本文關(guān)鍵詞：新型樣品前處理技術(shù)在藥物制劑復(fù)雜基質(zhì)中的研究與應(yīng)用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：制備安全、有效、穩(wěn)定、使用方便的藥物制劑,一直以來(lái)是人們追尋的目標(biāo)。當(dāng)代的藥物的制劑種類繁多,組分復(fù)雜,如何評(píng)價(jià)藥品的質(zhì)量?jī)?yōu)劣,離不開具有高分離效能的分析方法作為“眼睛”加以判斷。藥物的制劑除含有活性成分外,還含有多種附加劑,附加劑的出現(xiàn)有時(shí)會(huì)影響待測(cè)組分的測(cè)定。待分析組分往往存在于復(fù)雜的藥物輔料基質(zhì)中,尤其是當(dāng)基質(zhì)中含有大分子物質(zhì)時(shí)。這些共存組分及大分子物質(zhì)的存在通常會(huì)導(dǎo)致分析方法的耐受性降低,甚至?xí)绊懛椒ǖ臏?zhǔn)確性及精密度,這就需要建立一種有效的分析樣品前處理方法。在最大限度消除共存基質(zhì)干擾的同時(shí),進(jìn)一步地提高分析靈敏度,以更好地保證分析結(jié)果的準(zhǔn)確性,表征藥物制劑質(zhì)量。傳統(tǒng)制劑,如片劑、顆粒劑、注射劑等,其基質(zhì)組成比較簡(jiǎn)單,干擾成分較少,常用的提取分離技術(shù),如溶劑萃取、超聲萃取、蛋白沉淀等,即可實(shí)現(xiàn)待測(cè)組分與基質(zhì)的分離。然而,對(duì)于基質(zhì)成分較為復(fù)雜的現(xiàn)代制劑,如脂質(zhì)體,磷脂雙分子層膜的使用,提高了藥物的可控釋放性以及在體內(nèi)的靶向給藥,但是,膜的非穩(wěn)定性在一定程度上加大了準(zhǔn)確表征其質(zhì)量的難度。如何在最大限度維持脂質(zhì)體原始穩(wěn)定狀態(tài)下,有效地分離未包封藥物,準(zhǔn)確表征脂質(zhì)體質(zhì)量,一直是分析工作者面臨的難題。包封率是表征藥物脂質(zhì)體質(zhì)量的重要指標(biāo)。用于脂溶性藥物脂質(zhì)體分離時(shí),由于未包封藥物不溶于水,在水相中容易形成微顆�；蚍肿泳奂癄顟B(tài),可能會(huì)影響包封率的測(cè)定準(zhǔn)確性。課題系統(tǒng)性研究了4種樣品前處理方法(SEC、SPE、CF-UF、HF-CF-UF)進(jìn)行脂溶性藥物脂質(zhì)體包封率表征的特征。比較了四種方法在表征脂溶性藥物脂質(zhì)體方面各自的局限性,為正確選擇脂溶性藥物脂質(zhì)體包封率測(cè)定方法提供了依據(jù)。藥物的質(zhì)量不僅要保證藥效學(xué)成分質(zhì)與量,毒性成分的表征也是藥物質(zhì)量的重要參數(shù),其是保障藥物安全性的重大問題。中成藥是由多味藥材或藥材提取物制得,通常其顏色較重,氣味濃烈,化學(xué)成分極其復(fù)雜;其制造、貯存及流通過程中,易發(fā)生霉變,產(chǎn)生對(duì)人體有害的真菌毒素,其中黃曲霉毒素對(duì)人體的毒性不容忽視。課題研究了在中成藥復(fù)雜的化學(xué)成分中分離純化黃曲霉毒素的樣品前處理技術(shù),建立了一個(gè)新穎的多級(jí)復(fù)合前處理技術(shù),力爭(zhēng)除去中成藥中不同基源的雜質(zhì)干擾,使中成藥中的AFB1、AFB2、AFG1、AFG2得到了有效的純化富集;以小兒清熱止咳口服液為代表,評(píng)估了所建立中成藥樣品前處理效率。結(jié)果表明該法簡(jiǎn)單、快速、成本低廉且方法重現(xiàn)性較好、能有效地凈化基質(zhì),為現(xiàn)代中成藥中痕量AF的純化富集及檢測(cè)提供了一個(gè)可借鑒的手段。