【摘要】：目的探討AS-miR-21對鼻咽癌轉(zhuǎn)移潛能及其對Bcl-2調(diào)控作用機(jī)制。方法應(yīng)用MTT檢測鼻咽癌細(xì)胞增殖抑制率;Giemsa染色檢測鼻咽癌細(xì)胞克隆形成;細(xì)胞劃痕實(shí)驗檢測鼻咽癌細(xì)胞遷移能力;半定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測Bcl-2 mRNA表達(dá);免疫組化方法和蛋白質(zhì)印跡法檢測Bcl-2蛋白表達(dá)水平。結(jié)果結(jié)果顯示,AS-miR-21、miR-21和miR-NC組24hA值分別為0.12±0.01、0.23±0.02和0.22±0.02,F=106.47,P0.000 1;48hA值分別為0.21±0.02、0.53±0.03和0.52±0.02,F=340.01,P0.000 1;72hA值分別為0.43±0.03、0.75±0.03和0.66±0.02,F=209.45,P0.000 1;96hA值分別為0.74±0.02、0.95±0.03和0.93±0.01,F=114.52,P0.000 1。Giemsa染色結(jié)果顯示,AS-miR-21組克隆形成率為(0.35±0.02)%,比對照組的(0.65±0.06)%減少46.2%,t=8.215 8,P=0.001 2;miR-21組克隆形成率為(0.82±0.08)%,比對照組的(0.65±0.06)%增加20.7%,t=2.944 5,P=0.042 2。劃痕實(shí)驗結(jié)果顯示,12h后AS-miR-21組愈合率為(0.207±0.015)%,比對照組的(0.487±0.032)%減少57.49%,F=185.68,P0.000 1;24h后AS-miR-21組愈合率為(0.471±0.002)%,比對照組的(0.810±0.036)%減少41.85%,F=264.96,P0.000 1。RT-PCR結(jié)果顯示,AS-miR-21組Bcl-2 mRNA表達(dá)為0.252±0.053,比對照組的1.000±0.095減少74.8%,t=11.909 6,P=0.000 3;miR-21組Bcl-2 mRNA表達(dá)為1.837±0.152,比對照組的1.000±0.095增加83.7%,t=8.087 9,P=0.001 3。免疫組化結(jié)果顯示,AS-miR-21組Bcl-2蛋白表達(dá)灰度值為196.2±11.8,比對照組的126.9±7.3減少54.6%,t=15.793 7,P0.000 1。蛋白質(zhì)印跡結(jié)果顯示,AS-miR-21組Bcl-2蛋白表達(dá)為0.125±0.073,比對照組的1.000±0.163減少87.5%,t=15.492 7,P0.000 1;miR-21組Bcl-2蛋白表達(dá)為2.018±0.182,比對照組的1.000±0.095增加101.8%,t=13.176 1,P0.000 1。結(jié)論AS-miR-21能抑制鼻咽癌遷移及增殖并促進(jìn)其凋亡,此外,AS-miR-21通過負(fù)調(diào)控Bcl-2有可能成為鼻咽癌新靶點(diǎn)之一。

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2571147