為建立有效的α6/α3β2β3 nAChRs(α6/α3β2β3,或簡(jiǎn)寫(xiě)為α6β2^*,*代表其他亞基)體外重組表達(dá)實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?利用非洲爪蟾卵母細(xì)胞表達(dá)體系,采用顯微注射RNA的方法,利用雙電極電壓鉗技術(shù)檢測(cè)電流,對(duì)α6/α3β2β3nAChRs亞型進(jìn)行體外重組表達(dá)研究,并對(duì)其表達(dá)條件進(jìn)行優(yōu)化,獲得了α6/α3β2β3 nAChRs優(yōu)化的重組表達(dá)體系.煙堿型乙酰膽堿受體(nAChRs)是一類(lèi)重要的配體門(mén)控離子通道,其亞型眾多且結(jié)構(gòu)相似,但各亞型的生理學(xué)和藥理學(xué)功能截然不同.天然的α6β2^*nAChRs很難體外表達(dá),體外表達(dá)模型的表達(dá)電流非常小.因此,本實(shí)驗(yàn)擬研究?jī)?yōu)化該亞型的表達(dá),進(jìn)行優(yōu)化后的體外表達(dá)模型,產(chǎn)生的激發(fā)電流顯著提高,為以該亞型為靶點(diǎn)的新藥篩選提供實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ秃突A(chǔ).

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)材料、試劑與儀器
    1.2 受體亞基質(zhì)粒的提取和酶切
    1.3 cRNA的制備
    1.4 非洲爪蟾卵母細(xì)胞的獲取
    1.5 顯微注射
    1.6 電生理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采集
    1.7 條件優(yōu)化設(shè)置
2 結(jié)果與分析
    2.1 n ACh R亞基質(zhì)粒的制備和酶切
    2.2 cRNA的制備和檢測(cè)
    2.3 非洲爪蟾卵母細(xì)胞的篩選
    2.4 α6/α3β2β3 n ACh Rs亞型表達(dá)檢測(cè)
3 討論
4 結(jié)論



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