目錄】：
材料與方法
    1 材料
    2 實驗方法
        2.1 細(xì)胞培養(yǎng)、分組及給藥方法
        2.2 以四甲基偶氮唑鹽微量酶反應(yīng)比色法(MTT)檢測海馬神經(jīng)元細(xì)胞增殖能力
        2.3 以流式細(xì)胞術(shù)檢測海馬神經(jīng)元細(xì)胞凋亡率
        2.4 以逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(qRT-PCR) 法檢測海馬神經(jīng)元細(xì)胞miR-142-3p及ARNTL基因表達(dá)
        2.5 用蛋白質(zhì)印跡(Western Blotting)法檢測海馬神經(jīng)元細(xì)胞ARNTL蛋白表達(dá)
        2.6 用雙熒光素酶報告基因?qū)嶒烌炞CARNTL與miR-142-3p的靶向關(guān)系
    3 統(tǒng)計學(xué)處理
結(jié) 果
    1 右美托咪定對海馬神經(jīng)元細(xì)胞活性及凋亡影響
    2 右美托咪定對海馬神經(jīng)元細(xì)胞miR-142-3p及ARNTL表達(dá)影響
    3 轉(zhuǎn)染miRNA對海馬神經(jīng)元細(xì)胞miR-142-3p、ARNTL、細(xì)胞增殖及凋亡表達(dá)影響
    4 ARNTL與miR-142-3p的靶向關(guān)系
討 論



本文編號：3853746