本文關(guān)鍵詞：Myocilin蛋白對原發(fā)性開角型青光眼小梁網(wǎng)細(xì)胞FN表達(dá)及細(xì)胞遷移與粘附的影響

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【摘要】：目的建立原發(fā)性開角型青光眼（Primary open angle glaucoma,POAG）小梁網(wǎng)細(xì)胞體外原代培養(yǎng)體系；分析不同濃度重組myocilin蛋白對POAG小梁網(wǎng)細(xì)胞纖維連接蛋白(fibronectin，F(xiàn)N)表達(dá)及對細(xì)胞遷移、粘附功能的影響，探討myocilin蛋白與原發(fā)性開角型青光眼發(fā)病的關(guān)系。 方法運(yùn)用組織塊培養(yǎng)法，進(jìn)行體外細(xì)胞原代和傳代培養(yǎng)，取傳3代的小梁網(wǎng)細(xì)胞分別加入含重組myocilin蛋白終濃度為0ug/m（l對照組）、0.5ug/ml、1ug/ml、1.5ug/ml、2ug/ml、2.5ug/ml的無血清培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)24小時后，運(yùn)用Westernblot、Elisa法分別檢測小梁網(wǎng)細(xì)胞內(nèi)以及細(xì)胞培養(yǎng)液中FN的表達(dá)水平；并運(yùn)用Transwell小室法、CCK-8法檢測myocilin蛋白對所培養(yǎng)傳3代POAG小梁網(wǎng)細(xì)胞遷移、粘附的影響。 結(jié)果1、組織塊長出的細(xì)胞經(jīng)倒置顯微鏡觀察、免疫細(xì)胞化學(xué)抗原表達(dá)檢測，證實體外培養(yǎng)細(xì)胞為POAG小梁網(wǎng)細(xì)胞；2、Western blot檢測結(jié)果: FN/β-actin比值分別為33.4±1.0、28.9±0.8、21.6±0.9、15.9±1.1、11.9±0.8。0.5ug/ml組與對照組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.09，P0.05）；1.0ug/ml、1.5ug/ml、2ug/ml、2.5ug/ml組與對照組的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P均為0.00，P0.05)。3、Elisa法檢測各組細(xì)胞培養(yǎng)液中FN濃度為：0.4654±0.0039ug/ml、0.4596±0.0032ug/ml、0.4216±0.0037ug/ml、0.4214±0.0039ug/ml、0.4043±0.0039ug/ml、0.3806±0.0071ug/ml。0.5ug/ml組與對照組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.12，P0.05）；1.0ug/ml、1.5ug/ml、2ug/ml、2.5ug/ml組與對照組的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P均為0.00，P0.05)。4、Transwell小室法檢測結(jié)果顯示：對照組和實驗組細(xì)胞數(shù)分別為16.40±4.0373，8.60±2.0736，實驗組細(xì)胞遷移數(shù)較對照組少，實驗組與對照組的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.005，P0.05）。5、運(yùn)用CCK-8法檢測各組細(xì)胞吸光度值的均值分別為1.9814±0.1624、1.8848±0.0267、1.4895±0.0916、1.4120±0.1087、1.3392±0.1391、1.0310±0.0639。0.5ug/ml組與對照組相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.30，，P0.05）；1ug/ml、1.5ug/ml、2ug/ml、2.5ug/ml組與對照組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P值均為：0.00，P0.05）。 結(jié)論1、myocilin蛋白能抑制POAG小梁網(wǎng)細(xì)胞纖維連接蛋白的表達(dá)，并呈現(xiàn)一定的劑量依耐性；2、myocilin蛋白可降低POAG小梁網(wǎng)細(xì)胞的遷移和粘附能力。
【關(guān)鍵詞】：細(xì)胞培養(yǎng) myocilin蛋白 原發(fā)性開角型青光眼 遷移小室 粘附
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R775.2
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-7
• 英文縮略詞表7-8
• 引言8-10
• 一 材料10-14
• 二 方法14-22
• 三 結(jié)果22-28
• 四 討論28-33
• 全文結(jié)論33-34
• 參考文獻(xiàn)34-36
• 致謝36-37
• 綜述37-46
• 參考文獻(xiàn)43-46

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

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本文編號：765984