【摘要】：目的：研究ω-3不飽和脂肪酸對鼠視網(wǎng)膜新生血管的作用。 方法：選取出生后7日健康清潔級新生Wistar白鼠32只,雌雄不限,分為A、B、C、D4組,每組各8只,分別與母鼠共同飼養(yǎng),四組實驗鼠在空氣中喂養(yǎng)5日后將12日齡鼠與母鼠取出,均置于氧氣含量為75%±2%的密閉孵育箱中,每天將母鼠取出1次,每次正常環(huán)境中飼養(yǎng)3小時,5日后將12日齡小鼠取出,放置空氣中喂養(yǎng)至17日齡,即制備出新生鼠早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病變動物模型。其中A組為ROP模型對照組,B、C、D組分別小劑量治療組、中劑量治療組及大劑量治療組,分別給予不同劑量ω-3PUFAs喂養(yǎng),按母鼠公斤體重給與co-3PUFAs 2.5mg/kg/d、7.5mg/kg/d及15mg/kg/d喂養(yǎng)。手術(shù)顯微鏡下摘除小鼠視網(wǎng)膜,采用免疫組化觀察小鼠中突破視網(wǎng)膜內(nèi)界膜CD31的特異性表達,Western印跡法檢測視網(wǎng)膜標本中RGS5的表達。 結(jié)果：免疫組化觀察各組樣本鼠新生血管內(nèi)皮細胞核突破視網(wǎng)膜內(nèi)界膜數(shù),A組突破視網(wǎng)膜內(nèi)界膜的新生血管內(nèi)皮細胞核數(shù)為(17.00±3.42)個、B組突破視網(wǎng)膜內(nèi)界膜的新生血管內(nèi)皮細胞核數(shù)為(15.63±2.67)個、C組突破視網(wǎng)膜內(nèi)界膜的新生血管內(nèi)皮細胞核數(shù)為(9.13±1.96)個、D組突破視網(wǎng)膜內(nèi)界膜的新生血管內(nèi)皮細胞核數(shù)為(8.38±2.19)個；其中模型組突破視網(wǎng)膜內(nèi)界膜的新生血管內(nèi)皮細胞核數(shù)高于ω-3PUFAs喂養(yǎng)組,小劑量ω-3PUFAs喂養(yǎng)組突破視網(wǎng)膜內(nèi)界膜的新生血管內(nèi)皮細胞核數(shù)高于大劑量co-3PUFAs喂養(yǎng)組。A組與C組、A組與D組比較差異均有顯著意義((P0.001),其中A、B組相比較；C、D組相比較差異無顯著意義(P0.05)。 免疫印跡法檢測各實驗組視網(wǎng)膜RGS5的表達：A組RGS5/β-Actin值為(0.24±0.96)、B組RGS5/β-Actin值為(0.36±0.08)、C組RGS5/β-Actin值為(0.51±0.23)、D組RGS5/β-Actin值為(0.66±0.19)。其中模型組RGS5/β-Actin值低于ω-3PUFAs喂養(yǎng)組,小劑量RGS5/β-Actin值低于中劑量ω-3PUFAs喂養(yǎng)組,中劑量ω-3PUFAs喂養(yǎng)組略低于高劑量ω-3PUFAs喂養(yǎng)組,A組與C組、A組與D組比較差異均有顯著意義((P0.001),其中A、B組相比較；C、D組相比較差異無顯著意義(P0.05)。 結(jié)論：RGS5表達并介導鼠視網(wǎng)膜新生血管疾病的病理過程,方差分析顯示給予一定劑量的ω-3不飽和脂肪酸對于RGS5有調(diào)節(jié)作用,并參與對視網(wǎng)膜新生血管的調(diào)節(jié)。
[Abstract]:Aim: to study the effects of omega-3 unsaturated fatty acids on retinal neovascularization in rats. Methods: thirty-two healthy and clean newborn Wistar rats were divided into A, B, C, D4 groups (8 rats in each group) and fed with female rats, respectively, on the 7th day after birth, and were divided into three groups: group A, group B, group C and group D 4, 8 rats in each group. After being fed in the air for 5 days, the 12-day-old mice and the female rats were taken out in a sealed incubator containing 75% 鹵2% oxygen, and the female rats were taken out once a day for 3 hours in the normal environment. After 5 days, the 12-day-old mice were taken out and fed into the air until 17 days old, so as to establish the animal model of retinopathy of preterm infant in newborn mice. Group A was ROP model control group, group B, C, D were treated with low dose, middle dose and high dose respectively. The rats were fed with 蠅-3PUFAs at different doses, and given 2.5 mg / kg co-3PUFAs according to the body weight of the female rats, and the mice were fed with co-3PUFAs 2.5 mg / kg / kg, respectively. 7.5mg/kg/d and 15mg/kg/d were fed. The specific expression of CD31 in the inner limiting membrane of mouse retina was observed by immunohistochemistry, and the expression of RGS5 in retinal specimens was detected by Western blot. Results: the number of neovascularized endothelial nuclei breaking through the inner limiting membrane of retina in each group was observed by immunohistochemistry. The number of neovascularized endothelial cells in group A was (17.00 鹵3.42), and the number of nucleus of neovascularized endothelial cells in group A was (17.00 鹵3.42). The number of neovascularized endothelial nuclei in group B and group C were (15.63 鹵2.67) and (9.13 鹵1.96), respectively, and those in group C were (9.13 鹵1.96) and (9.13 鹵1.96), respectively, and that in group B and C were (15.63 鹵2.67) and (9.13 鹵1.96), respectively. In group D, the number of neovascularized endothelial cells breaking through the inner limiting membrane of retina was (8.38 鹵2.19). The number of neovascularized endothelial nuclei in the model group was higher than that in the 蠅-3PUFAs feeding group, which broke through the inner limiting membrane of retina. The number of neovascularized endothelial nuclei in the low-dose 蠅-3PUFAs feeding group was higher than that in the high-dose 蠅-co-3PUFAs feeding group. There was significant difference in the number of neovascularization nuclei between group A, group C, group A and group D (P0.001), in which A, and D were significantly higher than those in group A (P0.001). Group B was compared; There was no significant difference in C, D group (P0.05). The expression of RGS5 in retina of each experimental group was detected by immunoblotting: the value of RGS5/ 尾-actin in group A was (0.24 鹵0.96), B) and the value of RGS5/ 尾-actin was (0.51 鹵0.23) in group A (0.36 鹵0.08), C). The value of RGS5/ 尾-actin in group D was (0.66 鹵0.19). The value of RGS5/ 尾-actin in model group was lower than that in 蠅-3PUFAs feeding group, that in low-dose RGS5/ 尾-actin group was lower than that in mid-dose 蠅-3PUFAs feeding group, in middle-dose 蠅-3PUFAs feeding group was slightly lower than that in high-dose 蠅-3PUFAs feeding group, and that in groups A and C was lower than that in high-dose 蠅-3PUFAs feeding group. There was significant difference between group A and group D (P0.001), in which group A and group B were compared. There was no significant difference in C, D group (P0.05). Conclusion: the pathological process of retinal neovascularization was induced by the expression of RGS5. Variance analysis showed that 蠅-3 unsaturated fatty acids could regulate RGS5 and participate in the regulation of retinal neovascularization.
【學位授予單位】：石河子大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2010
【分類號】：R774.1

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本文編號：2453893