發(fā)布時間：2023-04-20 05:39

　　目的探討吡格列酮抑制西羅莫司靶蛋白(mTOR)通路促進(jìn)糖尿病大鼠下肢血管新生的作用。方法以自發(fā)性糖尿病大鼠行右側(cè)股動脈結(jié)扎離斷術(shù)建立急性下肢缺血模型,并隨機(jī)分為模型組和實(shí)驗(yàn)組,另取SD大鼠作為空白組。第15天時將各組大鼠處死,分離股動脈內(nèi)皮細(xì)胞。空白組和模型組給予空白血清進(jìn)行培養(yǎng),實(shí)驗(yàn)組給予含15%鹽酸吡格列酮血清進(jìn)行培養(yǎng)。用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)檢測mTOR mRNA、自噬效應(yīng)蛋白(Beclin-1)mRNA、自噬相關(guān)蛋白5(Atg5)和微管相關(guān)蛋白1輕鏈3(LC3)mRNA的表達(dá)水平,用噻唑藍(lán)法檢測細(xì)胞的增殖情況。結(jié)果干預(yù)48 h后,空白組、模型組和實(shí)驗(yàn)組的mTOR mRNA分別為1.00±0.14,2.98±0.90和1.18±0.11,LC3 mRNA分別為1.00±0.06,0.71±0.07和0.91±0.10,Beclin-1 mRNA分別為1.00±0.28,0.72±0.16和0.93±0.17,Atg5 mRNA分別為1.00±0.18,0.75±0.19和0.97±0.19,細(xì)胞增殖情況(光密度)分別為0.80±0.02,0.59±0.01和0.72±0.03,模型組...

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【文章目錄】：
材料與方法
    1 材料
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 模型構(gòu)建
        2.2 吡格列酮含藥血清制備[5]
        2.3 動物分組與給藥方法
        2.4 主要觀察指標(biāo)
            2.4.1 用RT-PCR檢測mTOR、Beclin-1、Atg5和LC3基因的表達(dá)水平
            2.4.2 用噻唑藍(lán)(MTT)法檢測細(xì)胞增殖
        2.5 次要觀察指標(biāo)
            2.5.1 用免疫熒光染色鑒定LC3蛋白
            2.5.2 用管腔結(jié)構(gòu)形成實(shí)驗(yàn)檢測管腔形成數(shù)
            2.5.3 用流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡
    3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié) 果
    1 吡格列酮含藥血清對股動脈內(nèi)皮細(xì)胞中mTOR mRNA和自噬相關(guān)基因表達(dá)的影響
    2 吡格列酮含藥血清對股動脈內(nèi)皮細(xì)胞增殖的影響
    3 吡格列酮含藥血清對自噬LC3蛋白質(zhì)免疫熒光的影響
    4 吡格列酮含藥血清對管腔形成數(shù)的影響
    5 吡格列酮含藥血清對股動脈內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的影響
討 論



本文編號：3794998