阿霉素（doxorubicin,DOX）是臨床常用的廣譜抗腫瘤藥物之一,療效確切、價(jià)格低廉。但是由于其心臟毒性及高的耐藥率嚴(yán)重限制它的臨床應(yīng)用。研究發(fā)現(xiàn)DOX除了作用于細(xì)胞核DNA外,線粒體也是其重要靶點(diǎn)。如果將DOX特異地遞送到腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞核及線粒體,便可以提高其療效、降低全身毒副作用。很多人類(lèi)腫瘤細(xì)胞如黑色素瘤、非小細(xì)胞肺癌、乳腺癌和前列腺癌等高表達(dá)Sigma受體,茴香酰胺（AA）是Sigma受體的選擇性配體。經(jīng)AA修飾的遞藥系統(tǒng)具有腫瘤主動(dòng)靶向功能。目的:本研究以AA為腫瘤細(xì)胞特異性靶向配基,分別構(gòu)建基于二硬脂酰磷脂酰乙醇胺（DSPE）的酸敏膠束遞藥系統(tǒng)和基于聚乳酸-羥基乙酸共聚物（PLGA）的酸敏納米粒遞藥系統(tǒng),將DOX遞送至腫瘤細(xì)胞線粒體,以期提高DOX的抗腫瘤活性、逆轉(zhuǎn)腫瘤耐藥、降低DOX的全身毒副功能。方法:以DSPE、聚乙二醇（PEG）、對(duì)乙�；郊姿�、對(duì)甲氧基苯甲酰氯、膽固醇（CHOL）、三苯基溴化膦（triphenylphosphonium,TPP）、地喹氯銨（dequalinium,DQA）和DOX為原料,合成DOX線粒體靶向連接物DQA-DOX,以及AA-PE... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)陜西省211工程院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
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前言
文獻(xiàn)回顧
第一部分 基于DSPE酸敏膠束的腫瘤細(xì)胞線粒體靶向遞藥系統(tǒng)研究
    實(shí)驗(yàn)一 嵌段材料的合成及表征
        1 材料
            1.1 儀器
            1.2 試劑
        2 方法
            2.1 試劑除水
            2.2 茴香酰胺-聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺（AA-PEG-hyd-DSPE）的合成
                2.2.1 茴香酰胺-聚乙二醇連接物（AA-PEG-NH2）的合成
                2.2.2 茴香酰胺-聚乙二醇-對(duì)乙�；郊姿徇B接物的合成
            2.3 二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-肼連接物的合成
            2.4 AA-PEG-hyd-DSPE的合成
            2.5 地喹氯銨-阿霉素連接物（DQA-DOX）的合成
        3 結(jié)構(gòu)表征
            3.1 N-(4′-甲氧基苯甲�；�)6氨基己酸
            3.2 二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-肼
            3.3 AA-PEG-hyd-DSPE
            3.4 DQA-DOX
        4 討論
    實(shí)驗(yàn)二 基于DSPE酸敏膠束的制備及其抗腫瘤活性研究
        1 材料
            1.1 儀器
            1.2 試劑
            1.3 細(xì)胞
        2 方法
            2.1 膠束的制備
            2.2 膠束載藥量和包封率的測(cè)定
                2.2.1 測(cè)定DOX以及DQA-DOX標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
                2.2.2 測(cè)定載藥量與包封率
            2.3 膠束的表征
            2.4 臨界膠束濃度(CMC)的測(cè)定
            2.5 膠束穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)
            2.6 膠束體外釋藥實(shí)驗(yàn)
            2.7 膠束細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)
            2.8 膠束對(duì)腫瘤細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)作用
            2.9 膠束轉(zhuǎn)運(yùn)DOX在腫瘤細(xì)胞的分布
            2.10 膠束的體內(nèi)抗腫瘤活性
        3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
            3.1 膠束的表征
            3.2 膠束穩(wěn)定性
            3.3 膠束體外釋藥
            3.4 膠束的細(xì)胞毒性
            3.5 膠束對(duì)腫瘤細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)作用
            3.6 膠束轉(zhuǎn)運(yùn)DOX在腫瘤細(xì)胞內(nèi)的分布
            3.7 膠束的體內(nèi)抗腫瘤活性
        4 討論
第二部分 基于PLGA的腫瘤細(xì)胞線粒體靶向遞藥系統(tǒng)的研究
    實(shí)驗(yàn)一 嵌段材料的合成及表征
        1 材料
            1.1 儀器
            1.2 試劑
        2 方法
            2.1 試劑除水