第一部分脂溶性藥物脂質(zhì)體質(zhì)量表征的理論性研究目的:系統(tǒng)性研究凝膠色譜法(SEC)、固相萃取法(SPE)、離心超濾法(CF-UF)及中空纖維離心超濾法(HF-CF-UF)進(jìn)行脂溶性藥物脂質(zhì)體包封率表征的特性,為正確選擇脂溶性成分脂質(zhì)體包封率測(cè)定方法提供依據(jù)。方法:以兩性霉素B脂質(zhì)體為代表。采用SEC法、SPE法、CF-UF法及HF-CF-UF法分析測(cè)定了包封率;分析了4種樣品前處理方法包封率測(cè)定結(jié)果的差異;采用模擬拆方的方法,研究了SPE法產(chǎn)生結(jié)果不確定性的成因,并進(jìn)一步通過實(shí)驗(yàn)究其原因;在CF-UF法及HF-CF-UF法中,均通過比較不同濃度對(duì)照溶液的回收率,分析了包封率測(cè)定結(jié)果出現(xiàn)偏差的原因。實(shí)驗(yàn)采用Diamonsil C18柱(250×4.6 mm,5μm);流動(dòng)相為乙腈-0.02mol·L-1乙二胺四乙酸二鈉(38:62,v/v);流速為1.0 m L·min-1,在405 nm處進(jìn)行Am B檢測(cè)。結(jié)果:SEC法測(cè)定的包封率為93%左右;SPE法測(cè)定結(jié)果僅為6~13%,主要是由于固定相填料C18及HLB對(duì)脂質(zhì)體中的穩(wěn)定劑具有較強(qiáng)的吸附作用;CF-UF法中未檢測(cè)到游離藥物,超濾前后樣品管內(nèi)溶液濃度幾乎不變,而隨著對(duì)照品濃度的增加,超濾管內(nèi)溶液回收率降低,說明存在濃差極化現(xiàn)象;HF-CF-UF法包封率測(cè)定結(jié)果為99%,藥物在0.67~21.4μg·m L-1的濃度范圍內(nèi),回收率均大于97%;當(dāng)大于25.0μg·m L-1時(shí),回收率降低至85%左右。脂溶性藥物微晶顆�；蚍肿泳奂w的存在是回收率驟降的原因。結(jié)論:HF-CF-UF法能夠在不破壞脂質(zhì)體原始穩(wěn)定的存在環(huán)境下,實(shí)現(xiàn)了大分子脂質(zhì)體與未包封藥物的有效分離,更適合于游離濃度較低的脂溶性藥物脂質(zhì)體的包封率的測(cè)定;對(duì)于SEC法,在保證SEC柱能夠準(zhǔn)確分離未包封藥物的前提下,更適用于水溶性藥物脂質(zhì)體包封率的分析;SPE(C18及HLB)法不適用于以去氧膽酸鈉和膽固醇為穩(wěn)定劑的脂質(zhì)體的包封率測(cè)定;CF-UF法不適合于分析脂溶性藥物脂質(zhì)體的包封率。第二部分新型多級(jí)復(fù)合前處理方法用于中成藥中黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2的測(cè)定目的:建立了一個(gè)新型的多級(jí)復(fù)合前處理技術(shù),力爭(zhēng)除去中成藥中不同基源的雜質(zhì)干擾,使中成藥中的AFB1、AFB2、AFG1、AFG2得到了有效的純化富集,為現(xiàn)代中成藥中痕量AF的純化富集及檢測(cè)提供了一個(gè)可借鑒的手段。方法:樣品前處理方法的研究:(1)純化過程考察了提取比例和提取時(shí)間,脫水劑種類和加入量以及吸附劑種類和加入量對(duì)純化效率的影響。(2)萃取過程以黃曲霉毒素G1為代表,以甲醇濃度、萃取時(shí)間及氧化石墨烯的加入量3個(gè)因素為自變量,黃曲霉毒素的峰面積為因變量,采用BBD設(shè)計(jì)3因素3水平共17個(gè)試驗(yàn)點(diǎn)的響應(yīng)曲面分析實(shí)驗(yàn),進(jìn)行線性回歸和二次項(xiàng)擬合,優(yōu)化萃取條件。同時(shí)還考察了氯化鈉的加入量對(duì)于萃取效率的影響。