喉癌是耳鼻喉科常見(jiàn)的惡性腫瘤,分子機(jī)制仍未明確。長(zhǎng)鏈非編碼RNA(long non-coding RNA,lncRNA)能通過(guò)包括表觀遺傳機(jī)制在內(nèi)的多種作用機(jī)制參與多種腫瘤的發(fā)生及發(fā)展。研究發(fā)現(xiàn)類胰島素生長(zhǎng)因子I受體(insulin-like growth factor 1 receptor,IGF1R)及其配體在大多數(shù)惡性腫瘤中表達(dá)上調(diào),且參與腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)、演變、轉(zhuǎn)移侵襲等。IRAIN(IGF1 receptor antisense imprinted noncoding RNA)是位于IGF1R啟動(dòng)子區(qū)域的一條的反義lncRNA,于2011年首次發(fā)現(xiàn)。目的:本實(shí)驗(yàn)旨在探索IGF1R反義長(zhǎng)鏈非編碼RNA-IRAIN是否影響喉癌的發(fā)生與發(fā)展,從而為診斷、靶向治療、基因治療喉癌及其預(yù)后提供新的分子機(jī)制思路。方法:收集吉林大學(xué)第二醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科2016年8月至2017年8月接受UPPP術(shù)(懸雍垂-腭-咽成形術(shù))6例患者的正常咽部黏膜和2014年8月至2017年8月37名行手術(shù)治療喉癌患者的癌及癌旁組織標(biāo)本。1)通過(guò)對(duì)32例喉癌組織及6例正常咽部黏膜進(jìn)行DNA提取、gDNA送生物公司完成直接測(cè)序,根據(jù)gDNA測(cè)序結(jié)果選取出IRAIN SNP位點(diǎn)(rs8034564)為雜合峰的喉癌標(biāo)本及正常咽部黏膜標(biāo)本。2)接著對(duì)DNA測(cè)序結(jié)果為雜合子的正常咽部黏膜、喉癌患者的癌和癌旁組織進(jìn)行RNA提取、cDNA測(cè)序。3)根據(jù)基因測(cè)序結(jié)果,分析等位基因表達(dá)的特點(diǎn),明確該基因的印記表達(dá)狀態(tài)。4)實(shí)時(shí)熒光定量PCR研究IRAIN和IGF1R在喉癌及癌旁組織中的表達(dá)。5)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析IRAIN和IGF1R在喉癌、癌旁組織中的表達(dá)關(guān)系及IRAIN與喉癌患者臨床病理特征之間的關(guān)系。結(jié)果:對(duì)32例喉癌組織和6例正常咽部黏膜的gDNA測(cè)序,結(jié)果喉癌組織SNP位點(diǎn)為雜合子的有17例,正常咽部黏膜5例。隨后17例喉癌患者癌、癌旁組織及5例正常咽部黏膜的cDNA測(cè)序結(jié)果顯示,IRAIN在喉癌組織、癌旁組織和正常咽部黏膜中均呈雙等位基因表達(dá)。IGF1R在喉癌組織中較癌旁組織普遍呈高表達(dá)(P0.05)。IRAIN在喉癌組織的表達(dá)低于癌旁組織(P0.05);喉癌患者的年齡、臨床分型、TNM分期、病理分化程度、是否淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等方面與IRAIN的表達(dá)無(wú)密切相關(guān)(P0.05)。結(jié)論:(1)IRAIN在喉癌、癌旁及正常咽部黏膜中均呈雙等位基因表達(dá),即IRAIN等位基因在正常咽部黏膜、喉癌組織及癌旁組織中呈非印記表達(dá)。(2)相較于癌旁組織IGF1R在喉癌組織中普遍呈高表達(dá),提示IGF1R可能與喉癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。(3)在喉癌組織里IRAIN表達(dá)低于癌旁組織,提示IRAIN可能作為抑癌因素參與喉癌的發(fā)生;喉癌患者的年齡、臨床分型、TNM分期、病理分化程度、是否淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等方面與IRAIN的表達(dá)無(wú)密切相關(guān)。(4)IGF1R反義長(zhǎng)鏈非編碼RNA-IRAIN印記表達(dá)可能存在組織特異性。
【學(xué)位單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R739.65
【部分圖文】：

圖 1.1 IGF-IR 途徑及其組分的三個(gè)調(diào)節(jié)水平（自參考文獻(xiàn)[26]）。A:內(nèi)分泌水平上的系統(tǒng)調(diào)節(jié)。GH-IGF-IGFBP 軸由產(chǎn)生 GH 的垂體引導(dǎo)。GH刺激肝臟分泌其主要效應(yīng)分子 IGF1、IGF2 和 IGFBPs。B：在組織水平上，游離配體（IGF1 和 IGF2）的水平受 6 種不同 IGFBP 和 IGFBP 相關(guān)蛋白的調(diào)節(jié)；其中IGFBP 對(duì)生長(zhǎng)因子具有高親和力，IGFBP 相關(guān)蛋白對(duì) IGF1 和 IGF2 具有較低的親和力。前體由特定的蛋白酶調(diào)節(jié)。Insulin、IGF1、IGF2 與不同親和力的受體（胰

圖 2.1 不同喉癌組織 gDNA PCR 產(chǎn)物電泳圖.5.1.6 gDNA PCR 產(chǎn)物基因測(cè)序及 IRAIN 基因 SNP 位點(diǎn)將上述電泳后凝膠上所呈現(xiàn)的條帶于紫外燈下進(jìn)行切取，送至司進(jìn)行基因測(cè)序。測(cè)序結(jié)果中的 2 個(gè) SNP 位點(diǎn)，有一個(gè)位點(diǎn)為雜

不同喉癌、癌旁及正常咽部黏膜中IRAIN表達(dá)區(qū)域內(nèi)含有SNP位點(diǎn)（rs8034564）片段的RT-PCR反應(yīng)產(chǎn)物電泳圖

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前8條

1 郭海麗;羅花南;任曉勇;;長(zhǎng)鏈非編碼RNA與喉癌的相關(guān)性[J];國(guó)際耳鼻咽喉頭頸外科雜志;2017年04期

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相關(guān)博士學(xué)位論文 前2條

1 康麗花;一種全新的長(zhǎng)鏈非編碼RNA IRAIN在乳腺癌中的印記表達(dá)及作用機(jī)制研究[D];吉林大學(xué);2015年

2 孫京男;IGF1R相關(guān)長(zhǎng)鏈非編碼RNA-IRAIN在惡性腫瘤中的作用及機(jī)制研究[D];吉林大學(xué);2014年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 李靖;長(zhǎng)鏈非編碼RNA-IRAIN在喉鱗癌中的表達(dá)和意義[D];吉林大學(xué);2016年

本文編號(hào)：2810900