對A431細(xì)胞經(jīng)典自噬水平的初步研究
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【摘要】:目的:探討經(jīng)典自噬誘導(dǎo)劑雷帕霉素和饑餓處理對A431細(xì)胞自噬水平的影響。方法分別將A431細(xì)胞和He La細(xì)胞設(shè)置為對照組、DMSO組、20n M雷帕霉素組、80n M雷帕霉素組、EBSS組。免疫印跡法(Western Blotting)檢測A431細(xì)胞和He La細(xì)胞自噬相關(guān)蛋白LC3A/B、GAPDH、GABARAP的表達水平。吖啶橙(acridine orange,AO)染色觀察不同處理后A431細(xì)胞、He La細(xì)胞自噬體表達水平。結(jié)果:western blot結(jié)果顯示He La細(xì)胞的對照組與DMSO組中LC3II/LC3I的比值相一致,無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);20n M雷帕霉素、80n M雷帕霉素、EBSS的LC3II/LC3I比值比較對照組明顯升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。A431細(xì)胞的對照組與DMSO組中LC3II/LC3I的比值無明顯變化,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);20n M雷帕霉素、80n M雷帕霉素、EBSS的LC3II/LC3I比值跟對照組相比明顯升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。通過SPSS將He La、A431細(xì)胞的GABARAP、LC3I和LC3II進行雙變量的相關(guān)性分析。結(jié)果顯示He La細(xì)胞的LC3I型與GABARAP的pearson相關(guān)性為0.669,說明LC3I和GABARAP為正相關(guān)。LC3II型與GABARAP的pearson相關(guān)性為-0.742,說明負(fù)相關(guān)。A431細(xì)胞LC3I型與GABARAP的pearson相關(guān)性為0.837,說明LC3I和GABARAP為正相關(guān)。LC3II型與GABARAP的pearson相關(guān)性為-0.184,說明負(fù)相關(guān)。He La細(xì)胞吖啶橙染色后在顯微鏡下觀察,可見雷帕霉素組(33.307%±0.715%)跟對照組(14.117%±0.295%)相比自噬陽性細(xì)胞率明顯增高(P0.05);EBSS組(66.097%±1.141%)跟對照組相比,自噬陽性細(xì)胞率明顯增高(P0.05)。A431細(xì)胞雷帕霉素組(23.750%±0.260%)與對照組(15.987%±0.242%)比較,自噬陽性細(xì)胞率明顯增高(P0.05);EBSS組(32.450%±0.488%)跟對照組比較,自噬陽性細(xì)胞率同樣增高(P0.05)。結(jié)論:經(jīng)典自噬誘導(dǎo)劑雷帕霉素和饑餓能夠上調(diào)A431細(xì)胞的自噬水平,通過相關(guān)性分析GABARAP蛋白可能與LC3高度相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】:自噬 A431 GABARAP
【學(xué)位授予單位】:蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R96
【目錄】:
- 中文摘要4-5
- Abstract5-8
- 前言8-9
- 一 材料與方法9-12
- 二 結(jié)果12-14
- 三 討論14-17
- 參考文獻17-19
- 附錄19-25
- 綜述25-45
- 參考文獻36-45
- 病例報告45-52
- 中英文對照縮略詞表52-53
- 攻讀學(xué)位期間公開發(fā)表的論文53-54
- 致謝54-56
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