惡性腫瘤嚴(yán)重危害人類健康，尋求療效高、毒副作用小而且能夠靶向腫瘤的新型化療藥物成為國(guó)內(nèi)外研究重點(diǎn)。順鉑、卡鉑和奧沙利鉑等為代表的鉑金屬抗腫瘤藥在臨床治療中展現(xiàn)出顯著的療效，但是所引起的惡心嘔吐、骨髓抑制和神經(jīng)毒性等毒性作用限制了鉑金屬抗腫瘤藥的應(yīng)用。釕金屬配合物因?yàn)榫哂信c鉑類配合物相媲美的抗腫瘤活性引起了很多研究者的興趣。本研究課題設(shè)計(jì)、合成并表征了12種釕金屬配合物。通過(guò)Bel-7402、A549、SKBR-3和MG-63四種腫瘤細(xì)胞株對(duì)它們的半數(shù)抑制濃度IC50進(jìn)行檢測(cè)。通過(guò)配合物的內(nèi)吞實(shí)驗(yàn)、吖啶橙和溴化乙啶雙染實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞周期檢測(cè)試驗(yàn)、細(xì)胞活性氧水平檢測(cè)試驗(yàn)和線粒體膜電位檢測(cè)等方法初步證實(shí)新型釕配合物能夠誘發(fā)細(xì)胞凋亡。通過(guò)蛋白免疫印跡法探討配合物誘發(fā)細(xì)胞凋亡的相關(guān)機(jī)理。以下分章介紹具體研究具體內(nèi)容。 第二章用鄰菲咯啉-5,6-二酮與2-羥基-3,5-二叔丁基苯甲醛反應(yīng)合成配體THPIP，進(jìn)一步與輔助配體bpy、dmb、phen和dmp反應(yīng)合成四個(gè)配合物Ru A1、A2、A3、A4。通過(guò)檢測(cè)，這四種配合物對(duì)四種細(xì)胞株的IC50值都在25μM左右，對(duì)A549細(xì)胞株IC50值較低。從內(nèi)吞...

【文章頁(yè)數(shù)】：86 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
縮略語(yǔ)
文章涉及配體結(jié)構(gòu)和縮寫
摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 引言
    1.2 金屬抗腫瘤藥物的研究進(jìn)展
        1.2.1 金屬鉑類抗腫瘤藥
        1.2.2 其他金屬抗腫瘤藥物
        1.2.3 釕金屬配合物抗腫瘤研究進(jìn)展
    1.3 腫瘤細(xì)胞的程序性死亡
        1.3.1 細(xì)胞凋亡
        1.3.2 細(xì)胞凋亡的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑
    1.4 釕金屬配合物與細(xì)胞凋亡近年研究成果
    1.5 展望
    1.6 課題的設(shè)計(jì)和創(chuàng)新點(diǎn)
第二章 THPIP 系列釕配合物的合成、表征及其抗腫瘤活性研究
    2.1 前言
    2.2 材料
        2.2.1 本章受測(cè)試配合物
        2.2.2 主要試劑
        2.2.3 主要儀器
    2.3 合成方法
        2.3.1 相關(guān)配體的合成
        2.3.2 以 THPIP 為配體的相關(guān)配合物的合成
    2.4 釕配合物抗腫瘤生物活性檢測(cè)方法
        2.4.1 細(xì)胞培養(yǎng)、傳代、復(fù)蘇和凍存
        2.4.2 MTT 實(shí)驗(yàn)步驟
        2.4.3 DAPI 染色檢測(cè)配合物細(xì)胞內(nèi)吞實(shí)驗(yàn)
        2.4.4 AO/EB 雙染法檢測(cè)細(xì)胞凋亡
        2.4.5 PI 染色檢測(cè)細(xì)胞周期
        2.4.6 細(xì)胞活性氧水平的檢測(cè)
        2.4.7 細(xì)胞線粒體膜電位的檢測(cè)
    2.5 結(jié)果與討論
        2.5.1 MTT 結(jié)果與討論
        2.5.2 DAPI 染色檢測(cè)配合物細(xì)胞內(nèi)吞實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        2.5.3 AO/EB 染色結(jié)果和討論
        2.5.4 PI 染色檢測(cè)細(xì)胞周期結(jié)果及討論
