目的:合成兩種具有線粒體靶向的吩噻嗪衍生物,從而探討兩個化合物對腫瘤增殖、遷移、侵襲、自噬和凋亡的影響,并進一步探索其對腫瘤的作用機制。方法:采用離域的陽離子基團與吩噻嗪結(jié)構(gòu)相連合成有正電性的吩噻嗪衍生物經(jīng)分離純化后選用腫瘤細(xì)胞AGS、H520、Lovo、Hela、Hu-7、U87等為研究對象,用MTT實驗對兩種化合物抗腫瘤活性進行篩選后并進一步考察該化合物的最適給藥時間和進行后續(xù)實驗的給藥濃度。接下來用MTT、平板克隆形成實驗、transwell遷移實驗、transwell侵襲實驗、自噬和凋亡實驗考察藥物對腫瘤細(xì)胞的克隆形成、遷移、侵襲、自噬和凋亡的影響并用線粒體探針驗證化合物是否能靶向腫瘤細(xì)胞線粒體。然后用分子對接實驗、Western blotting實驗探索該化合物抗腫瘤的分子機制。最后用siRNA和dsRNA轉(zhuǎn)染實驗進一步驗證實驗發(fā)現(xiàn)的分子機制。結(jié)果:通過MTT實驗發(fā)現(xiàn)與陽性對照組相比化合物一對實驗中所有腫瘤細(xì)胞活性較好,且適宜給藥時間為24 h并選用0、2和4μM作為接下來實驗的給藥濃度,而化合物二效果遠(yuǎn)不及陽性對照組�；衔镆贿_(dá)到2μM時就可抑制腫瘤細(xì)胞AGS、Lovo、H... 

【文章來源】：湖北科技學(xué)院湖北省

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

最常見的腫瘤表型之一是葡萄糖代謝的改變

26圖1（A）用MTT方法測定化合物一給藥24h對腫瘤細(xì)胞AGS，C6，H520，H1975，Hela，HuH-7，NC1-N87，MRMT-1和Lovo增殖的影響。（B）用MTT方法測定化合物二給藥24h對腫瘤細(xì)胞AGS，C6，H520，H1975，Hela，HuH-7，NC1-N87，MRMT-1和Lovo增殖的影響。（C）用化合物一處理AGS，MRMT-1和Lovo三種細(xì)胞給藥12、24和36小時后，通過MTT測定法測量細(xì)胞增殖能力。（D）陽性對照氯丙嗪和原料2-氯吩噻嗪（給藥濃度0、5、10、15、17.5、20、25、30、40和60μM））對AGS，MRMT-1和Lovo三種腫瘤細(xì)胞給藥24h的增殖能力的影響。將未給藥的腫瘤細(xì)胞用作為對照組，將其細(xì)胞活力設(shè)置為100％。*P<0.05，**P<0.01和***P<0.001。

272化合物一對腫瘤細(xì)胞平板克隆形成的影響平板克隆形成實驗反映了單個細(xì)胞的集落形成能力。為了檢測化合物一堆腫瘤細(xì)胞單克隆形成的影響我們進行了平板克隆實驗并選用Lovo，MRMT-1，AGS細(xì)胞作為研究對象。除了給藥后濃度為0.5μM外，化合物一對AGS和MRMT-1細(xì)胞單克隆形成有顯著抑制作用，而其所有濃度對lovo細(xì)胞中均表現(xiàn)出明顯抑制作用（圖2A-B）。圖2（A）化合物一（給藥濃度：0、0.5、1和2μM；處理時間7天）對癌細(xì)胞AGS，MRMT-1和Lovo平板克隆形成實驗的影響。（B）克隆形成率統(tǒng)計圖。將未給藥的細(xì)胞作為對照組，將其單克隆形成力設(shè)為100％。***P＜0.001。

【參考文獻(xiàn)】：
碩士論文
[1]氯丙嗪與三氟拉嗪對肺癌的作用及機制研究[D]. 陳波.天津科技大學(xué) 2016



本文編號：3585937