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對A431細(xì)胞經(jīng)典自噬水平的初步研究

發(fā)布時間:2017-03-26 17:02

  本文關(guān)鍵詞:對A431細(xì)胞經(jīng)典自噬水平的初步研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:探討經(jīng)典自噬誘導(dǎo)劑雷帕霉素和饑餓處理對A431細(xì)胞自噬水平的影響。方法分別將A431細(xì)胞和He La細(xì)胞設(shè)置為對照組、DMSO組、20n M雷帕霉素組、80n M雷帕霉素組、EBSS組。免疫印跡法(Western Blotting)檢測A431細(xì)胞和He La細(xì)胞自噬相關(guān)蛋白LC3A/B、GAPDH、GABARAP的表達水平。吖啶橙(acridine orange,AO)染色觀察不同處理后A431細(xì)胞、He La細(xì)胞自噬體表達水平。結(jié)果:western blot結(jié)果顯示He La細(xì)胞的對照組與DMSO組中LC3II/LC3I的比值相一致,無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);20n M雷帕霉素、80n M雷帕霉素、EBSS的LC3II/LC3I比值比較對照組明顯升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。A431細(xì)胞的對照組與DMSO組中LC3II/LC3I的比值無明顯變化,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);20n M雷帕霉素、80n M雷帕霉素、EBSS的LC3II/LC3I比值跟對照組相比明顯升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。通過SPSS將He La、A431細(xì)胞的GABARAP、LC3I和LC3II進行雙變量的相關(guān)性分析。結(jié)果顯示He La細(xì)胞的LC3I型與GABARAP的pearson相關(guān)性為0.669,說明LC3I和GABARAP為正相關(guān)。LC3II型與GABARAP的pearson相關(guān)性為-0.742,說明負(fù)相關(guān)。A431細(xì)胞LC3I型與GABARAP的pearson相關(guān)性為0.837,說明LC3I和GABARAP為正相關(guān)。LC3II型與GABARAP的pearson相關(guān)性為-0.184,說明負(fù)相關(guān)。He La細(xì)胞吖啶橙染色后在顯微鏡下觀察,可見雷帕霉素組(33.307%±0.715%)跟對照組(14.117%±0.295%)相比自噬陽性細(xì)胞率明顯增高(P0.05);EBSS組(66.097%±1.141%)跟對照組相比,自噬陽性細(xì)胞率明顯增高(P0.05)。A431細(xì)胞雷帕霉素組(23.750%±0.260%)與對照組(15.987%±0.242%)比較,自噬陽性細(xì)胞率明顯增高(P0.05);EBSS組(32.450%±0.488%)跟對照組比較,自噬陽性細(xì)胞率同樣增高(P0.05)。結(jié)論:經(jīng)典自噬誘導(dǎo)劑雷帕霉素和饑餓能夠上調(diào)A431細(xì)胞的自噬水平,通過相關(guān)性分析GABARAP蛋白可能與LC3高度相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】:自噬 A431 GABARAP
【學(xué)位授予單位】:蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R96
【目錄】:
  • 中文摘要4-5
  • Abstract5-8
  • 前言8-9
  • 一 材料與方法9-12
  • 二 結(jié)果12-14
  • 三 討論14-17
  • 參考文獻17-19
  • 附錄19-25
  • 綜述25-45
  • 參考文獻36-45
  • 病例報告45-52
  • 中英文對照縮略詞表52-53
  • 攻讀學(xué)位期間公開發(fā)表的論文53-54
  • 致謝54-56

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  本文關(guān)鍵詞:對A431細(xì)胞經(jīng)典自噬水平的初步研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號:269073

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