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多重聚合酶鏈反應(yīng)診斷真菌性鼻竇炎的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2019-10-23 14:34
【摘要】:目的:通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)真菌菌株DNA構(gòu)建一多重PCR反應(yīng)體系,并初步探討其對(duì)真菌性鼻竇炎臨床標(biāo)本快速診斷及同時(shí)鑒定常見(jiàn)致病菌的臨床應(yīng)用。通過(guò)與傳統(tǒng)的診斷方法比較,評(píng)價(jià)多重PCR反應(yīng)體系快速診斷及菌種鑒定的診斷價(jià)值。 方法:選擇三對(duì)引物(真菌通用引物、曲霉特異性引物、毛霉特異性引物)建立多重PCR反應(yīng)體系,采用曲霉菌、毛霉菌、鏈格孢菌、白色念珠菌等6種標(biāo)準(zhǔn)菌株DNA驗(yàn)證體系的適用性和摸索反應(yīng)條件。同時(shí)將多重PCR、真菌培養(yǎng)兩種方法用于真菌性鼻竇炎的鼻竇內(nèi)容物的真菌檢測(cè),比較二者敏感性。 結(jié)果:三對(duì)引物具有較好的通用性和特異性,在適宜的反應(yīng)條件下能擴(kuò)增出特異性目的片段(真菌通用引物、曲霉特異性引物、毛霉特異性引物的目的片段長(zhǎng)度分別為:300-400bp、240bp、170bp),無(wú)明顯非特異性條帶干擾,目的條帶清晰。該反應(yīng)體系的檢測(cè)靈敏度為10pg/ul。 25例真菌性鼻竇炎標(biāo)本,真菌培養(yǎng)檢測(cè)陽(yáng)性10例,陽(yáng)性率40%;多重PCR體系檢測(cè)陽(yáng)性18例,陽(yáng)性率72%,采用配對(duì)資料χ2檢驗(yàn),兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論:利用6種標(biāo)準(zhǔn)真菌菌株成功建立了多重PCR反應(yīng)體系,其最低可檢測(cè)到10pg/ul的真菌DNA,可對(duì)真菌性鼻竇炎做出快速診斷并鑒定常見(jiàn)的致病菌屬。多重PCR體系對(duì)真菌性鼻竇炎的標(biāo)本的檢測(cè)陽(yáng)性率高于傳統(tǒng)真菌培養(yǎng)法。
【學(xué)位授予單位】:南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2011
【分類號(hào)】:R765.21

【參考文獻(xiàn)】

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2 劉銘!100730,劉華超!100730,韓德民!100730;鼻及鼻竇的霉菌性疾病[J];耳鼻咽喉-頭頸外科;2000年04期

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4 張盛忠,劉紅剛,劉銘,杜江,王毓新;鼻-鼻竇侵襲型真菌病的臨床和病理學(xué)觀察[J];中華耳鼻咽喉科雜志;2005年01期

5 劉銘;周兵;張盛忠;王毓新;;真菌性鼻竇炎一例[J];中華耳鼻咽喉頭頸外科雜志;2006年02期

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本文編號(hào):2552143

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