本文關(guān)鍵詞：PEG化FGFR3靶向免疫脂質(zhì)體的制備及表征，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體3(fibroblast growth factor receptor 3,FGFR3)是FGFR家族的一員,在細(xì)胞的增殖分化中起到重要的調(diào)節(jié)作用,與許多腫瘤的發(fā)生存在著密切的關(guān)系,已成為腫瘤治療的一個(gè)潛在靶點(diǎn)。本課題中,我們?cè)O(shè)計(jì)了一種靶向FGFR3且?guī)в邪腚装彼釟埢膯捂溈贵w(single chain fragment variable,Sc Fv),并使其與脂質(zhì)體制備原料偶聯(lián),制備成為免疫脂質(zhì)體,從而達(dá)到藥物對(duì)腫瘤的靶向遞送。我們通過(guò)PCR擴(kuò)增目的基因,通過(guò)分子生物學(xué)手段構(gòu)建p ET-20b-Sc Fv-Cys重組質(zhì)粒,并在大腸桿菌內(nèi)完成可溶性表達(dá)。經(jīng)鎳親和層析柱純化,得到純度95%的目的蛋白,產(chǎn)量可達(dá)每升菌液10mg以上。然后在氮?dú)獗Ｗo(hù)的條件下完成Sc Fv-Cys與脂質(zhì)體制備原料mal PEG2000-DSPE的偶聯(lián),獲得Sc Fv-PEG2000-DSPE。采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)成膜和超聲的方法制備脂質(zhì)體和免疫脂質(zhì)體,經(jīng)濾膜過(guò)濾篩選后,利用激光粒度分析儀和電子顯微鏡檢測(cè),顯示脂質(zhì)體有較好的粒徑和形態(tài)。最后,通過(guò)熒光脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn),顯示免疫脂質(zhì)體對(duì)FGFR3高表達(dá)的膀胱癌細(xì)胞RT112有較明顯的靶向效果,而陰性對(duì)照T24細(xì)胞沒(méi)有明顯的靶向效果,證明免疫脂質(zhì)體的制備成功。綜上所述,我們成功制備了一種PEG化的靶向FGFR3的免疫脂質(zhì)體,并對(duì)其表征,證明了它的靶向效果。作為一個(gè)新型的藥物靶向遞送系統(tǒng),其在腫瘤治療和藥物的開(kāi)發(fā)方面具有良好的應(yīng)用前景。
【關(guān)鍵詞】：成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體3(FGFR3) 單鏈抗體 免疫脂質(zhì)體 藥物靶向遞送系統(tǒng)
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R943
【目錄】：

• 中文摘要4-5
• Abstract5-6
• 英文縮略詞6-9
• 第1章 緒論9-13
• 1 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子及成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體9
• 2 單鏈抗體及其表達(dá)系統(tǒng)9-10
• 3 腫瘤靶向系統(tǒng)的藥物選擇10-11
• 4 脂質(zhì)體和免疫脂質(zhì)體11
• 5 課題設(shè)計(jì)思路11-13
• 第2章 材料與方法13-29
• 1 實(shí)驗(yàn)材料13-17
• 1.1 主要生化和分子生物學(xué)試劑13-14
• 1.2 器材和主要儀器14-16
• 1.3 細(xì)胞16
• 1.4 質(zhì)粒及載體16
• 1.5 實(shí)驗(yàn)室常用溶液16-17
• 2 實(shí)驗(yàn)方法17-29
• 2.1 pET-20b-ScFv-Cys表達(dá)載體的建立17-22
• 2.2 單鏈抗體ScFv-Cys的誘導(dǎo)表達(dá)22-23
• 2.3 單鏈抗體ScFv-Cys蛋白的純化及鑒定23-25
• 2.4 脂質(zhì)體及免疫脂質(zhì)體的制備及表征25-27
• 2.5 脂質(zhì)體及免疫脂質(zhì)體的靶向效果研究27-29
• 第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果29-38
• 1 pET-20b-ScFv-Cys表達(dá)載體的建立29-30
• 2 單鏈抗體ScFv-Cys的表達(dá)30-32
• 3 單鏈抗體ScFv-Cys的純化及鑒定32-33
• 4 脂質(zhì)體及免疫脂質(zhì)體的制備和表征33-36
• 5 脂質(zhì)體及免疫脂質(zhì)體靶向效果研究36-38
• 第4章 討論38-42
• 參考文獻(xiàn)42-45
• 作者簡(jiǎn)介及在校期間科研成果45-46
• 致謝46-47
• 附錄47-48

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 秦海艷;毛曉燕;喬玉玲;李曉進(jìn);趙紅;;單鏈抗體的研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2011年04期

2 楊彤;;新型脂質(zhì)體的研究進(jìn)展[J];醫(yī)藥導(dǎo)報(bào);2009年03期

3 韓薩茹拉;高愛(ài)琴;李金泉;張燕軍;梅步俊;;成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF)研究進(jìn)展[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2009年07期

4 蘇楠;陳林;;FGFR3在骨骼發(fā)育和疾病中作用的研究進(jìn)展[J];國(guó)際遺傳學(xué)雜志;2006年03期

  本文關(guān)鍵詞：PEG化FGFR3靶向免疫脂質(zhì)體的制備及表征，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

，

本文編號(hào)：348997