            2.2 茴香酰胺-聚乙二醇-膽固醇連接物（AA-PEG-hyd-CHOL）的合成
                2.2.1 茴香酰胺-聚乙二醇連接物（AA-PEG-NH2）的合成
                2.2.2 茴香酰胺-聚乙二醇-對(duì)乙酰基苯甲酸的合成
            2.3 膽固醇琥珀酰肼的合成
                2.3.1 膽固醇琥珀酸單酯的合成
                2.3.2 膽固醇琥珀酰肼的合成
            2.4 AA-PEG-hyd-CHOL的合成
            2.5 三苯基膦-膽固醇連接物（TPP-CHOL）的合成
        3 結(jié)構(gòu)表征
            3.1 膽固醇琥珀酰肼
            3.2 AA-PEG-hyd-CHOL
            3.3 TPP-CHOL
        4 討論
    實(shí)驗(yàn)二 脂質(zhì)修飾PLGA納米粒的制備及其抗腫瘤活性研究
        1 材料
            1.1 儀器
            1.2 試劑
            1.3 細(xì)胞
        2 方法步驟
            2.1 脂質(zhì)修飾PLGA納米粒（LNPs）制備方法的優(yōu)化
                2.1.1 超聲功率的優(yōu)化
                2.1.2 乳化劑濃度的優(yōu)化
                2.1.3 超聲時(shí)間對(duì)納米粒的影響
                2.1.4 DOX投入量對(duì)納米粒粒徑及載藥量的影響
            2.2 LNPs的制備
            2.3 LNPs載藥量與包封率測(cè)定
                2.3.1 測(cè)定DOX標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
                2.3.2 測(cè)定載藥量與包封率
            2.4 LNPs的表征
                2.4.1 LNPs的粒徑及形態(tài)表征
                2.4.2 LNPs表面元素分析
            2.5 LNPs穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)
            2.6 環(huán)境pH對(duì)LNPs Zeta電位的影響
            2.7 LNPs的體外釋藥實(shí)驗(yàn)
            2.8 LNPs溶解紅細(xì)胞膜作用
            2.9 LNPs細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)
            2.10 LNPs對(duì)腫瘤細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)作用
            2.11 LNPs轉(zhuǎn)運(yùn)DOX在腫瘤細(xì)胞的分布
            2.12 LNPs對(duì)線粒體膜電位的影響
            2.13 LNPs對(duì)細(xì)胞周期影響
            2.14 LNPs的體內(nèi)抗腫瘤活性研究
        3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
            3.1 檢測(cè)DOX標(biāo)準(zhǔn)曲線
            3.2 LNPs制備方法的化
                3.2.1 超聲功率的優(yōu)化
                3.2.2 乳化劑濃度的優(yōu)化
                3.2.3 超聲時(shí)間對(duì)納米粒的影響
                3.2.4 DOX投入量的影響
                3.2.5 LNPs的制備
            3.3 LNPs的表征
            3.4 LNPs的穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)
            3.5 環(huán)境pH對(duì)LNPs Zeta電位的影響
            3.6 LNPs體外釋藥
            3.7 LNPs溶解紅細(xì)胞膜作用
            3.8 LNPs細(xì)胞毒性
            3.9 LNPs誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡作用
            3.10 LNPs轉(zhuǎn)運(yùn)DOX在腫瘤細(xì)胞內(nèi)的分布
            3.11 LNPs對(duì)線粒體膜電位的影響
            3.12 LNPs對(duì)細(xì)胞周期的影響
            3.13 LNPs體內(nèi)抗腫瘤活性
        4 討論
小結(jié)
參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)歷和研究成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)篩選鑒定鋅指蛋白139調(diào)控的胃癌轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白質(zhì)[J]. 李勇,王力利,康愛(ài)文,范立僑,趙群,檀碧波,郝英杰,劉慶偉.  南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2015(03)
[2]單因素考察及正交設(shè)計(jì)確定三氧化二砷PLGA納米粒制備工藝[J]. 陳昦,王雪瑩,張玉華,閻雪瑩.  中醫(yī)藥信息. 2011(03)



本文編號(hào)：3627989