檢測(cè)手段:采用phenomenexc#174;C18柱(250×4.60 mm,5μm)進(jìn)行分離,流動(dòng)相為甲醇-乙腈-磷酸溶液(p H=3.5)(3:3:5,v/v),以0.8m L·min-1的流速,進(jìn)入到柱后衍生系統(tǒng)。衍生溶液為0.05%碘溶液(取碘0.5 g,加入甲醇100 m L使溶解,用水稀釋定容至1000 m L,即得),流速為0.3 m L·min-1,衍生反應(yīng)溫度70℃。熒光檢測(cè):激發(fā)波長(zhǎng)為360 nm,發(fā)射波長(zhǎng)為450 nm。方法學(xué)考察:分別進(jìn)行了線性、準(zhǔn)確度、精密度、LOD及LOQ考察。結(jié)果:純化過程的最優(yōu)條件為:甲醇-樣品溶液的最優(yōu)提取比例為9:1,水浴超聲提取10 min,脫水劑為無(wú)水硫酸鎂,最優(yōu)加入量為1.0 g,吸附劑為中性氧化鋁,最優(yōu)加入量為0.5 g。萃取過程:甲醇濃度:12.5%,萃取時(shí)間:15 min,氧化石墨烯的加入量3.0 mg。AFB1、AFB2、AFG1和AFG2分別在0.125~2.50 ng·m L-1、0.0625~0.625 ng·m L-1、0.125~2.50ng·m L-1、0.0625~0.625 ng·m L-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,回收率大于83.0%,RSD小于3.7%。AFB1、AFB2、AFG1和AFG2的最低檢測(cè)限為0.027、0.020、0.041、0.021 ng·m L-1。結(jié)論:該方法操作簡(jiǎn)單,定量準(zhǔn)確,耐受性強(qiáng)且方法重現(xiàn)性較好,能有效凈化基質(zhì),為現(xiàn)代中成藥中痕量AF的純化富集及檢測(cè)提供了一個(gè)可借鑒的手段。
【關(guān)鍵詞】：分離富集 藥物制劑 脂質(zhì)體 包封率 中成藥 黃曲霉毒素 多級(jí)復(fù)合前處理技術(shù) 氧化石墨烯
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R943
【目錄】：

• 中文摘要4-8
• 英文摘要8-13
• 英文縮寫13-14
• 引言14-17
• 第一部分 脂溶性藥物脂質(zhì)體質(zhì)量表征的理論性研究17-33
• 前言17-18
• 材料與方法18-20
• 結(jié)果20-22
• 附圖22-26
• 附表26-28
• 討論28-29
• 小結(jié)29-30
• 參考文獻(xiàn)30-33
• 第二部分 新型多級(jí)復(fù)合前處理方法用于中成藥中黃曲霉毒素B1、B2、 G1、G2的測(cè)定33-55
• 前言33-34
• 材料與方法34-37
• 結(jié)果37-39
• 附圖39-44
• 附表44-47
• 討論47-51
• 小結(jié)51
• 參考文獻(xiàn)51-55
• 結(jié)論55-56
• 綜述 氧化石墨烯在樣品前處理技術(shù)中的應(yīng)用進(jìn)展56-68
• 參考文獻(xiàn)63-68
• 致謝68-69
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷69-70

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

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3 郝愛魚;趙麗元;劉英慧;王戈;金紅宇;畢秀玲;門啟鳴;;HPLC柱后光衍生熒光法測(cè)定中藥飲片中黃曲霉毒素殘留量[J];藥物分析雜志;2012年12期

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本文編號(hào)：264542