        2.5.5 細(xì)胞活性氧水平的檢測(cè)結(jié)果和討論
        2.5.6 細(xì)胞線粒體膜電位結(jié)果和討論
    2.6 本章小結(jié)
第三章 HMNP 系列釕配合物的合成、表征及其抗腫瘤活性研究
    3.1 前言
    3.2 材料
        3.2.1 本章受測(cè)試配合物
        3.2.2 主要試劑和儀器
    3.3 合成方法
        3.3.1 相關(guān)配體的合成
        3.3.2 以 HMNP 為配體的相關(guān)配合物的合成
    3.4 化合物抗腫瘤生物活性檢測(cè)方法
    3.5 結(jié)果與討論
        3.5.1 MTT 結(jié)果與討論
        3.5.2 DAPI 染色檢測(cè)配合物細(xì)胞內(nèi)吞實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        3.5.3 AO/EB 染色結(jié)果和討論
        3.5.4 PI 染色檢測(cè)細(xì)胞周期結(jié)果及討論
        3.5.5 細(xì)胞活性氧水平的檢測(cè)結(jié)果和討論
        3.5.6 細(xì)胞線粒體膜電位結(jié)果和討論
    3.6 本章小結(jié)
第四章 HMAP 系列釕配合物的合成、表征及其抗腫瘤活性研究
    4.1 前言
    4.2 材料
        4.2.1 本章受測(cè)試配合物
        4.2.2 主要試劑和儀器
    4.3 合成方法
        4.3.1 以 HMAP 為配體的相關(guān)配合物的合成
    4.4 化合物抗腫瘤生物活性檢測(cè)方法
    4.5 結(jié)果與討論
        4.5.1 MTT 結(jié)果與討論
        4.5.2 DAPI 染色檢測(cè)配合物細(xì)胞內(nèi)吞實(shí)驗(yàn)結(jié)果和討論
        4.5.3 AO/EB 染色結(jié)果和討論
        4.5.4 PI 染色檢測(cè)細(xì)胞周期結(jié)果及討論
        4.5.5 細(xì)胞活性氧水平的檢測(cè)結(jié)果和討論
        4.5.6 細(xì)胞線粒體膜電位結(jié)果和討論
    4.6 本章小結(jié)
第五章 [Ru(bpy)₂THPIP](ClO₄)₂誘導(dǎo) A549 細(xì)胞凋亡的相關(guān)作用機(jī)理研究
    5.1 引言
    5.2 實(shí)驗(yàn)材料
        5.2.1 測(cè)試對(duì)象
        5.2.2 儀器
        5.2.3 抗體
        5.2.4 常用試劑及配制
    5.3 實(shí)驗(yàn)步驟
        5.3.1 蛋白樣品制備
        5.3.2 蛋白含量的測(cè)定
        5.3.3 SDS－PAGE 電泳
        5.3.4 半干法轉(zhuǎn)膜
        5.3.5 免疫反應(yīng)
        5.3.6 化學(xué)發(fā)光，顯影，定影
        5.3.7 凝膠圖象分析
    5.4 結(jié)果與討論
        5.4.1 Caspase 家族相關(guān)蛋白的免疫印跡結(jié)果
        5.4.2 Caspase 家族相關(guān)蛋白的檢測(cè)結(jié)果分析
        5.4.3 Bcl-2 家族相關(guān)蛋白的檢測(cè)結(jié)果
        5.4.4 Bcl-2 家族相關(guān)蛋白的檢測(cè)結(jié)果分析
    5.5 小結(jié)
第六章 討論和結(jié)論
    6.1 釕配合物和抗腫瘤活性
        6.1.1 釕配合物的合成
        6.1.2 抗腫瘤活性
    6.2 細(xì)胞凋亡結(jié)果討論
    6.3 結(jié)論
    6.4 全文展望
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士期間參與發(fā)表的文章和成果
致謝



本文編號(hào)：3743893