【摘要】：第一部分：18F-FLT PET檢測FaDu裸鼠移植瘤放療過程中腫瘤再增殖研究研究背景及目的： 放療過程中的腫瘤再增殖為分次放療期間克隆源性腫瘤細胞不斷增殖的過程，是腫瘤放療局部失敗的重要原因。如何體外無創(chuàng)、定量地檢測腫瘤再增殖，，以通過適形調(diào)強放療實現(xiàn)對再增殖區(qū)域高劑量雕刻放療成為研究的熱點。18F-FLT為一種反映腫瘤細胞增殖狀態(tài)的PET示蹤劑，大量研究表明，18F-FLT PET顯像可以無創(chuàng)、定量地在分子水平觀察機體內(nèi)腫瘤的增殖情況。本研究的主要目的是首先對FaDu人咽鱗癌荷瘤裸鼠放療過程中的再增殖現(xiàn)象進行驗證，再于放療期間應(yīng)用18F-FLT PET顯像觀察裸鼠體內(nèi)腫瘤的增殖情況，并以腫瘤病理增殖指標Ki-67、溴化脫氧尿嘧啶核苷（BrdUrd）的變化為金標準對18F-FLT PET能否監(jiān)測放療過程中的腫瘤再增殖現(xiàn)象進行驗證。 材料和方法： 應(yīng)用4-6周齡,體重18-20g的Balb/c雌性裸鼠,于裸鼠右后肢皮下接種FaDu人咽鱗癌細胞，建立裸鼠移植瘤模型。裸鼠成瘤并達到入組標準后，按放療持續(xù)時間不同隨機分為五組：不照射組【1組】，照射12次/12天【2組】、照射18次/18天【3組】、照射12次/24天【4組】、照射18次/36天【5組】。放療方式采用常規(guī)分割放射治療，6MeV電子線，3.0Gy/次，每日或隔日照射。放療期間應(yīng)用游標卡尺每3天測量一次腫瘤體積。對照組和放療結(jié)束的不同時間點各給予一次18F-FLT micro-PET顯像，分析FLT攝取參數(shù)（SUVmax、SUVmean、T/NT）的變化。PET顯像結(jié)束后處死各組裸鼠，以免疫組織化學方法檢測各組腫瘤組織中Ki-67、BrdUrd的表達情況。 研究結(jié)果： 隨著常規(guī)分割放療時間的增加，與對照組相比，Ki-67和BrdUrd標記指數(shù)在放療 初期逐漸降低（P值均0.05），在放療后期又逐漸升高（P值均0.05）。隨放療時間延長，與對照組相比，SUVmax、SUVmean、T/NT值在放療的12次/12天組（P值均0.05）和18次/18天組(P值均0.05)出現(xiàn)顯著降低；然而在12次/24天組和18次/36天組，SUVmax、SUVmean、T/NT值與對照組相比差異無統(tǒng)計學意義（P值均0.05）。SUVmax、SUVmean、T/NT值與病理增殖指標（Ki-67和BrdUrd）的相關(guān)性分析顯示均呈顯著相關(guān)（與Ki-67，r:0.728-0.744，P值均0.05；與BrdUrd，r:0.770-0.842, P值均0.05）。 研究結(jié)論： 1、通過組織病理證實了FaDu人咽鱗癌荷瘤裸鼠在放療過程中出現(xiàn)了加速再增殖。 2、應(yīng)用18F-FLT micro-PET能夠監(jiān)測出放療過程中的腫瘤再增殖。 3、分次放療過程中18F-FLT攝取參數(shù)（SUVmax、SUVmean、T/NT）與病理增殖指標（Ki-67和BrdUrd）的變化呈顯著相關(guān)。 第二部分：Celecoxib抑制FaDu裸鼠移植瘤放療過程中腫瘤再增殖研究研究背景及目的： 腫瘤細胞快速增殖是腫瘤發(fā)展的基礎(chǔ)，與腫瘤的生長、浸潤、復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移等生物學行為和預(yù)后密切相關(guān)。隨著放射生物學的發(fā)展,越來越多的動物試驗和臨床資料表明,腫瘤細胞的加速再增殖是許多腫瘤常規(guī)分割放療失敗的主要原因之一。選擇性環(huán)氧化酶-2（COX-2）抑制劑塞來昔布（celecoxib）能夠通過抑制COX-2的表達，減少內(nèi)源性前列腺素E2(PGE2)產(chǎn)生，從而抑制腫瘤細胞的增殖。有研究報道，選擇性COX-2抑制劑能夠誘導(dǎo)細胞凋亡及抑制腫瘤細胞的增殖，從而提高腫瘤放療療效。