目的:合成兩種具有線粒體靶向的吩噻嗪衍生物,從而探討兩個化合物對腫瘤增殖、遷移、侵襲、自噬和凋亡的影響,并進(jìn)一步探索其對腫瘤的作用機(jī)制。方法:采用離域的陽離子基團(tuán)與吩噻嗪結(jié)構(gòu)相連合成有正電性的吩噻嗪衍生物經(jīng)分離純化后選用腫瘤細(xì)胞AGS、H520、Lovo、Hela、Hu-7、U87等為研究對象,用MTT實(shí)驗(yàn)對兩種化合物抗腫瘤活性進(jìn)行篩選后并進(jìn)一步考察該化合物的最適給藥時(shí)間和進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)的給藥濃度。接下來用MTT、平板克隆形成實(shí)驗(yàn)、transwell遷移實(shí)驗(yàn)、transwell侵襲實(shí)驗(yàn)、自噬和凋亡實(shí)驗(yàn)考察藥物對腫瘤細(xì)胞的克隆形成、遷移、侵襲、自噬和凋亡的影響并用線粒體探針驗(yàn)證化合物是否能靶向腫瘤細(xì)胞線粒體。然后用分子對接實(shí)驗(yàn)、Western blotting實(shí)驗(yàn)探索該化合物抗腫瘤的分子機(jī)制。最后用siRNA和dsRNA轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)的分子機(jī)制。結(jié)果:通過MTT實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)與陽性對照組相比化合物一對實(shí)驗(yàn)中所有腫瘤細(xì)胞活性較好,且適宜給藥時(shí)間為24 h并選用0、2和4μM作為接下來實(shí)驗(yàn)的給藥濃度,而化合物二效果遠(yuǎn)不及陽性對照組�；衔镆贿_(dá)到2μM時(shí)就可抑制腫瘤細(xì)胞AGS、Lovo、H... 

【文章來源】：湖北科技學(xué)院湖北省

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

最常見的腫瘤表型之一是葡萄糖代謝的改變

26圖1（A）用MTT方法測定化合物一給藥24h對腫瘤細(xì)胞AGS，C6，H520，H1975，Hela，HuH-7，NC1-N87，MRMT-1和Lovo增殖的影響。（B）用MTT方法測定化合物二給藥24h對腫瘤細(xì)胞AGS，C6，H520，H1975，Hela，HuH-7，NC1-N87，MRMT-1和Lovo增殖的影響。（C）用化合物一處理AGS，MRMT-1和Lovo三種細(xì)胞給藥12、24和36小時(shí)后，通過MTT測定法測量細(xì)胞增殖能力。（D）陽性對照氯丙嗪和原料2-氯吩噻嗪（給藥濃度0、5、10、15、17.5、20、25、30、40和60μM））對AGS，MRMT-1和Lovo三種腫瘤細(xì)胞給藥24h的增殖能力的影響。將未給藥的腫瘤細(xì)胞用作為對照組，將其細(xì)胞活力設(shè)置為100％。*P<0.05，**P<0.01和***P<0.001。

272化合物一對腫瘤細(xì)胞平板克隆形成的影響平板克隆形成實(shí)驗(yàn)反映了單個細(xì)胞的集落形成能力。為了檢測化合物一堆腫瘤細(xì)胞單克隆形成的影響我們進(jìn)行了平板克隆實(shí)驗(yàn)并選用Lovo，MRMT-1，AGS細(xì)胞作為研究對象。除了給藥后濃度為0.5μM外，化合物一對AGS和MRMT-1細(xì)胞單克隆形成有顯著抑制作用，而其所有濃度對lovo細(xì)胞中均表現(xiàn)出明顯抑制作用（圖2A-B）。圖2（A）化合物一（給藥濃度：0、0.5、1和2μM；處理時(shí)間7天）對癌細(xì)胞AGS，MRMT-1和Lovo平板克隆形成實(shí)驗(yàn)的影響。（B）克隆形成率統(tǒng)計(jì)圖。將未給藥的細(xì)胞作為對照組，將其單克隆形成力設(shè)為100％。***P＜0.001。

【參考文獻(xiàn)】：
碩士論文
[1]氯丙嗪與三氟拉嗪對肺癌的作用及機(jī)制研究[D]. 陳波.天津科技大學(xué) 2016



本文編號：3585937