本文關(guān)鍵詞：玉米高F值寡肽的制備及生理功能研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：玉米黃粉蛋白是濕法生產(chǎn)玉米淀粉過程中產(chǎn)生的一種下腳料,含有60%以上蛋白質(zhì),由于其口感不佳目前主要應(yīng)用于飼料,利用價值不高,通過酶解法水解玉米黃粉可制備高F值混合寡肽,高F值混合寡肽具有抗疲勞、解酒、治療肝性腦病等生物活性。本實(shí)驗(yàn)利用耐高溫淀粉酶對玉米黃粉進(jìn)行去淀粉處理,利用單因素實(shí)驗(yàn)和響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)探究了最佳水解條件為:pH 6.0,溫度65℃,底物濃度為100 g/L,E/s為110 U/g,作用時間為60 min,在此條件下玉米黃粉中總糖含量減少157.333 mg/g,模型的預(yù)期值為154.503 mg/g。實(shí)驗(yàn)采用堿性蛋白酶、中性蛋白酶和木瓜蛋白酶三種酶復(fù)合法水解預(yù)處理后的玉米黃粉,制得寡肽混合物。利用自動氨基酸分析儀,分析所制備寡肽混合物中各氨基酸含量,計(jì)算F值為28.40。本實(shí)驗(yàn)研究了高F值混合寡肽對小麥生長方面的影響。當(dāng)處理濃度為10μg/mL時,最適合小麥生長。這時小麥葉片的SOD活性比對照組高了9.43%,POD活性高了24.00%,CAT活性高了39.13%�？扇苄蕴呛扛吡�83.32%。葉綠素a的含量高了118.52%,總?cè)~綠素的含量高了52.63%。小麥植株鮮重重了40.00%,飽和鮮重重了28.03%,干重重了23.81%,相對含水量高了10.65%。說明高F值混合寡肽在一定程度上促進(jìn)了小麥的增長。本實(shí)驗(yàn)將制備的高F值混合寡肽,經(jīng)Sephadex G-25、SephadexG-15、CM Sepharose FF凝膠分離,選取最優(yōu)的分離方法SephadexG-15凝膠過濾。通過調(diào)整柱子的規(guī)格、洗脫流速、上樣濃度和上樣量,最終將高F值混合寡肽分為3個組分P1、P2、P3。測得3種組分的分子量范圍2392 u、1516 u、265 u左右。實(shí)驗(yàn)對分離得到的三種組分與高F值混合寡肽功能比較發(fā)現(xiàn),組分P3和高F值混合寡肽在醒酒作用及抗疲勞作用的生活指標(biāo)上沒有差異。本實(shí)驗(yàn)對組分P3采用高效液相色譜分析,將樣品P3用超純水溶解,12000 r/min離心10 min,取上清;系統(tǒng):HPLC-U 3000;色譜柱:Zorbax SB-C18(4.6×250μm);進(jìn)樣體積:10μL;平衡緩沖液:5%的乙腈;洗脫緩沖液:5%的乙腈;流速:0.6 mL/min;檢測:220 nm。得到兩種組分A和B。并通過質(zhì)譜分析得到組分A和B的一級結(jié)構(gòu)為甘氨酸-纈氨酸-亮氨酸(異亮氨酸)(Gly-Val-Leu(Ile))和甲硫氨酸-亮氨酸(異亮氨酸)(Met-Leu(Ile))。一級結(jié)構(gòu)中存在的亮氨酸、異亮氨酸和纈氨酸為支鏈氨基酸,具有保肝護(hù)肝的作用,據(jù)研究表明,甲硫氨酸和甘氨酸同樣具有保護(hù)肝臟的作用,與實(shí)驗(yàn)結(jié)果相對應(yīng)。通過實(shí)驗(yàn)為玉米黃粉制備高F值混合寡肽及分離純化,研究高F值混合寡肽的醒酒、抗疲勞和保肝護(hù)肝作用及其對小麥生長的影響提供了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：玉米黃粉 高F值寡肽 復(fù)合酶解 分離純化 醒酒 抗疲勞 保肝護(hù)肝 小麥生長
【學(xué)位授予單位】：濟(jì)南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R943;R96
【目錄】：

• 研究生導(dǎo)師簡介5-11
• 摘要11-13
• ABSTRACT13-15
• 主要符號表15-17
• 第一章 前言17-23
• 1.1 高F值混合寡肽的定義17
• 1.2 高F值混合寡肽的制備17
• 1.3 玉米黃粉的來源和組成17-18
• 1.4 生物活性肽的分離純化技術(shù)18-20