本研究的主要目的是在已驗證的FaDu人咽鱗癌荷瘤裸鼠放療過程中的再增殖模型的基礎(chǔ)上，研究選擇性COX-2抑制劑celecoxib能否促進放療過程中的細胞凋亡及抑制放療過程中腫瘤再增殖。 材料和方法： 應(yīng)用4-6周齡,體重18-20g的Balb/c雌性裸鼠,于裸鼠右后肢皮下接種FaDu人咽鱗癌細胞，建立裸鼠移植瘤模型。裸鼠成瘤并達到入組標準后，按實驗要求隨機分為：對照組即不治療/24天組【1組】，對照組即不治療/36天組【2組】，單用celecoxib/24天組【3組】，單用celecoxib/36天組【4組】，單純放療組(12次/24天)【5組】,單純放療組(18次/36天)【6組】,放療（12次/24天）+celecoxib/24天組【7組】、放療（18次/36天）+celecoxib/36天組【8組】。Celecoxib (100mg/kg/day)，0.2ml/只，裸鼠每日灌胃給予，放療于灌藥后2小時內(nèi)進行。放療方式采用常規(guī)分割放射治療，6MeV電子線，3.0Gy/次，12-18次照射。放療期間應(yīng)用游標卡尺每3天測量一次腫瘤體積。在各組實驗結(jié)束后處死裸鼠，獲取腫瘤行免疫組化檢測增殖指標（Ki-67和BrdUrd）、表皮生長因子受體（EGFR）及凋亡相關(guān)蛋白（Caspase-3）表達的變化。 研究結(jié)果： 隨著常規(guī)分割放療時間的增加，與對照組相比，Ki-67和BrdUrd標記指數(shù)在放療初期逐漸降低（P值均0.05），在放療后期又逐漸升高（P值均0.05）。腫瘤生長曲線表明，與對照組比較，單純放療和聯(lián)合治療均能抑制腫瘤體積的增長，但聯(lián)合治療組的腫瘤體積增長最緩慢。與單純放療組比較，Ki-67標記指數(shù)在celecoxib聯(lián)合放療組出現(xiàn)明顯降低（celecoxib/24天+放療12次/24天組：P=0.004；celecoxib+放療18次/36天組：P=0.042）。與單純放療組比較,BrdUrd標記指數(shù)在celecoxib聯(lián)合放療組也出現(xiàn)顯著降低（celecoxib+放療12次/24天組：P=0.001；celecoxib/36天+放療18次/36天組：P=0.006）。與單純放療組相比，EGFR表達在聯(lián)合組顯著減低（celecoxib/24天+放療12次/24天組：P=0.037；celecoxib/36天+放療18次/36天組：P=0.031）。與單純放療組相比，聯(lián)合治療組的Caspase-3表達出現(xiàn)明顯增高（celecoxib/24天+放療12次/24天組：P=0.05；celecoxib/36天+放療18次/36天組：P=0.006）。 研究結(jié)論： 1、通過組織病理證實了FaDu人咽鱗癌荷瘤裸鼠在放療過程中出現(xiàn)了加速再增殖。 2、放療、塞來昔布治療及兩者聯(lián)合治療均能抑制腫瘤體積增長。 3、塞來昔布聯(lián)合放療可致腫瘤組織中增殖指標（Ki-67、BrdUrd）及表皮生長因子受體（EGFR）表達顯著降低，而凋亡相關(guān)蛋白（Caspase-3）表達顯著升高。
【學位授予單位】：濟南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R739.63

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 祝淑釵,翟福山,殷蔚伯,萬鈞;食管癌活檢標本PCNA、CyclinD1蛋白表達與DNA含量檢測的臨床意義[J];中國腫瘤臨床;2001年09期

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3 季明爍,殷蔚伯;頭頸部鱗癌潛在倍增時間和碘脫氧尿嘧啶標記指數(shù)測定在放射治療中缺乏預(yù)測價值[J];中華放射腫瘤學雜志;1998年02期

本文編號：2580864