【摘要】：研究背景 糖尿病視網(wǎng)膜病變(Diabetic retiopathy, DR)位居不可逆致盲性眼底病的首位,大鼠模型廣泛應(yīng)用于防治DR的藥物、基因?qū)嶒?yàn)中。以往的研究證實(shí),大鼠DR的典型病理改變?yōu)橐暰W(wǎng)膜血管滲漏、周細(xì)胞減少、毛細(xì)血管閉塞等特征,準(zhǔn)確高效地觀察到這些改變,無疑對(duì)理解DR、高效合理地應(yīng)用本模型有著重要意義。但目前用無色素大鼠(如Sprague Dawley大鼠、Wister大鼠等)制作的DR模型,在活體大鼠體內(nèi)使用眼眼底熒光造影檢查時(shí),看不到清晰的視網(wǎng)膜血管滲漏等大體病理特征；另外,使用臨床常用的眼底造影設(shè)備HRA-II,需要耗費(fèi)大量的時(shí)間調(diào)整眼位且尾靜脈注射造影劑困難。目的 建立一種新的眼底血管造影(Fundus Fluorescence Angiography,FFA)技術(shù),Micron-III小動(dòng)物成像儀聯(lián)合腹腔注射造影劑檢查有色素(Brown Norway RatBN)大鼠誘導(dǎo)的糖尿病模型,獲得清晰的視網(wǎng)膜血管病理圖像,為DR防治奠定基礎(chǔ)。 方法 ①健康BN大鼠和(Sprague Dawley Rat)SD大鼠(體重200-250g)各15只,尾靜脈一次性注射55mg/Kg鏈脲佐菌素(STZ),制作I型大鼠糖尿病模型。造模后,每周鼠尾斷端采血檢測(cè)血糖,8周后,血糖值穩(wěn)定于16.7mmol/1-27.8mmol/1的大鼠各10只納入研究；②以右眼為實(shí)驗(yàn)眼,裂隙燈照相觀察2組動(dòng)物的眼前節(jié)變化；③Micron-Ⅲ小動(dòng)物眼底成像系統(tǒng)聯(lián)合腹腔注射熒光素鈉造影劑,行眼底照相和FFA檢查,記錄2組動(dòng)物的眼底情況；④2組大鼠各取3只,制作視網(wǎng)膜血管消化鋪片,過碘酸雪夫(Periodic Acid SchiffStain,PAS)常規(guī)染色,顯微鏡下觀察血管的形態(tài)學(xué)改變；⑤對(duì)眼底造影圖像清晰的大鼠,3日后,使用目前的技術(shù)“海德堡眼底造影儀HRA-II聯(lián)合尾靜脈注射造影劑”進(jìn)行再次檢查,比較2種不同造影技術(shù)所需要的準(zhǔn)備時(shí)間及圖像差異。 結(jié)果 ①8周后,10只BN大鼠和10只SD大鼠符合血糖標(biāo)準(zhǔn),納入研究。2組動(dòng)物血糖數(shù)值無明顯差異(P0.05)；②BN組5只出現(xiàn)白內(nèi)障(5/10)，SD組6只出現(xiàn)白內(nèi)障(6/10),無明顯差異(P0.05)；③在棕褐色背景下,BN組視網(wǎng)膜血管顯影清晰,無脈絡(luò)膜背景熒光干擾,10只動(dòng)物FFA出現(xiàn)了血管迂曲、無灌注區(qū)、血管滲漏等典型糖尿病樣改變(10/10),而SD組由于迅速的脈絡(luò)膜背景熒光干擾,視網(wǎng)膜血管顯影不清晰,未見典型糖尿病樣改變(0/10),2組有顯著性差異(P0.05)。④2組動(dòng)物視網(wǎng)膜血管鋪片上可發(fā)現(xiàn)典型的DR形態(tài)學(xué)變化(6/6vs.6/6),如血管迂曲成袢,無細(xì)胞毛細(xì)血管等,無明顯差異(P0.05)；⑤使用Micron-Ⅲ小動(dòng)物眼底成像系統(tǒng)聯(lián)合腹腔注射熒光素鈉造影劑可迅速開展造影,平均準(zhǔn)備時(shí)間57.50±8.17s(n=7),而采用傳統(tǒng)的海德堡眼底造影儀HRA-Ⅱ和尾靜脈注射造影劑,準(zhǔn)備時(shí)間則需320.34±38.79s(n＝7),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05),新方法平均節(jié)省260s。2組FFA圖像無顯著性差異,僅為注射熒光素鈉后眼底顯影時(shí)間略有不同。尾靜脈注射后3-5s眼底開始熒光顯影,而腹腔注射后,需要腹膜吸收再入血存在著5s左右的時(shí)間滯后性,導(dǎo)致早期相不太清楚,但是中期相動(dòng)脈與靜脈顯影清晰度和持續(xù)時(shí)間比較理想。 結(jié)論 Micron-Ⅲ視網(wǎng)膜影像系統(tǒng)聯(lián)合腹腔注射熒光素鈉是一種簡(jiǎn)易有效的大鼠眼底檢查技術(shù)；BN大鼠眼底有棕褐色色素,其暗房效應(yīng)使得眼底照相、FFA效果明顯優(yōu)于SD大鼠。此兩個(gè)技術(shù)改進(jìn),簡(jiǎn)便、清晰地獲得了糖尿病大鼠視網(wǎng)膜血管的造影結(jié)果,為促進(jìn)DR的防治研究奠定了技術(shù)基礎(chǔ)。
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R587.2;R774.1

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2740990