目的：雙硫侖(DSF)作為抗酗酒藥物已經(jīng)有六十多年的臨床應(yīng)用,近幾年的研究發(fā)現(xiàn),雙硫侖螯合二價金屬陽離子后有選擇性抗腫瘤的活性,然其作用機制未明。氯通道作為最重要的陰離子通道,參與細胞的增殖、凋亡、周期調(diào)控等生理及病理生理過程。我們前期研究表明,Cl C-3氯通道在鼻咽癌細胞和正常鼻咽上皮細胞中存在差異性的表達,提示氯通道可作為腫瘤診斷和干預的潛在新靶標。本實驗基于雙硫侖/銅(DSF/Cu)高效低毒的抗腫瘤活性,探究DSF/Cu是否具有選擇性誘導鼻咽腫瘤細胞凋亡的作用,從氯通道角度探索DSF/Cu高選擇性抗腫瘤作用的潛在新靶點,為研發(fā)以Cl C-3氯通道為靶向分子的抗腫瘤藥提供實驗依據(jù)。方法:以人低分化鼻咽癌細胞(CNE-2Z)和人永生化正常鼻咽上皮細胞(NP69-SV40T)為研究對象,1)流式細胞術(shù)檢測DSF/Cu誘導CNE-2Z細胞和NP69-SV40T細胞的凋亡率;2)原子力顯微鏡(AFM)觀察DSF/Cu誘導CNE-2Z細胞和NP69-SV40T細胞表面超微結(jié)構(gòu)的變化;3)采用si RNA沉默技術(shù)下調(diào)CNE-2Z細胞Cl C-3氯通道蛋白的表達;4)熒光顯微鏡和流式細胞術(shù)檢測...

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【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 前言
    1. 研究背景
        1.1 雙硫侖抗腫瘤作用的研究
        1.2 離子通道與腫瘤
        1.3 氯離子通道
        1.4 ClC-3 氯通道與腫瘤
    2. 研究思路、目的及意義
第二章 材料與方法
    1. 實驗材料
        1.1 細胞株
        1.2 實驗儀器與設(shè)備
        1.3 實驗藥品與試劑
    2.實驗方法
        2.1 細胞培養(yǎng)
        2.2 細胞凋亡實驗
        2.3 全細胞膜片鉗實驗
        2.4 細胞轉(zhuǎn)染
        2.5 Western Blot實驗
        2.6 原子力顯微鏡
        2.7 統(tǒng)計分析
第三章 結(jié)果
    第一部分 DSF/Cu在正常鼻咽上皮細胞（NP69-SV40T）和低分化鼻咽癌細胞（CNE-2Z）凋亡中的作用以及對細胞超微結(jié)構(gòu)的影響
        1.1 DSF/Cu在正常鼻咽上皮細胞和低分化鼻咽癌細胞凋亡中的作用
            1.1.1 DSF/Cu呈濃度依賴性誘導鼻咽癌細胞凋亡
            1.1.2 DSF/Cu呈時間依賴性誘導鼻咽癌細胞凋亡
        1.2 DSF/Cu對低分化鼻咽癌細胞（CNE-2Z）和正常鼻咽上皮細胞（NP69-SV40T）超微結(jié)構(gòu)的影響
    第二部分 ClC-3 氯通道是否參與DSF/Cu誘導的鼻咽癌細胞（CNE-2Z）凋亡
        2.1 氯通道阻斷劑抑制DSF/Cu誘導的鼻咽癌細胞的凋亡
        2.2 ClC-3 氯通道在DSF/Cu誘導的鼻咽癌細胞凋亡中的作用
            2.2.1 ClC-3 氯通道蛋白在人鼻咽癌細胞(CNE-2Z)高表達
            2.2.2 DSF/Cu對鼻咽癌CNE-2Z細胞ClC-3 氯通道蛋白表達的影響
第四章 討論
結(jié)論
參考文獻
主要縮略詞匯表
在校期間科研情況
致謝



本文編號：3780101