本文關(guān)鍵詞：厄貝沙坦對(duì)糖尿病大鼠心肌纖維化中MMPs相關(guān)通路的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:探討MMPs通路相關(guān)蛋白MMP-2(matrix metalloproteinases-2)、MMP-14(matrix metalloproteinases-14)及TIMP-1(tissue inhibitor of matrix-1)、TIMP-2(tissue inhibitor of matrix-2)、AGEs-RAGE蛋白在糖尿病大鼠心肌纖維化過(guò)程中的變化,同時(shí)觀(guān)察厄貝沙坦干預(yù)后對(duì)糖尿病大鼠心肌纖維化的影響及MMPs通路及AGEs-RAGE蛋白的變化。方法:1.糖尿病大鼠模型的制備與分組健康雄性SD大鼠隨機(jī)分成三組:正常對(duì)照組(CON)、高糖高脂組(HC)和糖尿病實(shí)驗(yàn)組。正常對(duì)照組(CON)大鼠常規(guī)飲食,其余組大鼠給予高糖高脂飲食,4周后實(shí)驗(yàn)組大鼠一次性腹腔注射鏈脲佐菌素(streptozotocin,STZ)30 mg/kg,建立2型糖尿病模型。剔除不合格大鼠后將成功模型隨機(jī)分為糖尿病組(DM)、厄貝沙坦+糖尿病組(Ir+DM)。Ir+DM組大鼠給予厄貝沙坦(50 mg/kg/d)連續(xù)灌胃至4w、8w、12w。2.觀(guān)察大鼠的一般情況(包括精神狀況、飲食、反應(yīng)、毛發(fā)等)。3.每周測(cè)量大鼠體重(body weight,BW),以便調(diào)節(jié)厄貝沙坦用藥量。4.不同時(shí)段測(cè)定空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)水平,觀(guān)察模型維持情況。5.分別在4w、8w、12w處死各亞組,計(jì)算各組大鼠心體比(heart weight/body weight,H/B)和左室重量指數(shù)(left ventricular weight index,LVWI)。留取動(dòng)脈血測(cè)定各組大鼠血漿甘油三酯(triglyceride,TG)及膽固醇(total cholesterol,TC)水平。6.HE、Masson染色觀(guān)察心肌膠原形態(tài)。觀(guān)察糖尿病大鼠心肌纖維化的病理形態(tài)變化。7.ELISA法檢測(cè)心臟組織I型膠原(Collage type I,col I)、III型膠原(Collage type III,col III)含量,血漿TIMP-1、TIMP-2含量。8.Western blotting檢測(cè)心臟組織AGE、RAGE、col I、MMP-2、TIMP-2、MMP-14蛋白表達(dá)量。結(jié)果:1.大鼠的一般情況模型組大鼠均出現(xiàn)明顯的多食、多飲及體重減輕等糖尿病典型癥狀,體毛凌亂且無(wú)光澤,反應(yīng)遲鈍并且有大鼠出現(xiàn)白內(nèi)障及壞疽等癥狀。治療組一般狀態(tài)均較模型組有所好轉(zhuǎn)。厄貝沙坦給藥后可以改善糖尿病的一般狀況。2.各組大鼠體重(BW)、空腹血糖(FBG)、心體比(H/B)、左室重量指數(shù)(LVWI)、甘油三酯(TC)、總膽固醇(TG)變化情況與CON 4w組相比,HC 4w組BW顯著增加(P0.01),FBG、H/B、LVWI無(wú)明顯變化;與CON 4w組及HC 4w組相比,DM 4w組大鼠BW、H/B、LVWI無(wú)明顯變化,FBG顯著升高(P0.01);與DM 4w組相比,Ir+DM 4w組的BW、H/B、LVWI、FBG無(wú)明顯變化。與CON 8w組相比,HC 8w組BW顯著增加(P0.01),FBG、H/B、LVWI無(wú)明顯變化;與CON 8w組及HC 8w組相比,DM 8w組大鼠BW顯著減輕(P0.01),FBG、H/B、LVWI顯著增加(P0.01);與DM 8w組相比,Ir+DM 8w組的BW明顯升高,H/B、LVWI明顯降低(P0.01),FBG無(wú)明顯變化。12w時(shí)變化趨勢(shì)同8w。與CON組比較,HC組、DM組及Ir+DM組大鼠血漿TG、TC含量均顯著增高(P0.01);與DM組相比,厄貝沙坦治療后兩者含量變化不明顯。3.各組大鼠的心臟病理學(xué)變化HE染色結(jié)果顯示,DM組心肌纖維排列不整齊,纖維斷裂,細(xì)胞間隙增寬。Ir+DM組病理情況有所改善。Masson染色結(jié)果顯示,DM組大鼠心臟間質(zhì)可見(jiàn)大量的膠原纖維異常增生,膠原堆積,或交織呈網(wǎng)狀,分布不均,纖維化程度較高;Ir+DM組間質(zhì)見(jiàn)少量膠原纖維增生,纖維化程度較DM組降低。