目的研究膽堿能M受體（主要為M1受體）參與SH-SY5Y細胞周期依賴性蛋白激酶5（Cdk5）調(diào)控及其在敵敵畏（DDVP）誘導(dǎo)SH-SY5Y細胞毒性損傷中的作用。方法①應(yīng)用免疫熒光結(jié)合共聚焦顯微鏡檢測膽堿能M1受體及Cdk5在SH-SY5Y細胞中的分布和表達。②細胞對照組、氧化震顫素（Oxo-M）組(1×10^-4mol·L^-1作用48 h)、羅考唯亭（Rosc）組(培養(yǎng)結(jié)束前1 h加入Rosc 1×10^-4mol·L^-1)、Rosc+Oxo-M組(Rosc 1×10^-4mol·L^-1預(yù)處理1 h后,再加入Oxo-M 1×10^-4mol·L^-1作用至48 h),應(yīng)用MTT比色法檢測細胞存活率,Western印跡法檢測Cdk5表達。③細胞對照組、DDVP組(1×10^-5mol·L^-1作用48 h)、Rosc組(培養(yǎng)結(jié)束前1 h加入1×10^-4mol·L<... 

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 細胞、藥物和主要試劑
    1.2 主要儀器
    1.3 細胞培養(yǎng)
    1.4 細胞免疫熒光法檢測細胞Cdk5和M1蛋白表達
    1.5 MTT法檢測細胞存活率
    1.6 AnnexinⅤ-FITC/PI雙染法檢測細胞凋亡率
    1.7 TUNEL檢測細胞凋亡
    1.8 Western印跡法檢測Cdk5的表達
    1.9 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 膽堿能M受體和Cdk5均在SH-SY5Y細胞中表達
    2.2 Oxo-M過度激活膽堿能M受體誘導(dǎo)的SH-SY5Y細胞損傷
        2.2.1 Oxo-M對SH-SY5Y細胞存活率的影響
        2.2.2 Oxo-M對SH-SY5Y細胞Cdk5表達的影響
    2.3 Rosc減輕Oxo-M誘導(dǎo)的SH-SY5Y細胞損傷
        2.3.1 Rosc對SH-SY5Y細胞Cdk5表達的影響
        2.3.2 Rosc對Oxo-M誘導(dǎo)的SH-SY5Y細胞損傷的影響
        2.3.3 Rosc對Oxo-M誘導(dǎo)的SH-SY5Y細胞Cdk5表達的影響
    2.4 DDVP誘導(dǎo)SH-SY5Y細胞損傷并上調(diào)Cdk5表達
        2.4.1 DDVP對SH-SY5Y細胞存活率的影響
        2.4.2 DDVP對SH-SY5Y細胞Cdk5表達的影響
    2.5 Rosc可降低DDVP誘導(dǎo)的SH-SY5Y細胞損傷
        2.5.1 Rosc對DDVP誘導(dǎo)的細胞損傷的影響
        2.5.2 Rosc對DDVP誘導(dǎo)的SH-SY5Y細胞Cdk5表達的影響
    2.6 Rosc減輕DDVP誘導(dǎo)的SH-SY5Y細胞凋亡
3 討論



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