發(fā)布時(shí)間：2017-03-26 02:06

  本文關(guān)鍵詞：樹枝狀大分子聚合物包載sh-miR-34a抗惡性黑素瘤增殖作用研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：黑色素瘤(malignant melanoma,MM)是一種由黑色素細(xì)胞引起進(jìn)而累及全身的惡性腫瘤,其轉(zhuǎn)移發(fā)生較早、死亡率較高。目前在我國,惡性黑色素瘤的發(fā)病率呈現(xiàn)出逐年上升的趨勢。由于相關(guān)知識的缺乏,患者在就診時(shí)往往病情已經(jīng)惡化,因此黑素瘤的治療結(jié)果并不理想。臨床上傳統(tǒng)治療惡性黑素瘤的方法包括手術(shù)和化療等,如何利用新技術(shù)克服傳統(tǒng)治療過程中存在的副作用大、患者順應(yīng)性差等難題是目前研究的熱點(diǎn)。同時(shí)近年來,隨著人們對腫瘤相關(guān)發(fā)病機(jī)制研究的不斷深入以及基因工程技術(shù)和分子生物學(xué)的發(fā)展,針對惡性黑素瘤基因治療的研究逐漸成為惡性黑素瘤治療領(lǐng)域的熱門�；蛑委熇猛庠凑；�,將其導(dǎo)入基因缺陷和異常的生物體內(nèi),進(jìn)而達(dá)到治療的目的。本課題利用樹枝狀大分子材料聚酰胺-胺(PAMAM)作為非病毒載體材料,采用可以表達(dá)miR-34a的質(zhì)粒sh-miR-34a作為基因藥物,應(yīng)用RNAi技術(shù)研究惡性黑素瘤的治療方案。研究利用靜電復(fù)合原理構(gòu)建PAMAM/sh-miR-34a納米復(fù)合物,對其粒徑和電位進(jìn)行表征后發(fā)現(xiàn)在N/P=20時(shí),PAMAM/sh-miR-34a納米復(fù)合物的粒徑為180 nm左右,電位為30 mV左右。瓊脂糖凝膠電泳顯示PAMAM在N/P=5時(shí)可以有效包裹基因藥物sh-miR-34a。隨后在體外細(xì)胞水平對PAMAM/sh-miR-34a納米復(fù)合物的抗腫瘤作用進(jìn)行了考察。攝取實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)A375細(xì)胞對PAMAM/sh-miR-34a納米復(fù)合物的攝取高達(dá)80%以上。CCK8實(shí)驗(yàn)顯示PAMAM/sh-miR-34a納米復(fù)合物可以在體外有效抑制A375細(xì)胞的增殖,A375細(xì)胞的存活率僅為61.2±2.5%。細(xì)胞遷移和侵襲實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示A375細(xì)胞的遷移和侵襲可以被PAMAM/sh-mi R-34a納米復(fù)合物有效抑制。本研究最后在體內(nèi)對PAMAM/sh-miR-34a納米復(fù)合物的抗腫瘤作用進(jìn)行了考察。利用皮下注射法構(gòu)建了A375裸鼠移植瘤模型,通過尾靜脈注射給藥的方式考察了PAMAM/sh-miR-34a納米復(fù)合物的體內(nèi)作用,結(jié)果發(fā)現(xiàn)PAMAM/sh-miR-34a在體內(nèi)也可以抑制A375移植瘤的生長,PAMAM/sh-miR-34a組實(shí)驗(yàn)結(jié)束后的腫瘤體積僅為對照組的74.8%,腫瘤質(zhì)量僅為對照組的66.9%。通過本課題的研究,成功構(gòu)建了PAMAM/sh-miR-34a納米給藥系統(tǒng),詳細(xì)表征了其電位、粒徑、包裹能力以及體外抗A375細(xì)胞增殖作用,sh-miR-34a抑制A375細(xì)胞生長的機(jī)制為抑制磷酸化的蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases)ERK1和ERK2以及磷酸化的AKT激酶。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果也表明sh-miR-34a在荷瘤裸鼠體內(nèi)也有較為理想的抑瘤作用。
【關(guān)鍵詞】：惡性黑素瘤 樹枝狀大分子 基因治療 sh-miR-34a 納米給藥系統(tǒng)
【學(xué)位授予單位】：河北北方學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R96
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 英文縮寫9-10
• 前言10-13
• 材料與方法13-20
• 結(jié)果20-24
• 附圖24-32
• 討論32-35
• 結(jié)論35-36
• 參考文獻(xiàn)36-39
• 綜述 非病毒類載體材料靶向治療黑色素瘤研究進(jìn)展39-48
• 參考文獻(xiàn)46-48
• 致謝48-49
• 個(gè)人簡歷49

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前7條

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本文編號：268095