小分子HDACi N3F對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株的增殖抑制作用及其機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2023-07-25 00:39
肺癌(lung cancer)又稱原發(fā)性肺癌,其特征是惡性程度高,臨床預(yù)后差。非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)是最常見的肺癌類型之一,約占總肺癌數(shù)的80%,而平均5年生存率不到15%。傳統(tǒng)的治療方法,例如外科手術(shù)可能是治療非小細(xì)胞肺癌的有效方法,然而肺癌一經(jīng)發(fā)現(xiàn),基本都是中晚期,錯(cuò)過手術(shù)最佳治療期。而傳統(tǒng)的化學(xué)藥物治療肺癌普遍存在耐藥性、副作用明顯的特點(diǎn)。因此,開發(fā)新的治療藥物和新的治療策略對(duì)于增強(qiáng)治療肺癌有效性和提高肺癌患者的生存率至關(guān)重要。近期研究發(fā)現(xiàn),組蛋白去乙酰化酶的活性異常與多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。而組蛋白去乙;敢种苿(HDACi)是一類新的抑制劑類化療藥物,其通過抑制組蛋白去乙;傅幕钚蕴嵘M蛋白的乙;,促進(jìn)抑癌基因轉(zhuǎn)錄表達(dá),抑制腫瘤細(xì)胞增殖,誘導(dǎo)其凋亡和自噬等,從而表現(xiàn)抗腫瘤活性而成為研究的熱點(diǎn)。很多HDACi已經(jīng)在臨床試驗(yàn)階段,一些已經(jīng)應(yīng)用于臨床治療腫瘤疾病,例如伏立諾他(vorinostat,SAHA)是首個(gè)被美國FDA批準(zhǔn)用于治療皮膚T淋巴細(xì)胞瘤的HDACi。N3F(N-(2-氯-5-(三氟甲基)苯基)-N’-羥基辛烷二酰胺)是在SAHA的基礎(chǔ)上進(jìn)行構(gòu)效修...
【文章頁數(shù)】:51 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 前言
1.1 肺癌的治療現(xiàn)狀
1.2 細(xì)胞凋亡
1.3 細(xì)胞自噬
1.4 組蛋白去乙;概c腫瘤
1.5 組蛋白去乙;敢种苿┡c癌癥治療
1.6 本課題研究思路
第二章 N3F的體外抗增殖作用
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.1.1 細(xì)胞株
2.1.2 試劑與儀器
2.2 CCK-8法檢測N3F的體外抗增殖作用
2.2.1 細(xì)胞復(fù)蘇
2.2.2 細(xì)胞傳代
2.2.3 細(xì)胞種板
2.2.4 藥物配制
2.2.5 細(xì)胞給藥
2.2.6 OD值測定與處理
2.2.7 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.3 體外細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn)
2.3.1 細(xì)胞接種與給藥
2.3.2 細(xì)胞處理
2.3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.4 N3F對(duì)細(xì)胞遷移的作用
2.4.1 細(xì)胞培養(yǎng)
2.4.2 細(xì)胞處理
2.4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.5 小結(jié)
第三章 N3F誘導(dǎo)SPC-A-1細(xì)胞凋亡
3.1 HOECHST33258染色檢測細(xì)胞形態(tài)變化
3.1.1 細(xì)胞接種與給藥
3.1.2 細(xì)胞處理
3.1.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.2 流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡情況
3.2.1 細(xì)胞接種與給藥
3.2.2 細(xì)胞處理
3.2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.3 小結(jié)
第四章 WSTERNBLOT檢測NSCLC細(xì)胞中相關(guān)蛋白表達(dá)水平
4.1 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器
4.2 實(shí)驗(yàn)方法
4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
4.3.1 N3F對(duì)SPC-A-1細(xì)胞中HDAC3、BCL-2和BAX的影響
4.3.2 N3F對(duì)SPC-A-1、A549細(xì)胞中自噬蛋白LC3的影響
4.3.3 N3F對(duì)SPC-A-1、A549細(xì)胞中HDAC3與TIP60的影響
4.3.4 N3F對(duì)SPC-A-1、A549細(xì)胞中ULK1與BECLIN-1的影響
4.3.5 RGFP966對(duì)SPC-A-1細(xì)胞中自噬蛋白LC3的影響
4.4 小結(jié)
第五章 討論
展望
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文
附錄 縮略詞表
致謝
本文編號(hào):3836825
【文章頁數(shù)】:51 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 前言
1.1 肺癌的治療現(xiàn)狀
1.2 細(xì)胞凋亡
1.3 細(xì)胞自噬
1.4 組蛋白去乙;概c腫瘤
1.5 組蛋白去乙;敢种苿┡c癌癥治療
1.6 本課題研究思路
第二章 N3F的體外抗增殖作用
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.1.1 細(xì)胞株
2.1.2 試劑與儀器
2.2 CCK-8法檢測N3F的體外抗增殖作用
2.2.1 細(xì)胞復(fù)蘇
2.2.2 細(xì)胞傳代
2.2.3 細(xì)胞種板
2.2.4 藥物配制
2.2.5 細(xì)胞給藥
2.2.6 OD值測定與處理
2.2.7 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.3 體外細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn)
2.3.1 細(xì)胞接種與給藥
2.3.2 細(xì)胞處理
2.3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.4 N3F對(duì)細(xì)胞遷移的作用
2.4.1 細(xì)胞培養(yǎng)
2.4.2 細(xì)胞處理
2.4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.5 小結(jié)
第三章 N3F誘導(dǎo)SPC-A-1細(xì)胞凋亡
3.1 HOECHST33258染色檢測細(xì)胞形態(tài)變化
3.1.1 細(xì)胞接種與給藥
3.1.2 細(xì)胞處理
3.1.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.2 流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡情況
3.2.1 細(xì)胞接種與給藥
3.2.2 細(xì)胞處理
3.2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.3 小結(jié)
第四章 WSTERNBLOT檢測NSCLC細(xì)胞中相關(guān)蛋白表達(dá)水平
4.1 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器
4.2 實(shí)驗(yàn)方法
4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
4.3.1 N3F對(duì)SPC-A-1細(xì)胞中HDAC3、BCL-2和BAX的影響
4.3.2 N3F對(duì)SPC-A-1、A549細(xì)胞中自噬蛋白LC3的影響
4.3.3 N3F對(duì)SPC-A-1、A549細(xì)胞中HDAC3與TIP60的影響
4.3.4 N3F對(duì)SPC-A-1、A549細(xì)胞中ULK1與BECLIN-1的影響
4.3.5 RGFP966對(duì)SPC-A-1細(xì)胞中自噬蛋白LC3的影響
4.4 小結(jié)
第五章 討論
展望
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文
附錄 縮略詞表
致謝
本文編號(hào):3836825
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