4.ELISA檢測(cè)各組大鼠心臟組織col I、col III、血漿TIMP-1、TIMP-2含量變化4w時(shí),各組大鼠心肌組織col I、col III含量及col I/col III比值變化不明顯,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P㧐0.05)。與CON 8w組相比,HC 8w組心肌組織中col I、col III含量、col I/col III比值、血漿TIMP-1、TIMP-2含量變化不明顯;與CON8w組及HC 8w組相比,DM 8w組心肌組織中col I、col III含量及col I/col III比值,血漿TIMP-1、TIMP-2含量顯著增加(P0.01);與DM 8w組相比,Ir+DM8w組四者含量均顯著降低(P0.01),且隨病程延長(zhǎng)變化趨勢(shì)越明顯。5.Western blotting檢測(cè)心肌組織col I、AGE、RAGE、MMP-2、TIMP-2、MMP-14蛋白表達(dá)量與CON組相比,HC組各時(shí)間段心肌組織中col I蛋白的表達(dá)水平無(wú)明顯變化;與CON、HC組同時(shí)間段相比,DM 4w心肌組織中col I蛋白的表達(dá)水平變化不明顯,DM 8w大鼠col I蛋白表達(dá)水平顯著增加(P0.01),且隨著病程的延長(zhǎng)呈增高趨勢(shì);厄貝沙坦治療后,col I蛋白表達(dá)水平顯著下降(P0.01)。與CON組相比,HC 12w組心肌組織中AGE、RAGE、MMP-2、TIMP-2、MMP-14蛋白的表達(dá)水平變化不明顯;與HC 12w組相比,DM 12w組大鼠心肌組織AGE、RAGE、TIMP-2、MMP-14蛋白表達(dá)水平顯著增加(P0.01),MMP-2蛋白表達(dá)水平及MMP-2/TIMP-2比值顯著下降(P0.01);給予厄貝沙坦治療后,與DM 12w組相比,AGE、RAGE、TIMP-2、MMP-14蛋白表達(dá)水平顯著下降(P0.01),MMP-2蛋白表達(dá)水平及MMP-2/TIMP-2比值顯著增加(P0.01)。結(jié)論:1.2型糖尿病大鼠心肌纖維化模型復(fù)制成功。2.糖尿病大鼠心肌組織中,隨病程延長(zhǎng)(1)AGE、RAGE、col I蛋白表達(dá)上調(diào),提示膠原纖維合成增加;(2)MMP-2蛋白表達(dá)下調(diào),TIMP-2蛋白表達(dá)上調(diào)及MMP-2/TIMP-2比值下調(diào)提示膠原纖維分解減少;(3)MMP-14蛋白表達(dá)增加提示MMP-14參與纖維細(xì)胞的分化,誘導(dǎo)心室重構(gòu);血漿TIMP-1、TIMP-2水平增加提示左室功能障礙及纖維化加重。3.厄貝沙坦具有改善糖尿病大鼠心肌纖維化的作用,其機(jī)制可能為:(1)下調(diào)AGEs、RAGE蛋白表達(dá),減少膠原合成;(2)上調(diào)MMP-2蛋白表達(dá),下調(diào)TIMP-2蛋白表達(dá),升高M(jìn)MP-2/TIMP-2比值,影響膠原代謝,促進(jìn)膠原降解。
【關(guān)鍵詞】：糖尿病 心肌纖維化 MMP-14 MMP-2 TIMP-2 厄貝沙坦
【學(xué)位授予單位】：蚌埠醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R965
【目錄】：

• 中文摘要6-9
• Abstract9-13
• 引言13-15
• 材料與方法15-23
• 結(jié)果23-33
• 討論33-39
• 結(jié)論39-40
• 致謝40-41
• 參考文獻(xiàn)41-45
• 附錄 A 符號(hào)縮寫(xiě)45-46
• 附錄 B 主要溶液配制46-48
• 附錄 C 個(gè)人簡(jiǎn)歷48-50
• 附錄 D 已發(fā)表及參與文章50-51
• 附錄 E 綜述 糖尿病心肌纖維化機(jī)制的研究進(jìn)展51-57
• 參考文獻(xiàn)55-57

【引證文獻(xiàn)】

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 于影;高琴;張冠軍;王曉梅;陶靜;宗巧鳳;李正紅;;JNK信號(hào)通路在低劑量乙醇干預(yù)糖尿病大鼠心肌纖維化中的作用[A];中國(guó)生理學(xué)會(huì)第24屆全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)暨生理學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2014年

  本文關(guān)鍵詞：厄貝沙坦對(duì)糖尿病大鼠心肌纖維化中MMPs相關(guān)通路的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：348293