TFPR1是本課題組研發(fā)的已獲國家專利授權(quán)的新型佐劑,是基于竹葉青蛇毒非毒素蛋白Triflin N端的致病相關(guān)蛋白1結(jié)構(gòu)域設(shè)計而成。前期研究表明TFPR1具有很好的免疫調(diào)節(jié)活性,與抗原簡單混合即可增強(qiáng)其免疫原性,誘導(dǎo)Th1偏倚的Th1/Th2型體液免疫和細(xì)胞免疫應(yīng)答。但是TFPR1發(fā)揮佐劑活性的功能域和能否通過樹突狀細(xì)胞發(fā)揮佐劑功能均不清楚,以及不知道它用作復(fù)合佐劑的主要組份是否有效,本課題針對這三個問題開展研究。目的研究樹突狀細(xì)胞在TFPR1發(fā)揮佐劑功能中的作用以及TFPR1發(fā)揮佐劑活性的重要結(jié)構(gòu)域,并探索TFPR1作為主要組分的復(fù)合佐劑的可行性和有效性。方法（1）樹突狀細(xì)胞在TFPR1發(fā)揮佐劑功能中的作用研究以小鼠骨髓來源的樹突狀細(xì)胞為研究對象,加入TFPR1共孵育24 h,并以LPS（脂多糖）作為陽性對照、PBS作為陰性對照,分別從形態(tài)學(xué)、肌動蛋白的分布變化以及細(xì)胞表面標(biāo)志三個方面分析樹突狀細(xì)胞的成熟情況,并ELISA檢測TFPR1處理的樹突狀細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子水平變化。（2）TFPR1活性功能區(qū)的研究利用生物信息學(xué)預(yù)測TFPR1的B細(xì)胞表位,結(jié)合TFPR1的二級結(jié)構(gòu)和關(guān)鍵結(jié)構(gòu)域... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁數(shù)】：90 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

樹突狀細(xì)胞的形態(tài)在TFPRl刺激下發(fā)生變化(100X)

安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文再結(jié)合樹突狀細(xì)胞特征性的形態(tài)變化，從形態(tài)學(xué)上表明 TFPR1 具有促進(jìn)樹突狀細(xì)胞成熟的作用。3.3 TFPR1 上調(diào)樹突狀細(xì)胞表面標(biāo)志的表達(dá)在從形態(tài)學(xué)證明 TFPR1 具有促進(jìn)樹突狀細(xì)胞成熟的作用的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步利用流式細(xì)胞術(shù)檢測樹突狀細(xì)胞表面分子在 TFPR1 刺激后的變化，細(xì)胞表面 CD40、CD80、CD86 和 MHCⅡ在不同成熟狀態(tài)的樹突狀細(xì)胞表面表達(dá)水平不同[23,28]。樹突狀細(xì)胞在 TFPR1 作用下，其表達(dá)水平與陰性對照細(xì)胞相比顯著上調(diào)，雖然上調(diào)水平略低于陽性對照 LPS 處理的細(xì)胞（圖 3）。該結(jié)果進(jìn)一步表明 TFPR1 具有促進(jìn)樹突狀細(xì)胞成熟的作用。

安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文測 TFPR1 的 B 細(xì)胞表位，結(jié)果顯示 TFPR1 上存在 9 個 B 細(xì)胞a、15-23aa、31-40aa、48-56aa、71-75aa、84-102aa、115-117a144 aa（圖 5）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]新型佐劑蛋白TFPR1在畢赤酵母系統(tǒng)中的表達(dá)及鑒定[J]. 寧秀哲,寇志華,孫維來,朱青,楊裔,邱洪杰,郭晶晶,郭彥,于虹,周育森.  中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志. 2016 (04)
[2]蛇毒蛋白triflin功能區(qū)TFPR1在大腸桿菌中的表達(dá)及其功能初步研究[J]. 孫維來,楊裔,寧秀哲,郭晶晶,于虹,郭彥,寇志華,周育森.  生物技術(shù)通訊. 2015(03)



本文編號：3612320