發(fā)布時(shí)間：2022-02-13 21:11

　　目的建立一種基于表面等離子共振（SPR）技術(shù)的快速抗體定量檢測(cè)方法。方法基于SPR技術(shù),利用Protein A與抗體Fc端特異性結(jié)合的特點(diǎn),通過測(cè)定一系列濃度梯度的單克隆抗體對(duì)照品與Protein A結(jié)合的響應(yīng)單位（Ru）,建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,通過讀取未知濃度抗體與Protein A芯片結(jié)合的響應(yīng)值,實(shí)現(xiàn)對(duì)未知抗體濃度的定量。并對(duì)該方法的準(zhǔn)確度、重復(fù)性、專屬性、線性范圍及耐用性等參數(shù)進(jìn)行考察。結(jié)果建立的抗體定量方法專屬性強(qiáng);抗體濃度在20～20 000 ng·mL^-1的范圍內(nèi),Ru值與IgG1濃度呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系;準(zhǔn)確度、重復(fù)性、線性范圍等均滿足要求。結(jié)論該方法可用于抗體產(chǎn)品的定量檢測(cè)。 

【文章來源】：醫(yī)藥導(dǎo)報(bào). 2020,39(05)北大核心

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

方法線性范圍考察結(jié)果

以空白輔料溶液稀釋人IgG1對(duì)照品,按照建立的方法進(jìn)行檢測(cè)分析的結(jié)果見表1。經(jīng)計(jì)算,人IgG1對(duì)照品5000,500,50 ng·mL-1高中低3個(gè)濃度在空白輔料中回收率分別為102.68%,102.68%,99.26%,9份樣品平均回收率為101.54%,RSD值2.23%。以RPMI1640無血清培養(yǎng)基溶液稀釋人IgG1對(duì)照品,按照建立的方法進(jìn)行檢測(cè)分析的結(jié)果見表2。經(jīng)計(jì)算,5000,500,50 ng·mL-1人IgG1對(duì)照品在RPMI1640無血清培養(yǎng)基中的回收率分別為105.07%,100.88%,96.22%,9份樣品平均回收率為100.72%,RSD值4.23%。上述結(jié)果表明,該方法加標(biāo)回收率好,準(zhǔn)確度高。圖2 方法線性范圍考察結(jié)果

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