• 1.4.1 電泳技術(shù)18-19
• 1.4.2 層析技術(shù)19-20
• 1.4.3 膜分離技術(shù)20
• 1.4.4 多種方法結(jié)合使用分離純化生物活性肽20
• 1.5 高F值混合寡肽的生理功能20-22
• 1.5.1 輔助治療肝性腦病21
• 1.5.2 抗疲勞作用21
• 1.5.3 解醉酒功能21
• 1.5.4 改善苯丙酮尿癥21-22
• 1.5.5 延長細(xì)胞自然壽命22
• 1.6 展望22-23
• 第二章 玉米黃粉蛋白的去淀粉處理23-38
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器設(shè)備23-24
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法24-28
• 2.2.1 蛋白酶活測定方法24-26
• 2.2.2 耐高溫淀粉酶酶活測定26
• 2.2.3 總糖含量的測定26
• 2.2.4 玉米黃粉中總糖含量的測定26-27
• 2.2.5 玉米黃粉中蛋白含量測定27
• 2.2.6 醇溶蛋白的提取27
• 2.2.7 耐高溫淀粉酶水解玉米黃粉最優(yōu)條件的確定27-28
• 2.3 結(jié)果與分析28-37
• 2.3.1 蛋白酶活測定結(jié)果28-29
• 2.3.2 玉米黃粉中總糖含量29
• 2.3.3 玉米黃粉中蛋白含量29
• 2.3.4 兩種預(yù)處理方法蛋白回收率的計(jì)算29-30
• 2.3.5 耐高溫淀粉酶水解最優(yōu)條件的確定30-37
• 2.4 結(jié)論37-38
• 第三章 玉米高F值寡肽制備及生理功能研究38-59
• 3.1 玉米高F值混合寡肽對小麥生長影響的實(shí)驗(yàn)材料與儀器設(shè)備39-41
• 3.2 高F值寡肽對小麥生長影響的實(shí)驗(yàn)方法41-46
• 3.2.1 玉米高F值混合寡肽的制備41
• 3.2.2 玉米高F值混合寡肽對小麥生長影響實(shí)驗(yàn)41-46
• 3.2.3 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理46
• 3.3 玉米高F值混合寡肽對小麥生長的影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果46-51
• 3.3.1 混合寡肽F值46-47
• 3.3.2 高F值混合寡肽對小麥葉片SOD、POD、CAT活性的影響47-48
• 3.3.3 高F值混合寡肽對小麥葉片葉綠素含量影響48-49
• 3.3.4 高F值混合寡肽對小麥葉片中可溶性糖含量的影響49-50
• 3.3.5 高F值混合寡肽對小麥葉片相對含水量和干物質(zhì)量的影響50-51
• 3.4 玉米高F值混合寡肽對小鼠生理功能的影響的的實(shí)驗(yàn)材料與儀器設(shè)備51-53
• 3.5 玉米高F值混合寡肽對小鼠生理功能的影響的的實(shí)驗(yàn)方法53-55
• 3.5.1 玉米高F值混合寡肽的制備53
• 3.5.2 玉米高F值寡肽灌胃前處理53
• 3.5.3 玉米高F值寡肽解醉酒生理功能研究53-54
• 3.5.4 玉米高F值寡肽抗疲勞生理功能研究54
• 3.5.5 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理54-55
• 3.6 玉米高F值混合寡肽對小鼠生理功能影響的結(jié)果與分析55-58
• 3.6.1 玉米高F值寡肽對醉酒時間、醉酒率、醒酒時間、死亡率的影響55
• 3.6.2 玉米高F值寡肽與對急性酒精中毒血清ALT、AST的影響55-56
• 3.6.3 玉米高F值寡肽對急性酒精中毒肝組織中MDA、SOD、CAT的影響56-57
• 3.6.4 玉米高F值寡肽對小鼠游泳時間、肝糖原、肌糖原、血尿素、血乳酸含量的影響57-58
• 3.7 結(jié)論58-59
• 第四章 凝膠層析法分離高F值混合寡肽及分離組分生理功能研究59-74
• 4.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器設(shè)備59-61
• 4.2 實(shí)驗(yàn)方法61-64
• 4.2.1 玉米高F值寡肽的制備61
• 4.2.2 最優(yōu)初分離方法的選取61-62
