發(fā)布時間：2020-07-21 11:25

【摘要】：目的觀察研究缺氧狀態(tài)下,人視網(wǎng)膜色素上皮(hRPE)細(xì)胞(ARPE-19)中音猥因子(Shh)與血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的表達(dá)關(guān)系。方法傳代培養(yǎng)hRPE細(xì)胞,取對數(shù)生長期3～6代細(xì)胞用于實驗。將hRPE細(xì)胞分為正常對照組、缺氧實驗組及環(huán)巴明抑制組。缺氧組加入100 μmol/LCoC12,環(huán)巴明抑制組于制作缺氧狀態(tài)前l(fā)h加入20 μmol/L的環(huán)巴明進(jìn)行預(yù)處理。3組細(xì)胞培養(yǎng)4、8、12、24 h。采用熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測3組hRPE細(xì)胞中Shh、VEGF mRNA表達(dá);酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測3組細(xì)胞培養(yǎng)上清液中Shh、VEGF蛋白表達(dá)。采用Pearson相關(guān)性分析法分析缺氧實驗組hRPE細(xì)胞中Shh、VEGF mRNA表達(dá)與蛋白表達(dá)之間的關(guān)系。結(jié)果正常對照組可見少量Shh、VEGF mRNA及蛋白表達(dá);缺氧實驗組Shh、VEGF mRNA及蛋白表達(dá)較較正常對照組顯著增加,差異有統(tǒng)計學(xué)差異(F=178.364 P0.01;F=183.732 P0.01;F= 77.456 P0.01;F=91.572 P0.01;);且較環(huán)巴明抑制組明顯增加,差異有統(tǒng)計學(xué)差異(F值=68.745 P0.01;F=121.834,P0.01)。相關(guān)性分析結(jié)果顯示,缺氧實驗組hRPE細(xì)胞中VEGF蛋白表達(dá)與Shh蛋白表達(dá)呈正相關(guān)(r= 0.942,P0.05);VEGF mRNA表達(dá)與Shh mRNA表達(dá)呈正相關(guān)(r= 0.970,P0.01)。環(huán)巴明抑制組hRPE細(xì)胞中VEGF mRNA表達(dá)與Shh mRNA表達(dá)無相關(guān)性(r = 0.915,P0.05)。結(jié)論音猬因子(Shh)可能參與了缺氧狀態(tài)下人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞中VEGF的表達(dá),且VEGF和Shh的表達(dá)呈正相關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：濱州醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R774.1
【圖文】：

逡逑差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（Ｐ邋＜邋０．邋０１）。（見表２、圖４、圖５）逡逑表２細(xì)胞培養(yǎng)時間與ＶＥＧＦ、ＳｈｈｍＲＮＡ的表達(dá)含量關(guān)系逡逑時間（ｈ）邐ＶＥＧＦｍＲＮＡ邋（邋ｘ土邋ｓ）邐Ｐ邐ＳｈｈｍＲＮＡ邋（邋ｘ士ｓ）邐Ｐ逡逑０邐４７４８８．８３土３２６１．４４４邐０．４１１０１２７士邋０．２１５４逡逑４邐６９１８７．４３土邋１６２９．１７５邐＜０．０１邐１．４２７２２６士邋０．３９１７邐＜０．０１逡逑８邐８５７６９．４７±３５３１．５４１邐＜０．０１邐３．３６８７５３±０．４３０１邐＜０．０１逡逑１２邐１０９２４９．８±２６３７．８４９邐＜０．０１邐３．６１２５４９±０．６６６９邐＜０．０１逡逑邐２４邐１２７５７２．４土５０５２．０２７邐＜０．０１邐５．１５９７０５＾０．５１１５邐＜０，０１逡逑ＶＥＧＦ邋ｍＲＮＡ實驗組表達(dá)曲線逡逑１４００００逡逑Ｖ邋＝邋３２６３．１ｘ－＾邋Ｓ＆６Ｓ８＊－－逡逑１２００００邋？逡逑S緬五五義希保埃埃埃埃板�？逦？？？辶x襄五五義希福埃埃埃板

本文編號：2764342