食品重金屬污染威脅著食品安全,鉛和鎘是食品中重金屬污染的主要成分。已有研究表明鉛和鎘的單獨(dú)暴露均會損傷發(fā)育期兒童的學(xué)習(xí)記憶,其損傷機(jī)制涉及多方面。鉛和鎘的聯(lián)合暴露導(dǎo)致的神經(jīng)毒性以及可能的表觀遺傳調(diào)控機(jī)制尚不清楚。研究鉛鎘聯(lián)合暴露的神經(jīng)毒性,有助于明確某些食品中鉛和鎘的安全限量標(biāo)準(zhǔn),具有重要的科學(xué)意義和應(yīng)用價值。本課題旨在探究鉛鎘聯(lián)合暴露導(dǎo)致的神經(jīng)毒性及其中可能表觀調(diào)控機(jī)制,主要包括下結(jié)果:1.鉛鎘單獨(dú)暴露和聯(lián)合暴露對PC12細(xì)胞存活率和突起生長的影響。實(shí)驗(yàn)采用醋酸鉛和氯化鎘,以濃度為2.5、5、10、20μM的鉛和0.1、0.2、0.4、0.8μM的鎘處理PC12細(xì)胞,并用MTT比色法檢測細(xì)胞存活率,Image J software統(tǒng)計(jì)細(xì)胞分支長度和數(shù)量。結(jié)果發(fā)現(xiàn),鉛和鎘單獨(dú)暴露均降低細(xì)胞存活率,且抑制了PC12細(xì)胞的突起生長,且對細(xì)胞存活率降低和突起生長的抑制作用呈劑量依賴性,鉛鎘聯(lián)合暴露加重了對細(xì)胞存活率的降低,并加重了對細(xì)胞突起生長的抑制。2.鉛鎘單獨(dú)暴露和聯(lián)合暴露對Sprague Dawley(SD)大鼠學(xué)習(xí)記憶和海馬CA1和DG區(qū)神經(jīng)元樹突棘密度的影響。SD大鼠從出生第一天開...

【文章頁數(shù)】：82 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
致謝
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 食品中鉛和鎘的污染現(xiàn)狀
        1.1.1 食品中鉛的污染現(xiàn)狀
        1.1.2 食品中鎘的污染現(xiàn)狀
    1.2 鉛和鎘的神經(jīng)毒性及可能機(jī)制
        1.2.1 鉛的神經(jīng)毒性
        1.2.2 鉛的神經(jīng)毒性的可能機(jī)制
        1.2.3 鎘的神經(jīng)毒性
        1.2.4 鎘的神經(jīng)毒性的可能機(jī)制
    1.3 表觀遺傳學(xué)
        1.3.1 表觀遺傳學(xué)涉及的機(jī)制
        1.3.2 表觀遺傳學(xué)的研究方法
    1.4 海馬與學(xué)習(xí)記憶
    1.5 樹突棘和學(xué)習(xí)記憶
        1.5.1 樹突棘與樹突
        1.5.2 樹突棘與突觸
        1.5.3 樹突棘與學(xué)習(xí)記憶
        1.5.4 樹突棘的調(diào)節(jié)機(jī)制
    1.6 課題研究的背景、意義和主要內(nèi)容
        1.6.1 課題研究的背景、意義
        1.6.2 課題研究的主要內(nèi)容
第二章 鉛鎘單獨(dú)暴露和聯(lián)合暴露對PC12細(xì)胞存活率和突起生長的影響
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 主要儀器
        2.1.2 主要試劑和藥品
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.2 細(xì)胞存活率檢測
        2.2.3 細(xì)胞突起檢測
    2.3 數(shù)據(jù)分析
    2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.4.1 鉛和鎘單獨(dú)暴露對PC12細(xì)胞存活率的影響
        2.4.2 鉛和鎘聯(lián)合暴露對PC12細(xì)胞存活率的影響
        2.4.3 鉛和鎘單獨(dú)暴露對PC12細(xì)胞突起生長的影響
        2.4.4 鉛和鎘聯(lián)合暴露對PC12細(xì)胞突起生長的影響
    2.5 討論與小結(jié)
        2.5.1 討論
        2.5.2 小結(jié)
第三章 鉛和鎘聯(lián)合暴露對SD大鼠學(xué)習(xí)記憶和海馬區(qū)樹突棘密度的影響
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 主要儀器
        3.1.2 主要試劑和藥品
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)動物
        3.2.2 Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)
        3.2.3 Y迷宮實(shí)驗(yàn)
        3.2.4 高爾基染色實(shí)驗(yàn)（Golgi -COX）
    3.3 數(shù)據(jù)分析
    3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.4.1 鉛鎘聯(lián)合暴露對SD大鼠學(xué)習(xí)記憶的影響
        3.4.2 鉛鎘聯(lián)合暴露對SD大鼠海馬區(qū)樹突棘密度的影響
    3.5 討論與小結(jié)
        3.5.1 討論
        3.5.2 小結(jié)
第四章 鉛鎘聯(lián)合暴露對HDAC2表達(dá)的影響
    4.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.1.1 主要儀器
        4.1.2 主要試劑和藥品
        4.1.3 主要抗體
        4.1.4 相關(guān)引物
    4.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.2.1 PC12細(xì)胞復(fù)蘇和培養(yǎng)
        4.2.2 蛋白樣品的制備
        4.2.3 BCA法測蛋白濃度
        4.2.4 蛋白質(zhì)免疫印跡法（Western Blot）
        4.2.5 細(xì)胞中總RNA提取
        4.2.6 反轉(zhuǎn)錄
        4.2.7 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)
        4.2.8 瓊脂糖凝膠電泳
        4.2.9 熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)
    4.3 數(shù)據(jù)分析
    4.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.4.1 鉛鎘聯(lián)合暴露對PC12細(xì)胞中HDAC2表達(dá)的影響
        4.4.2 鉛鎘聯(lián)合暴露對海馬組織中HDAC2表達(dá)的影響
    4.5 討論與小結(jié)
        4.5.1 討論
        4.5.2 小結(jié)
第五章 HDAC2在鉛鎘聯(lián)合暴露導(dǎo)致神經(jīng)毒性中的調(diào)節(jié)作用
    5.1 實(shí)驗(yàn)材料
        5.1.1 主要儀器
        5.1.2 主要試劑和藥品
    5.2 實(shí)驗(yàn)方法
        5.2.1 PC12細(xì)胞復(fù)蘇和培養(yǎng)
        5.2.2 大腸桿菌的培養(yǎng)
        5.2.3 質(zhì)粒提取方法
        5.2.4 Lipofectamine 3000脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)
        5.2.5 細(xì)胞突起檢測
    5.3 數(shù)據(jù)處理
    5.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        5.4.1 TSA處理對鉛鎘聯(lián)合暴露的細(xì)胞突起生長的影響
        5.4.2 shHDAC2處理對鉛鎘聯(lián)合暴露的細(xì)胞突起生長的影響
    5.5 討論和小結(jié)
        5.5.1 討論
        5.5.2 小結(jié)
第六章 結(jié)論
    6.1 概述
    6.2 主要結(jié)論
    6.3 創(chuàng)新點(diǎn)
    6.4 展望
參考文獻(xiàn)
碩士期間的學(xué)術(shù)活動及研究成果



本文編號：3851546