• 4.2.3 SephadexG-15分離純化條件優(yōu)化及分離組分相對分子質(zhì)量測定62-63
• 4.2.4 Sephadex G-15分離純化得到的三種組分P1、P2、P3的解酒生理功能研究63
• 4.2.5 玉米高F值寡肽抗疲勞生理功能研究63-64
• 4.2.6 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理64
• 4.3 結(jié)果與分析64-73
• 4.3.1 高F值混合寡肽的凝膠過濾層析結(jié)果64-66
• 4.3.2 SephadexG-15凝膠過濾層析最優(yōu)條件的確定及其相對分子質(zhì)量的確定66
• 4.3.3 經(jīng)Sephadex-G15分離得到的三個組分P1、P2、P3對醉酒時間、醉酒率、醒酒時間、死亡率的影響66-68
• 4.3.4 經(jīng)Sephadex-G15分離得到的組分P1、P2、P3對急性酒精中毒血清ALT、AST的影響68-69
• 4.3.5 Sephadex-G15分離得到的組分P1、P2、P3對急性酒精中毒肝組織中MDA、SOD、CAT的影響69-71
• 4.3.6 經(jīng)Sephadex-G15分離得到的組分P1、P2、P3對小鼠游泳時間、肝糖原、肌糖原、血尿素、血乳酸含量的影響71-73
• 4.4 結(jié)論73-74
• 第五章 高效液相色譜分離組分P3并研究其保肝護(hù)肝作用74-91
• 5.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器設(shè)備74-75
• 5.2 實(shí)驗(yàn)方法75-77
• 5.2.1 反相高效液相色譜分離純化75
• 5.2.2 組分A和B對酒精引起肝臟病變過程中的作用的研究75-76
• 5.2.3 組分A和B對因酒精發(fā)生肝臟病變后的小鼠生理作用的研究76
• 5.2.4 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理76-77
• 5.3 結(jié)果與分析77-90
• 5.3.1 組分P3的高效液相色譜分析77
• 5.3.2 組分A和組分B對酒精引起肝臟損傷過程中體重指數(shù)、肝臟指數(shù)及死亡率影響77-80
• 5.3.3 組分A和組分B作用酒精引起肝臟損傷過程中血清ALT、GOT活性影響80-81
• 5.3.4 組分A和組分B酒精引起肝臟損傷血清T-CHO、HDL-C、TG和HA含量影響81-83
• 5.3.5 組分A和組分B對酒精引起肝損傷的小鼠肝臟的MDA含量及CAT、SOD活性的影響83-84
• 5.3.6 組分A和組分B對酒精造成肝損傷后小鼠體重、肝臟指數(shù)的影響84-86
• 5.3.7 組分A和組分B對酒精造成肝臟損傷后小鼠血清ALT、GOT活性影響86-87
• 5.3.8 組分A和組分B對酒精造成肝臟損傷后小鼠血清T-CHO、HDL-C、TG和HA含量影響87-88
• 5.3.9 組分A和組分B對酒精造成肝損傷后的小鼠肝臟的MDA含量及CAT、SOD活性的影響88-90
• 5.4 結(jié)論90-91
• 第六章 質(zhì)譜分析91-95
• 6.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器設(shè)備91
• 6.2 實(shí)驗(yàn)方法91-92
• 6.2.1 收集反相高效液相色譜中的含量最高的組分91-92
• 6.3 結(jié)果與分析92-94
• 6.3.1 組分P的質(zhì)譜分析結(jié)果92-94
• 6.4 結(jié)論94-95
• 第七章 結(jié)論與展望95-97
• 參考文獻(xiàn)97-102
• 綜述102-109
• 參考文獻(xiàn)106-109
• 攻讀學(xué)位期間取得的研究成果109-110
• 致謝110

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 王梅,谷文英,沈蓓英;活性碳色譜法分離制備高F值寡肽混合物[J];無錫輕工大學(xué)學(xué)報;1998年04期

  本文關(guān)鍵詞：玉米高F值寡肽的制備及生理功能研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：282027